泰山多花黄精试管苗生根技术研究△

李文金，毕研文，陈建生，张士刚， 宫俊华

栽培规范

山东省泰安市中药现代化项目“泰山黄精组培快繁技术研究与示范”(泰农科发20067号)

*李文金，(0538)8500101

泰山多花黄精试管苗生根技术研究△

李文金*，毕研文，陈建生，张士刚， 宫俊华

(山东省泰安市农业科学研究院，山东 泰安271000)

目的提高泰山黄精试管苗的生根率，为其快速繁殖提供依据。方法以泰山多花黄精试管苗为试验材料，以改良MS为基本培养基，研究了不同水平NAA、蔗糖、暗培养时间对生根产生的影响。结果暗培养和NAA对生根率有显著影响，蔗糖的影响作用较小；NAA在0.5～1.0mg·L-1、蔗糖在20～30g·L-1时，单株生根条数较多，而暗培养时间长短对其单株生根条数影响不大；NAA浓度的大小对其生根长度影响最大，蔗糖和暗培养时间对生根长度影响不大。结论试管苗生根的最佳培养组合为：改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培养7d，生根率高达96%，有效解决了黄精组培快繁中生根率低的问题。

泰山多花黄精；试管苗；生根

泰山多花黄精是泰安市农科院中草药所工作人员在泰山海拔600m以上的野生环境条件下采集的黄精新种源，通过多年的人工驯化筛选，选育表现稳定、抗性强、适应性广的质优高产新种质[1]，其保健功能好，药效明显[2]。为加速其繁殖，拟用组织培养技术进行扩繁。在泰山黄精组培快繁技术研究中，泰山黄精试管苗的生根率太低，最高的也只有55.0%。为了提高泰山黄精试管苗的生根率，为其快速繁殖提供依据，我们进行了泰山黄精试管苗生根技术研究。

1 材料

材料选用泰安市农业科学研究院生物工程技术研究所生产的泰山黄精组培繁殖苗。

2 方法

2.1试验设计

试验于2007～2008年在泰安市农科院生物工程技术中心进行。选取高度为2cm左右的试管苗新梢转接至不同处理的生根培养基上进行培养。生根培养基以改良MS为基本培养基[3]，其他组成包括NAA、蔗糖和暗培养3个因素。每个因素设置3个水平，按正交试验L9(34)组成9个不同的处理(不同因素和处理水平见表1)，每个处理接种50株。培养30d后调查其生根株数、生根率、单株生根条数和平均根长。用F检验统计分析不同因素、水平的作用效果。

表1 因素水平表

2.2其他培养条件

温度：(25±2)℃，光照度：2000～3000lux，光照时间：12h·d-1，pH5.6～5.8，琼脂6.0g·L-1。

3 结果与分析

结果见表2。3.1不同因素水平对泰山黄精试管苗生根率的影响

由表2可以看出，根据K值判断NAA、蔗糖、暗培养时间3因素对生根率的作用效果为：暗培养>NAA>蔗糖。根据K值判断每个因素不同水平的作用：(1)NAA的3个浓度水平中，当浓度为0.5，1.0mg·L-1时有利于试管苗的生根，但二者之间差异不大。(2)蔗糖3个浓度水平的大小，对其生根率影响差异明显。(3)暗培养时间的长短对其生根率影响较大，生根率随暗培养时间的延长明显提高，暗培养7d时生根率达到最高。

3.2不同因素水平对单株生根条数的影响

从表2中可以看出，NAA和蔗糖对其单株生根条数影响较大。NAA在0.5～1.0mg·L-1、蔗糖在20～30g·L-1时，泰山黄精试管苗单株生根条数较多，每株有根2.89～3.30条。而暗培养时间长短对其单株生根条数影响不大。

表2 试管苗在不同生根培养基上的生根情况调查及分析

3.3不同因素水平对生根长度的影响

通过对不同处理生根长度的调查，可以看出，NAA浓度的大小对其生根长度影响最大，当NAA为0.5mg·L-1时，其根长为1.7cm，蔗糖和暗培养时间对生根长度影响不大。

综合上述分析得出，泰山黄精试管苗生根最佳培养基组合为，改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培养7d。

3.4不同因素水平对试管苗生根率、单株生根条数和平均根长影响的差异显著性检验

不同因素水平的方差分析见表3。方差分析的F检验表明，NAA对生根率的影响达显著水平，而对单株生根条数和平均根长的影响差异不显著。暗培养时间对生根率的影响达极限水平，对单株生根条数和平均根长的影响差异不显著。蔗糖对试管苗的生根率、单株生根条数和平均根长的影响均差异不显著。

表3 不同因素水平差异显著性分析

注：*F0.05(2.2)=19，**F0.01(2.2)=99.0

4 小结与讨论

泰山黄精系百合科黄精属药用植物,其药用价值大大高于异地产黄精。由于长期大量采挖，野生资源面临枯竭的境地。近年来开始人工种植，生产上多采用分根繁殖，其生根困难，繁殖系数低，质量不稳定，故黄精种苗问题已成为人工大面积种植的主要问题。用组织培养技术建立快速繁殖体系，能有效解决黄精种源问题，但泰山黄精试管苗的生根率太低，这是进行规模化生产面临的最大障碍。

在泰山黄精试管苗的生根培养中，选用改良1/2MS+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20g·L-1+暗培养7d作为其最佳生根培养组合，其单株生根3.9条，平均根长1.5cm,且根较粗壮，生根率高达96%，远远高于以前研究最高55.0%的生根率，有效解决了黄精组培快繁中生根率低的问题。

[1] 毕研文，宫俊华，杨永恒.泰山黄精综合栽培技术研究[J].中国农学通报期刊社，2005，(12)：280-282.

[2] 李元富，张义涛，刘道富，等.泰山药用植物[J].中国医药科技出版社，1996，(10)：245.

[3] 冉懋雄，贺定翔，毛秀华，等.中药组织培养实用技术[J].科学技术文化出版社，2004，(8)：411-414.

2009-09-27)