前S1抗原与丙氨酸氨基转移酶联合检测诊断乙型肝炎病毒复制

贾 莉，部小霞，李建华，林贵高，鄢盛恺

（中日友好医院 检验科，北京 100029）

前S1抗原与丙氨酸氨基转移酶联合检测诊断乙型肝炎病毒复制

贾 莉，部小霞，李建华，林贵高，鄢盛恺

（中日友好医院 检验科，北京 100029）

目的：探讨前S1抗原与丙氨酸氨基转移酶（ALT）在诊断乙型肝炎病毒复制中的临床价值。方法：对150例乙型肝炎病毒s抗原（HBsAg）阳性的样本分别进行血清前S1抗原、乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸（HBVDNA）和ALT的检测，前S1抗原采用酶联免疫吸附法，HBV-DNA采用实时荧光定量聚合酶链反应法，ALT采用全自动生化分析仪检测。结果：150例样本HBV-DNA均为阳性（≥103IU/ml），其中前S1抗原阳性116例，两者符合率为77.3%。前S1抗原阳性的116例中95例（81.9%）表现为乙型肝炎病毒的高复制（HBV-DNA＞104IU/ml），同时51例ALT不升高的样本中35例（68.6%）HBV-DNA＞104IU/ml。结论：前S1抗原是反映乙肝病毒复制及复制程度高低的指标，与血清ALT同时检测可以指导临床慢性乙型肝炎患者的定期复检及疗效判定。

乙型肝炎病毒；前S1抗原；病毒复制；乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸

Author's addressDepartment of Clinical Laboratory，China-Japan Friendship Hospital，Beijing 100029，China

对乙肝患者定期进行肝功能和乙肝病毒核酸（hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid，HBVDNA）定量检测对判断患者治疗效果及其预后有重要意义，尤其是HBV-DNA的定量检测能直观、准确地反映出病毒在人体内的复制情况。但由于HBV-DNA定量通常采用实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）的方法进行，存在着检查成本较高、耗时较长、检测过程容易受污染等缺点，在基层实验室的推广应用受到一定的限制。前S1抗原 （pre-S1 antigen，pre-S1 Ag）是乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）外膜蛋白的组成成分之一，由108或119个氨基酸残基组成，其表面含有肝细胞受体，在HBV感染肝细胞和机体免疫应答方面起着重要作用。已有研究[1～5]报道前S1抗原可以反映乙肝病毒复制和传染性的强弱，我们综合分析了HBsAg阳性患者的血清前S1抗原、丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）和 HBV-DNA 的变化，对前S1抗原与ALT联合检测的临床应用价值进行探讨，以期能为慢性乙肝患者是否有必要开始治疗、治疗效果监测及预后判断方面提供一个更经济、快速、简便的检测指标。

1 对象与方法

1.1 研究对象

150份HBsAg阳性的样本，来源于2009年4月～8月本院门诊及住院患者空腹12h后的血清样本，其中男84例，女66例，年龄19～81岁。

1.2 检测方法

ALT采用RANDOX试剂速率法测定，质控品批号536UN，404UE，所用仪器为日立7600全自动生化分析仪，测定当日质控均合格（在±2SD之间），＜40IU/ml为正常参考范围。

前S1抗原采用上海阿尔法生物技术有限公司试剂盒 （批号20090318），酶联免疫吸附试验（ELISA）检测，用ANTHOS酶标仪测定OD值；每一批次实验的阴性对照、阳性对照都必须满足试剂盒要求，结果判断严格按照试剂盒说明进行。

HBV-DNA采用中山大学达安基因股份有限公司试剂盒 （批号 2009004）、Roche公司Lightcycler荧光定量PCR仪用实时荧光PCR方法检测。每批测试均设阴性对照和弱阳性、阳性质控且质控结果合格（在±2SD之间），由试剂盒提供的 4 个浓度的标准工作品（1×104、1×105、1×106、1×107IU/ml） 计算出各标本的浓度值，＜1×103IU/ml为阴性参考范围，≥1×103IU/ml为阳性，每批测试的线性相关系数均在 0.99≤｜r｜≤1。

表1 150例HBV-DNA阳性样本中pre-S1 Ag和ALT的检测结果

表3 116例pre-S1 Ag阳性的样本中ALT和HBV-DNA的检测结果

2 结果

150例HBsAg阳性的样本HBV-DNA均为阳性（≥103IU/ml），其中前S1抗原和ALT的检测结果见表1。前S1抗原和ALT不同检测结果下乙肝病毒的复制情况见表2。116例前S1抗原阳性的样本中ALT和HBV-DNA的检测结果见表3。

