急性脑梗死患者血清基质金属蛋白酶-9变化及醒脑静注射液的干预作用

张兰起,雷惠新,赵德英

在基质金属蛋白酶中,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)通过降解细胞外基质使血脑脊液屏障(BBB)受损,引起血管源性脑水肿。醒脑静注射液具有醒神开窍、熄风止痉、化痰活血、清热解毒等功效。本研究应用醒脑静注射液进行随机临床对比,观察其对MM P-9的影响,探讨其治疗急性脑梗死(ACI)的可能作用机制。

1 资料与方法

1.1 研究对象 急性脑梗死病例来源于2007年1月—12月福建省立医院神经内科住院治疗患者,共选取46例。随机分为两组,常规组(A 组)23例,男14例,女9例,年龄42岁～77岁。治疗组(B组)23例(醒脑静注射液+常规治疗),男 14例,女9例,年龄52岁～80岁。两组临床资料具有可比性。

1.2 方法 常规组根据病情选用甘露醇、甘油果糖降颅压,适当控制血压,抗血小板聚集,抗凝,降纤,调节水电解质平衡及预防感染等治疗。治疗组在常规治疗基础上加用醒脑静注射液(江苏无锡山禾药业股份有限公司生产)20 mL加入250 mL生理盐水中静脉输注,每日 1次,共14 d。两组又根据脑梗死面积大小分为大面积、中面积及小面积亚组进行对比研究(入院后3 d～5 d CT检查:直径＞4.0 cm为大面积;直径1.5 cm～4.0 cm为中面积;直径＜1.5 cm为小面积)。

1.3 血液标本 所有患者均于入院后次日、3日、8日、14日清晨07:00前空腹抽取肘静脉血2 mL,30 min内用高速离心机离心5 min,将血清置于-50℃冰箱保存。

1.4 检测指标 MM P-9采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)检测,在芬兰雷博公司产M K3-SLS010型自动酶标仪上进行。试剂盒均由 Rapid Biolab California.USA公司提供。

2 结 果

2.1 ACI患者血清MMP-9浓度变化(见表1)两组第1天与第3天MM P-9浓度均无统计学意义(P＞0.05),第1天与第8天、第14天均有统计学意义(P＜0.01),第14天治疗组降至正常水平,常规组还稍高于正常。

表1 ACI患者血清MMP-9浓度变化(±s)ng/mL

表1 ACI患者血清MMP-9浓度变化(±s)ng/mL

组别 n 第1天 第3天 第8天 第14天A 组 23 412.86±73.35 376.74±60.29 272.67±71.221) 121.71±18.581)B组 23 419.88±97.13 386.83±81.56 282.62±92.801) 80.03±16.601)与第1天比较,1)P＜0.01

2.2 不同梗死面积的ACI患者血清MMP-9浓度比较(见表2)大面积组血清M MP-9浓度明显高于中面积亚组(P＜0.05),中面积组血清MMP-9浓度明显高于小面积组(P＜0.05)。直线相关分析示:梗死面积大小与MMP-9浓度呈明显正相关(r=0.67,P＜0.01)。

表2 不同梗死面积 ACI患者血清MM P-9浓度比较(±s)

表2 不同梗死面积 ACI患者血清MM P-9浓度比较(±s)

组别 n M MP-9(ng/mL)大面积组 16 479.44±77.351)2)中面积组 12 409.88±76.641)小面积组 18 356.19±51.38与小面积组比较,1)P＜0.05;与中面积组比较,2)P＜0.05

2.3 不同梗死面积ACI患者血清MMP-9浓度变化(见表3)

两组大面积、中面积、小面积组血清M MP-9浓度治疗前后差值均有统计学意义,以大面积亚组差别最明显。

表3 ACI患者血清M MP-9浓度变化(±s)ng/mL

表3 ACI患者血清M MP-9浓度变化(±s)ng/mL

组别 n 治疗前 治疗后 差值A组 大面积 7 455.30±75.36 136.14±32.48 319.16±46.331)中面积 7 419.94±71.15 166.44±47.10 253.50±43.071)小面积 9 371.89±54.24 142.37±25.56 229.52±52.171)B组 大面积 9 498.69±71.32 91.54±13.80407.14±59.57中面积 5 395.80±90.19 65.80±24.19 330.00±70.77小面积 9 354.93±60.78 64.23±21.00 290.70±60.54与B组同面积亚组比较,1)P＜0.05

