雷公藤根化学成分研究

严振，田洋，马跃平，傅晓春，张振学，王金辉*

(1.广东食品药品职业学院，广东 广州 510520；2.沈阳化工学院化学工程学院，辽宁 沈阳 110142；3.沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳 110016)

*王金辉，E-mail：wangjh1972@vip.sina.com

雷公藤根化学成分研究

严振1，田洋2，马跃平3，傅晓春1，张振学2，王金辉3*

(1.广东食品药品职业学院，广东 广州510520；2.沈阳化工学院化学工程学院，辽宁 沈阳110142；3.沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳110016)

目的研究雷公藤TripterygiumwilfordiiHook. f .根的化学成分。方法利用各种色谱方法进行分离纯化，根据理化性质和谱学数据对分离得到的化合物进行结构研究。结果从雷公藤根乙醇提取物中分离得到6个化合物，分别鉴定为5α-豆甾烷-3,6-二酮(5α-stigmast-3,6-dione,1)，6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one,2)，邻苯二甲酸二丁酯(phthalic acid dibutyl ester,3)，秦皮素(fraxetin,4)，β-谷甾醇(β-sitosterol,5)，胡萝卜苷(daucosterol,6)。结论化合物1、3、4为首次从卫矛科植物中分离得到，化合物2为首次从本属植物中分离得到。

雷公藤；化学成分；结构鉴定

雷公藤TripterygiumwilfordiiHook. f.系卫矛科雷公藤属植物，广泛分布于浙江、江西、安徽、湖南、广东、福建、台湾等地。其性苦、寒，有大毒，具有杀虫、消炎、活血通络、解毒的功效。现代临床广泛用于多种免疫系统异常而致的疾病，获得了良好的疗效。大量药理及临床已证明其提取物和某些成分具有免疫调节、抗炎、抗肿瘤和男性抗生育作用[1]。通过对雷公藤根的化学成分的研究，得到6个化合物并分别鉴定，为其药用资源的开发利用提供有益参考。

1 材料与仪器

BrukerARX-300和BrukerAV-600型核磁共振波谱仪(TMS内标，瑞士Bruker公司)；N2000型日立高效液相色谱仪；制备型色谱柱为YWCC18反相柱(5μm,10mm×250mm)；MP-S3型显微熔点测定仪(温度计未校正，日本Yanaco公司)；SephadexLH-20(美国Pharmacia公司)，柱色谱和薄层色谱硅胶(青岛海洋化工厂有限公司)；所用试剂为色谱纯和分析纯。

雷公藤(市售)经沈阳药科大学孙启时教授鉴定为TripterygiumwilfordiiHook. f .的根。

2 提取与分离方法

取雷公藤根20kg，用体积分数为90%乙醇煮沸提取，合并滤液，减压浓缩后得浸膏900g，将浸膏加适量水稀释，依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取。石油醚层和三氯甲烷层提取物(71.5g)进行硅胶柱色谱分离，以石油醚-丙酮系统(100∶1～1∶1)梯度洗脱。得到的流分(Fr.37～63)经重结晶处理后得化合物5；流分(Fr.88～96)经重结晶处理后得到化合物1；流分(Fr.143～169)经重结晶处理后得到化合物2；流分(Fr.213～256)经硅胶吸附柱色谱、SephadexLH-20柱色谱后，所得到的流分用高效液相色谱分离，最后得到化合物3；流分(Fr.506～554)经石油醚-丙酮反复洗脱，SephadexLH-20柱色谱得到化合物6；醋酸乙酯萃取物(27.7g)经硅胶吸附柱柱色谱，以三氯甲烷-甲醇系统(200∶1～1∶1)梯度洗脱，得到的流分(Fr.27～35)经重结晶处理后得到化合物4。

3 结果与讨论

3.1化合物1

无色针状结晶(甲醇)，与10%硫酸乙醇试剂显紫色；与Libermann-Burchard反应阳性，示为甾体或三萜类化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)谱中，高场区给出6个典型的甲基质子信号：δ：0.69(3H，s，H-18)，0.96(3H，s，H-19)，0.93(3H，d，J=6.2Hz,H-21)，0.84(3H，d，J=6.6Hz，H-26)，0.81(3H，d，J=6.8Hz，H-27)，0.85(3H,t，J=7.0Hz，H-29)；13C-NMR(75MHz,CDCl3)谱中，给出29个碳信号(数据如表1)，提示该化合物有可能是29C甾类化合物；13C-NMR谱中δ209.2、211.7两个碳信号提示该化合物中有2个酮羰基信号。其数据与文献[2]中谱学数据基本一致，故鉴定其为5α-豆甾烷-3,6-二酮(5α-stigmast-3,6-dione)，为卫矛科植物中首次分离得到。

