HPLC测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量

王丽彦

(长春市食品药品检验所,吉林 长春 130012)

*王丽彦，E-mail：wgb654321@yahoo.cn

HPLC测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量

王丽彦*

(长春市食品药品检验所,吉林 长春130012)

目的建立高效相液色谱法测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量。方法采用十八烷基键合硅胶为填充剂色谱柱(4.6mm×150mm，5μm)，以乙腈-水(25∶75)为流动相，检测波长为270nm。结果淫羊藿苷的回归方程为Y=1490.44X-12.4236(r=1.0000)，线性关系良好；平均回收率为99.5%。结论该方法操作简便，结果准确，可用于抗骨增生片中淫羊藿苷的含量测定。

抗骨增生片；淫羊藿苷；高效液相色谱法

抗骨增生片收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂》第七册中，由熟地黄、鹿衔草、骨碎补(烫)、鸡血藤、肉苁蓉、淫羊藿、莱菔子7味药组成。具有补肾，活血，止痛的功能。用于肥大性脊椎炎，颈椎病，跟骨刺，增生性关节炎，大骨节病。原标准中无定性、定量分析项目，不能有效控制成药质量。本实验建立高效液相色谱法测定抗骨增生片中淫羊藿苷的含量，结果表明方法专属性较强，能够有效地控制抗骨增生片的质量。

1 仪器与试药

1.1仪器

HP1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)，Agilent-C18色谱柱(4.6mm×150mm，5μm)，GR-202电子天平。

1.2试药

淫羊藿苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号110737-200312，供含量测定用)。抗骨增生片(吉林省罗邦药业有限公司，批号见表2，含淫羊藿0.67mg/片),乙腈为色谱纯。

2 方法[1]与结果

2.1色谱条件

流动相：乙腈-水(25∶75)；流速：1.0mL·min-1；进样量：10μL；柱温：25℃；检测波长：270nm；理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于1500。

2.2对照品溶液的制备

精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇溶解，制成1mL含淫羊藿苷0.04mg的溶液，即得。

2.3供试品溶液的制备

取本品20片，除去糖衣，研细，取约3g，精密称定，置100mL量瓶中，加稀乙醇超声处理1h，放冷至室温加稀乙醇稀释至刻度，滤过，取滤液即得。

2.4阴性对照溶液的制备

取按处方比例制成除去淫羊藿的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。

2.5系统适应性试验

分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL，注入色谱仪，同法测定，结果在淫羊藿苷峰相应位置上，阴性对照无干扰，结果见图1～3。

图1 淫羊藿苷对照品HPLC图

图2 抗骨增生片HPLC图

图3 缺淫羊藿的阴性对照HPLC图

2.6线性关系

精密量取淫羊藿苷对照品溶液2，5，10，15，20，50μL注入色谱仪，记录色谱图，以峰面积Y对进样量X(μg)进行线性回归，得淫羊藿苷回归方程Y=1490.44X-12.4236，r=1.0000，结果表明淫羊藿苷在0.08～2μg线性关系良好。

2.7精密度试验

取同一对照品溶液，连续进样6次，测得淫羊藿苷峰面积的RSD=0.4%，表明精密度良好。

2.8重现性试验

取样品(批号20080607)，精密称定6份，按2.3项下方法测定淫羊藿苷含量的RSD=0.7%，表明本方法重复性良好。

2.9稳定性试验

取同一供试品溶液，于0，2，4，6，8，12，24h，分别测得淫羊藿苷峰面积的RSD=1.3%，表明供试品溶液在24h内稳定。

2.10加样回收率试验

精密称取含量已测定的供试品(批号20080607，含淫羊藿苷为0.67mg·片-1)，分别置于6个100mL量瓶中，精密加入淫羊藿苷对照品溶液(2.803mg·mL-1)1mL，按2.3项下方法测定淫羊藿苷的含量，计算加样回收率，结果见表1。

2.11样品含量测定

分别吸取对照品溶液、供试品溶液各10μL,注入色谱仪,记录色谱图,测定10批样品的含量，结果见表2。

表1 淫羊藿苷加样回收率试验

注：淫羊藿苷对照品加入量均为2.803 mg

表2 抗骨增生片中淫羊藿苷含量测定 mg/片

3 讨论

[1] 国家药典委员会.中国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社，2005：229.

DeterminationofIcariininKangguzengshengTabletsbyHPLC

Wang Liyan

(ChangchunInstituteforFoodandDrugControl,ChangchunJilin130012,China)

Objective: To establish a HPLC method for determination the content of icariin in Kangguzengsheng tablets.MethodsAn Agilent C18column (250mm×4.6mm,5μm) was used, the mobile phase was consisted of acetonituile-water(25∶75) at a flow rate of1.0mL·min-1. UV detection wavelength was270nm.ResultsThe calibration curve of Icariin wasY=1490.44X-12.4236(r=1.0000)，and the average recovery was99.5%(n=6).ConclusionThe methed is simple, accurate. It can be used for quality control of Kangguzengsheng tablets.

Kangguzengsheng tablets；Icariin；HPLC

2009-09-02)