离子敏感型左氧氟沙星原位胶化滴眼液的制备及质量控制

杨远荣，任贻军，林飞刚

（1.华中科技大学同济医学院附属荆州医院，湖北 荆州 434020； 2.郧阳医学院药护学院，湖北 十堰 442000）

离子敏感型左氧氟沙星原位胶化滴眼液的制备及质量控制

杨远荣1，任贻军1，林飞刚2

（1.华中科技大学同济医学院附属荆州医院，湖北 荆州 434020； 2.郧阳医学院药护学院，湖北 十堰 442000）

目的 制备左氧氟沙星原位胶化滴眼剂并建立其质量控制方法。方法 以氯化钠为渗透压调节剂、海藻酸钠为增稠剂、羟苯乙酯为防腐剂，制备左氧氟沙星原位胶化滴眼剂，用高效液相色谱法测定含量。结果 制得的液体为无色或浅黄色澄明液体，pH为5.57，鉴别、检查结果均符合2005年版《中国药典（二部）》中的相关规定，含量测定的线性范围为9.39～62.60!g/mL，平均回收率为99.27%，RSD为2.92%（n=6）。结论 左氧氟沙星原位胶化滴眼液处方合理，质量符合要求。

左氧氟沙星；原位胶化；滴眼剂；质量控制

Abstract：Objective To prepare insitu gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops and to establish its quality control method.MethodsThe insitu gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops was prepared with sodium chloride as buffer to regulate the pH value and osmotic pressure and with sodium polymannuronate as thickener.The content of levofloxacin hydrochloride was determined by high performance liquid chromatography(HPLC).Results The sustained-release eye drops were colorless or yellow limpid liquid.Its test and identificationResultsall conformed to the related stipulation stated in Chinese Pharmacopeia(2005 edition).There was the good linear relationship within the concentration range of 9.39-62.60!g/mL for levofloxacin hydrochloride，and its average recovery rate was 99.27%，RSD was 2.92%and pH was 5.57.Conclusion The preparative method is simple and feasible.The quality of insitu gelling of Hydrochloride Levofloxacin Eye Drops is stable and controllable.

Key words：levofloxacin；insitu gelling；eye drops；quality control

左氧氟沙星是新一代广谱、高效氟喹诺酮类抗微生物药，抗菌活性是氧氟沙星的2倍，在水中的溶解度是氧氟沙星的8倍[1]。该药在体内吸收迅速，多种剂型已广泛用于各种疾病的治疗，效果良好。其眼内通透性良好，以0.3%的滴眼液单次滴眼可在房水中达到多数敏感菌的最低抑菌浓度(MIC)[2]。由于眼部运动，滴眼液用后大部分经鼻泪管流出，或被泪液稀释，或直接流出，常通过增加给药频率或提高药物浓度弥补这一不足，但高浓度药物会增加全身性毒副作用[3]。为了提高滴眼液生物利用度及延长药物作用持续时间，笔者研制了左氧氟沙星原位胶化滴眼液，并采用高效液相色谱法测定其含量，报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1100型高效液相色谱仪（安捷伦公司），包括在线脱气机、G1311A四元泵、自动进样器、柱温箱、Agilent化学工作站。左氧氟沙星原料(河南省龙泉集团药业有限公司，纯度为97.78%，批号为20060220)；左氧氟沙星对照品(中国药品生物制品检定所，批号为1305182200602)；海藻酸钠(青岛胶南明月海藻化工有限公司，药用级，批号为20060225)；氯化钠、羟苯乙酯（药用级），乙醇（色谱纯），其他试剂（分析纯）。

2 方法与结果

2.1 处方及制备

处方：左氧氟沙星3 g，海藻酸钠5 g，羟苯乙酯0.5 g，氯化钠8.5 g，注射用水加至1 000 mL。

制备：称取海藻酸钠5 g，加水200 mL，缓慢搅拌使之溶解，静置备用；称取羟苯乙酯0.5 g，加水500 mL，煮沸，缓慢搅拌使之溶解；精密称取左氧氟沙星3 g，氯化钠8.5 g，加入其中，搅匀后加入制备好的海藻酸钠溶液，缓慢搅拌至澄清，以0.1 mol/L的氢氧化钠溶液调pH至5.0～6.0，加水至900 mL。以0.8!m的滤膜滤过，自滤器上添加注射用水至1 000 mL，摇匀，严封，用100℃ 流通蒸汽灭菌30 min，分装即得，10 mL/支。

2.2 一般质量控制

性状：本品为无色或淡黄色澄明液体。

鉴别：在含量测定项下，供试品溶液主峰的保留时间应与左氧氟沙星对照品溶液主峰的保留时间一致。

检查：pH为5.0～6.0，其他应符合2005年版《中国药典（二部）》眼用制剂项下的规定[4]。3批样品的pH平均值为5.57。

2.3 含量测定（高效液相色谱法）

2.3.1 溶液配制

精密称取左氧沙星对照品31.3 mg，置100 mL量瓶中，用0.01 mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀即得质量浓度为0.313 g/L的对照品溶液，避光冷藏保存；精密量取样品1 mL，置100 mL量瓶中，用0.01 mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，过0.45!m微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；除不加左氧氟沙星外，依法制备阴性样品，按供试品溶液制备方法制得阴性对照品溶液。