3 讨论

临床对慢性乙肝患者经常根据其转氨酶的变化和乙肝核酸定量来判断其疗效及预后，因为ALT可反映肝细胞的损伤，核酸定量可直接反映病毒的复制情况。但ALT的升高不单纯出现在由于病毒侵害造成的肝细胞受损的情况，其很容易受到诸多因素的影响，必须结合其它指标来判断病毒的复制及患者的疗效；基于PCR方法进行的核酸定量一般都费用较高，用时也较长，对实验室的环境和设备要求较高，对于一些基层检验科室不太适合开展。血清前S1抗原测定方法简单、快速、成本较低，通常是加上“乙肝五项”组合为“乙肝六项”，使临床检测更为方便。

表1示，150例HBV-DNA阳性（≥103IU/ml）的患者中，前S1抗原阳性的有116例，两者有77.3%的符合率；表现为ALT增高且前S1抗原阳性的有65例，占43.3%，这些患者的病毒复制程度很高，其中92.3%的乙肝病毒载量＞104IU/ml（表2）。值得注意的是，在前S1抗原阳性的116例患者中51例（44%）并不表现为ALT的升高，但其中病毒高水平复制 （＞104IU/ml）者有 35例，占68.6%（表3）。说明有相当数量的HBsAg阳性的患者虽然其肝细胞受损尚不严重，ALT还表现为正常，但其体内乙肝病毒的复制仍存在，甚至是高载量的复制。提醒临床医生在患者ALT正常的情况下虽然可以不考虑干预治疗，但其体内的高病毒复制要引起足够重视。

表2 pre-S1 Ag和ALT不同检测结果下乙肝病毒的复制情况

有学者报道[6]在用核苷类似物干预后的慢性乙肝患者中，其前S1抗原与HBV-DNA呈现出不一致的变化，本研究未对患者样本进行详细的病种及病程分组，相关的研究还有待进一步进行，但从本实验结果中也看到在150例HBV-DNA阳性的患者中有34例（22.7%）是前S1抗原阴性的患者，所以若单独从前S1抗原的结果判定病毒复制情况的话，显然会有将近1/4的患者漏诊；不过我们发现这部分患者中有15例（44.1%）表现出ALT 的升高（表 1），且高病毒复制（＞104IU/ml）的患者占66.7%（表2），分析可能是由于肝细胞早期损伤时ALT出现变化较早，前S1抗原的反应出现较晚，或是前S1抗原检测方法的灵敏度所限造成，所以有必要同时进行ALT的检测，同时检测血清前S1抗原和ALT水平能帮助我们更好地分析患者体内病毒的复制情况。

HBV的 e抗原（HBeAg）与病毒 Dane颗粒、HBV-DNA具有伴随关系。但是，当HBV的前核心区发生突变时，HBeAg无法表达，表现为血清HBeAg或抗HBe测定阴性，而前 S1抗原作为病毒复制指标，能弥补HBeAg变异造成的误诊，是较 HBeAg 更为敏感的病毒复制指标[3，7，8]。 本研究结果前S1抗原与HBV-DNA的阳性符合率为77.3%，这与文献报道基本一致[8～10]，且其阳性者病毒复制程度大都较高，表明前S1抗原可以作为乙肝病毒感染和复制的一个很好的辅助指标；而且其检测方法相对简单、快速、经济，比HBV-DNA更易在临床尤其是在不具备定量PCR实验室的医院进行推广，再结合血清ALT的检测可在很大程度上为临床提供患者体内病毒复制的基本情况，帮助判断患者疗效及预后，亦为长期治疗的慢性乙肝患者节约了医药费，应得到临床的足够重视与应用。

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Clinical value of detection of pre-S1 antigen and alanine aminotransferase in patients with hepatitis Bvirus and the virus replication

JIA Li，BU Xiao-xia，LI Jian-hua，et al//Journal of China-Japan Friendship Hospital，2010 Feb，24（1）：15-17

Objective：To investigate the clinical significance of pre-S1 antigen （pre-S1 Ag）of hepatitis B virus（HBV）and alanine aminotransferase （ALT）detection on the diagnosis of virus replication.Methods：Pre-S1 Ag，HBV-DNA and ALT of 150 serum samples，which HBsAg were positive，were detected by ELISA，real-time fluorescence polymerase chain reaction assay and auto-biochemical analysis respectively.Results：One hundred and sixteen samples were pre-S1 Ag positive in all samples and were HBV-DNA positive（≥103IU/ml），the coincident rate of pre-S1 Ag and HBV-DNA was 77.3%.Among the 116 pre-S1 Ag positive samples，95 of them （81.9%）had the higher level of HBV virus replication （HBV-DNA＞104IU/ml）.Fifty one samples had the common level of serum ALT，among them 35 samples were HBV-DNA＞104IU/ml.Conclusion：Pre-S1 Ag is a good indicator of HBV virus replication and the results which combined with serum ALT will guide the following up of chronic hepatitis B patients who need retest virus replication in a long time.

hepatitis B virus；pre-S1 antigen；virus replication；hepatitis B virus-deoxyribonucleic acid

R512.6+2；R446.61

A

1001-0025（2010）01-0015-03

10.3969/j.issn.1001-0025.2010.01.004

贾 莉（1969-），女，主管技师。

2009-12-14

2010-01-06