3.2化合物2

无色针状结晶(石油醚-醋酸乙酯)，mp208～210℃；与10%硫酸乙醇试剂显紫色；与Libermann-Burchard反应阳性，示为甾体或三萜类化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)谱中，高场区给出6个典型的甲基质子信号：δ0.74(3H，s，H-18)，1.37(3H，s，H-19)，0.92(3H，d，J=6.4HZ，H-21)，0.84(3H，d，J=6.6HZ，H-26)，0.82(3H，d，J=6.6HZ，H-27)，0.85(3H，t，J=7.0HZ，H-29)；另外给出一个烯烃质子信号δ5.82(1H，s)及一个与连氧碳相连碳的质子信号δ4.35(1H，d，J=3Hz)。13C-NMR(75MHz，CDCl3)谱中，给出29个碳信号(数据如表1)，因此进一步推断该化合物为豆甾类化合物，δ200.4、168.44、126.35示结构中具有不饱和碳信号；δ73.30为6位连氧碳信号；此外低场区无其他碳信号，其数据与文献[3]中谱学数据基本一致，故鉴定其为6β-羟基-豆甾-4-烯-3-酮(6β-hydroxystigmast-4-en-3-one)，为本属植物中首次分离得到。

表1 化合物1～2的13C-NMR化学位移

3.3化合物3

棕红色油状物(甲醇)，ESI-MS[M+H]+279.1。1H-NMR(300MHz，CDCl3)谱中，δ7.72(1H，m，H-4)，7.54(1H，m，H-3)，4.32(2H，m，H-5)，1.70(2H，m，H-6)，0.97(3H，m，H-7)；13C-NMR(75MHz， CDCl3)谱中，共给出8个碳信号，δ167.6(C-1)，132.4(C-2)，130.8(C-3)，128.8(C-4)，65.5(C-5)，30.5(C-6)，19.1(C-7)，13.7(C-8)；其数据与文献[4]中谱学数据基本一致，故鉴定其为邻苯二甲酸二丁酯(phthalic acid dibutyl ester)，为卫矛科植物中首次分离得到。

3.4化合物4

黄色针状结晶(甲醇)，与三氯化铁-铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在。1H-NMR(300MHz，Pyr-d5)谱中，δ：7.67(1H，dd，J=9.32Hz，H-4)，6.29(1H，dd，J=9.32Hz，H-3)，6.68(1H，s，H-5)、3.78(3H，s，OCH3)；13C-NMR(75MHz，Pyr-d5)谱中，δ：161.6(C-2)，146.6(C-6)，145.0(C-4)，141.6(C-9)，140.8(C-7)，135.9(C-8)，112.2(C-3)，110.9(C-10)，100.49(C-5)，与文献[5]报道的秦皮素基本一致，故鉴定其为秦皮素(fraxetin)，为卫矛科植物中首次分离得到。

3.5化合物5

白色针晶(石油醚)，mp136～137℃，与10%硫酸乙醇试剂显紫色；与Libermann-Burchard反应阳性，与已知标准品β-谷甾醇共薄层，用3种不同溶剂系统展开，Rf值均一致，与β-谷甾醇混合后的熔点不下降，故鉴定其为β-谷甾醇(β-sitosterol)。

3.6化合物6

[1] 李卫东，王承华.雷公藤研究概况[J].承德医学院学报，1988,5(3)：180-183.

[2]Chun-ChaoZhao,Jian-HuaShao,XianLi,etal.AntimicrobialConstituentsfromFruitsofAilanthusaltissimaSwingle[J].Arch Pharm Res,2005,28(10):1147-1151.

[3] Xiao-Bai Sum, Pei-Hua Zao, Yang-Jun Xu,et al. Chemical constituents from the roots ofPolygonumbistorta[J]. Chemistry of Natural Compounds,2007,43(5):563-566.

[4] 张蕴晖.邻苯二甲酸二丁酷研究进展[J].卫生研究，2003,32(4)：407-408.

[5] 许旭东，胡晓茹，袁经权，等.草珊瑚中香豆素化学成分研究[J].中国中药杂志，2006,8(33)：900-902.

StudyontheChemicalConstituentsoffromtheRootsofTripterygiumWilfordii

Yan Zhen1, Tian Yang2, Ma Yueping3, Fu Xiaochun1, Zhang Zhenxue2, Wang Jinhui3

(1.GuangDongFoodandDrugVocationalCollege,GuangzhouGuangdong510520,China;2.SchoolofChemicalEngineering,ShenyangUniversityofChemicalTechnology,ShenyangLiaoning110142,China;3.SchoolofTriditionalChineseMatericaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,ShenyangLiaoning110016,China)

Objective: To study the chemical constituents of theTripterygiumwilfordiiHook. f..MethodsThe constituents were isolated by chromatography methods. Physico-chemical properties and spectroscopic analysis were employed for the structural identification.ResultsSeven compounds were obtained and their structure were identified as5α-stigmast-3,6-dione (1),6β-hydroxystigmast-4-en-3-one(2), phthalic acid dibutyl ester(3), fraxetin (4),β-sitosterol(5), daucosterol(6).ConclusionAmong the compounds, compounds1,3and4were isolated from Celastraceae for the first time, and compound2was isolated from genusTripterygiumfor the first time.

Tripterygiumwilfordii; Chemical constituent; Structural identification

2009-09-29)