2.3.2 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Zorbax SB-C18柱(250 mm ×4.6 mm，5!m)；流动相：磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾3.4 g，磷酸4 mL，加水至1 000 mL，pH=2.8)-甲醇(65 ∶35)；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃；检测波长：293 nm；进样量：20!L。在此条件下，主药和其他杂质峰的分离度应大于1.5。色谱图见图1。可见，空白辅料对样品测定无干扰，样品主峰的保留时间与对照品主峰的保留时间一致。

2.3.3 方法学考察

标准曲线绘制：精密量取对照品溶液，用0.01 mol/L的盐酸溶液稀释成质量浓度分别为 9.39，15.65，31.30，43.82，50.08，62.60!g/mL的系列溶液。取20!L进样，以左氧氟沙星的峰面积(A)对进样质量浓度(C)进行线性回归，得回归方程 A=83.932 C+29.48，r=1.00（ n=6)。结果表明，左氧氟沙星质量浓度在9.39～62.60!g/mL范围内与峰面积线性关系良好。

图1 高效液相色谱图

精密度试验：精密量取对照品溶液1.0 mL，置10 mL量瓶中，加0.01 mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，分别于1 d内和不同天内依法测定含量。结果日内精密度的 RSD为0.98%（n=3），日间精密度的 RSD为0.39%（n=3），表明方法精密度良好。

重现性试验：精密量取同一批样品1.0 mL，置100 mL量瓶中，加0.01 mol/L盐酸至刻度，摇匀，依法进样测定。结果平均含量为28.78!g/mL，RSD为1.41%（n=5)，表明方法重现性良好。

回收率试验：精密量取对照品溶液10 mL，置100 mL量瓶中，再加入1.0 mL阴性对照品溶液，以0.01 mol/L盐酸溶液稀释至刻度，依法测定峰面积并计算含量。结果见表1。

表1 左氧氟沙星回收率试验结果（n=6）

稳定性试验：取同一供试品溶液，于 0，2，4，6，8 h时分别进样测定含量。结果平均含量为28.97!g/mL，RSD为1.02%(n=5)。

2.3.4 样品含量测定

取样品3批，精密吸取适量，用0.01 mol/L盐酸稀释成每1 mL含左氧氟沙星0.3 mg的溶液，作为供试品溶液。依法测定峰面积并计算含量，本品含左氧氟沙星应为标示量的90.0%～110.0%。结果见表2。

3 讨论

滴眼液具有易配制、易过滤除菌和使用方便等优点，且易被患者接受，因此成为最主要的眼科用药。但由于眼角膜屏障、泪液的稀释和泪道的引流等，传统滴眼液的生物利用度较低，疗效往往欠佳[5]。一般滴眼剂以水溶液为主，包括少数水性混悬液，用后约有70%的药液直接从眼中溢出，若眨眼将有90%的药液损失；凝胶剂虽然能延长药物的作用时间，达到增加疗效的作用，但也有分剂量不准确、黏度较大、给药不方便、患者顺应性不好等缺点。原位胶化滴眼剂不同于传统的亲水凝胶剂，是指以溶液状态给药后立即在用药部位发生相转变形成的非化学交联的半固体制剂[6]。药物在眼部被相对固定，局部吸收较多，某些极苦或强刺激性的药物不会大量迅速流入口鼻，减轻了患者痛苦，患者依从性大大提高，在一定程度上还减少了用药量，减少了不良反应的发生。原位胶化滴眼剂以其分剂量准确、使用方便、生物利用度高、滞留时间长、控制释药性能良好、患者顺应性好而成为眼用制剂研究领域的热点。

表2 样品含量测定结果（，n=3）

表2 样品含量测定结果（，n=3）

批号09041701 09041702 09041703标示量(%)93.43±2.18 93.81±1.67 96.37±1.30 RSD(%)2.33 1.78 1.34

人的泪液中含有大量Na+，K+，Ca2+等阳离子，某些多糖类衍生物能够与其中的阳离子络合发生构象改变，使溶液黏度急剧增大，溶液发生相变，转化成凝胶状态，而在眼中形成凝胶[7]。本制剂中的海藻酸钠就具有这一特性，在遇到阳离子时能迅速发生相变，黏附在角膜上，延长药物的作用时间。

左氧氟沙星原位胶化滴眼剂中的海藻酸钠具有一定的黏度，容易堵塞色谱柱，影响测定，故笔者采用离心法消除海藻酸钠的干扰。方法学考察结果表明，高效液相色谱法能够满足本制剂质量控制的要求。

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Preparation and Quality Control of Ion－Activated in Situ Gelling of Levofloxacin Hydrochloride Eye Drops

Yang Yuanrong1，Ren Yijun1，Lin Feigang2
(1.Jingzhou Hospital Affiliated to Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Techololgy，Jingzhou，Hubei，China 434020；2.Pharmacy and Nurse College，Yunyang Medical College，Shiyan，Hubei，China 442000)

TQ460.6；R988.1

A

1006－4931(2010）07－0038－02

杨远荣，男，硕士，副主任药师，主要从事临床药学工作，（电话）0719-8499992（电子信箱）yangyr1970@sina.com。

2009－06－02；

2009－07－16）