颈康片质量标准研究

林向前

（福建省漳州市中医院，福建 漳州 363000）

颈康片是我院省级重点专科康复科的医院特色制剂，由马钱子、白芍、葛根、天麻等药材组方，具有解肌镇痛、舒筋通络、祛风除湿的功效，用于治疗颈椎病、颈背肌筋膜炎、肩周炎。为控制制剂质量，笔者参考有关文献对其质量标准进行了研究，现报道如下。

1 仪器与试药

2F-2型三用紫外仪；TG328B型电光分析天平（上海天平仪器厂）；BP211D型电子天平（Sarhorius公司）；UV-160A型紫外分光光度计（Shimadzu公司）；KQ5200DB型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。马钱子碱对照品（批号为0706-200104）、芍药苷对照品（批号为 110736-200422）、士的宁对照品（批号为0705-200005）均由中国药品生物制品检定所提供；薄层用硅胶G（青岛海洋化工有限公司）；颈康片（本院制剂室，批号为20021201，20030801，20040101）；试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 定性鉴别[1]

马钱子：取样品15片，研细，置具塞锥形瓶中，加氯仿30 mL，浓氨试液1 mL，超声处理30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1 mL使溶解，作为供试品溶液。同法制备缺马钱子的阴性对照品溶液。取马钱子碱对照品，加氯仿制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液（16∶12∶1∶4）的上层液为展开剂，展开，取出，晾干。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液色谱中则无此斑点（图1 A）。

白芍：取样品10片，研细，加乙醇20 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。同法制备缺白芍的阴性对照品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1 mL含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2005年版《中国药典（一部）》附录ⅥB]试验，吸取上述3种溶液各10 μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰。供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液色谱中则无此斑点（见图1 B）。

2.2 士的宁含量测定

2.2.1 溶液制备[2]

取样品100片，称定质量，求得平均片重，将药片研细，精密称取相当于40片重的量，置100 mL具塞锥形瓶中，精密加入氯仿25mL与浓氨水试液4 mL，密塞，摇匀，称定质量；冷浸1 h后，超声处理30 min，放冷，用氯仿补足减失的质量，摇匀，滤过；将该滤液置分液漏斗中，以3%硫酸溶液萃取3次，每次15 mL，萃取液均以3%硫酸预先湿润的滤纸滤入50 mL量瓶中，并以3%硫酸适量洗涤滤器，洗液并入量瓶中，再加3%硫酸稀释至刻度，摇匀；精密量取续滤液2 mL，置25 mL量瓶中，加3%硫酸稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。取缺马钱子的阴性样品，同法操作，制得阴性对照品溶液，注意阴性样品称取量与供试品的量应相近（小于0.5%）。取士的宁对照品适量（5.455 mg），精密称定，置50 mL量瓶中，用稀硫酸（3→100）溶解并稀释至刻度，配成质量浓度为0.1091 g/L的对照品贮备液。

2.2.2 测定波长选择[2]

精密量取对照品贮备液3 mL，置 25 mL量瓶中，加3%硫酸稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。以稀硫酸为空白，在200～400 nm波长范围内检测对照品、供试品及阴性对照品溶液的紫外吸收光谱。结果显示，士的宁对照品溶液在254 nm波长处有最大吸收，样品中士的宁在259 nm波长处有最大吸收，而阴性对照品在254 nm及259 nm波长处均无干扰（图2），且259 nm波长下士的宁质量浓度在一定范围内与吸收度有良好的线性关系，故选择259 nm为检测波长。

图2 紫外吸收图谱

2.2.3 方法学考察

线性关系考察：精密量取士的宁对照品贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，4.5 mL，分别置 25 mL量瓶中，用稀硫酸稀释至刻度，摇匀，配制成系列质量浓度的溶液，以稀硫酸为空白，在259 nm波长处测定吸收度 A。以吸收度 A对质量浓度 C作线性拟合，得回归方程 A=0.034 1 C+0.000 1（n=6）。结果表明，士的宁质量浓度在2.18～19.64 μg/mL范围内与吸收度呈良好的线性关系。

精密度试验：取质量浓度为13.092 μg/mL的士的宁对照品溶液，重复测定5次。结果平均吸收度值为0.448，RSD为0.12%（n=5），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于 0，2，4，8，16，24 h 时依法测定。结果士的宁吸收度的 RSD为0.28%（n=6），表明供试品溶液在24 h内稳定。

重现性试验：精密称取同一批供试品，分别制备5份供试品溶液并在259 nm波长处测定。结果士的宁平均含量为0.062 0%，RSD=3.40%（n=5），表明该方法重现性良好。

加样回收试验：精密量取对照品贮备液（0.109 1 g/L）2，3，4 mL各两份，分别装入50 mL量瓶中，然后往其中加入已知质量浓度的供试品提取物的续滤液2 mL，用稀硫酸稀释至刻度。在259 nm波长处依法测定含量并计算回收率。结果见表1。

表1 士的宁加样回收试验结果（n=6）

2.2.4 样品含量测定

精密称取3批样品，按供试品溶液制备方法制备溶液，在259 nm波长处以阴性对照品溶液为空白，同法测定供试品溶液的吸收度值，代入回归方程计算。结果批号为20021201，20030801，20040101的3批样品中士的宁相对百分含量分别为0.063 1%，0.064 5%，0.062 0%。

3 讨论

士的宁最小中毒剂量为5～10 mg，颈康片每天服用量约3.6 g，其士的宁含量约为2.232 mg，远小于最小中毒剂量，由此可见，该药常用量服用是安全的。在供试品溶液制备过程中，曾使用回流法提取，但与超声法比较相对费时，且两法效果基本一致，故选用浸渍加超声法进行样品提取。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2005：34.

[2]林向前，何鸿钦，范展霞.紫外分光光度法测定接骨丹中士的宁的含量[J]. 中国药业，2005，14（8）：27-28.