3 讨 论

MM P-9是与ACI关系最密切的基质金属蛋白酶,分子量92kD。当脑组织缺血时,MMP-9主要表达于缺血组织的血管内皮细胞和中性粒细胞。在脑内,毛细血管内皮细胞及其间的紧密连接是血脑屏障的主要部分,细胞外基质分子构成的基膜为它提供结构支持,因此,基膜在保持血脑屏障的完整性方面起重要作用。MMP-9作为一种炎症相关蛋白酶,通过降解细胞外基质使血脑屏障受损、通透性增加,引起血管源性脑水肿。

Rosenberg等[1]在动物试验中发现,急性脑梗死后3 h～4 h缺血区M MP-9表达开始增加,12 h明显增高,24 h～48 h达到高峰,并持续5 d,到缺血后第15天表达恢复基础水平;缺血脑组织的血管内皮细胞活性增高,表达高浓度M MP-9,后者使基膜受损,血脑屏障损伤,引起脑水肿。所以,在脑梗死急性期,预先应用M MP-9抑制剂可明显降低血管内皮细胞及中性粒细胞的MM P-9表达,减少血脑屏障的破坏和减轻脑水肿,减轻兴奋性氨基酸对神经损害,起到神经保护作用[2]。

本试验发现,A、B两组的MMP-9浓度从发病第1天开始即达到高峰,第8天明显下降,第14天时治疗组降至正常水平,常规组稍高于正常。两组均未出现2 d～6 d的高峰,整个过程呈缓慢下降曲线。这与Rosenberg等[1]的动物试验结果稍有差异,考虑与药物干预抑制MMP-9的表达,使其高峰时浓度下降所致。

本试验还发现,血清MMP-9浓度大面积组明显高于中面积组,中面积组明显高于小面积亚组。梗死面积大小与MMP-9浓度呈明显正相关,与 Montaner等[3]的研究相符合。提示 MMP-9水平可作为脑梗死面积大小的标志,并较准确地反映病情。

醒脑静注射液是在古方安宫牛黄丸的基础上改制而成的水溶性静脉注射液,该药主要由麝香、栀子、郁金、冰片等药组成。麝香气味芳香,性善走窜,具有较强的开窍通闭作用,为醒神回苏要药;冰片辛苦微寒,通诸窍而散郁火,常与麝香相伍用于醒神开窍;栀子泻三焦之火,清热凉血,利湿解毒;郁金辛苦性寒,活血化瘀止痛,行气解郁,凉血清心。四药合用,具有醒神开窍、熄风止痉、化痰活血、清热解毒等功效,与中风病急性期风、火、痰、瘀互结,阴阳失调,气血逆乱病机相吻合,可用于中风病急性期治疗[4]。

本研究发现治疗组大面积、中面积、小面积亚组治疗前后血清MMP-9浓度变化较常规组有统计学意义,但以大面积亚组差别最明显,故醒脑静注射液对大面积梗死组疗效更明显。

傅强等[5]进行的动物试验研究表明,醒脑静注射液能降低血脑屏障通透性,减轻脑水肿,清除氧自由基,防治神经细胞凋亡,减轻缺血再灌注损伤,对脑功能有重要的保护作用。本试验显示:醒脑静注射液能抑制MMP-9,减轻MM P-9对血管基膜及血脑屏障的损害,从而减轻脑缺血损伤、脑水肿及再灌注伤。减轻脑神经细胞凋亡,降低中风面积、缩短昏迷时间,发挥其脑保护剂的作用。

[1]Rosenberg GA,Navratil M,Barcone F.Proteolytic cascade enzymes in focal cerebral ischemia in rats[J].Cereb Blood Flinc Metab,1996,16:360-366.

[2]Gidday JM,Gasche YG,Copin JC,et al.Leukocy te-derived matrix metalloproteinase-9 mediates blood-brain barrier breakdown and is proinflammatory after transient focal cerebral ischemia[J].Am J Phy siology,2005,289(2):558-568.

[3]Montaner J,Alvarez SJ,M olina C,et al.Matrix metalloproteinase ex pression after human cardioembolic stroke:T emporal profile and relation to neurological impairment[J].Stroke,2001,32(8):1759-1766.

[4]王金良,顾卫,谭峰,等.醒脑静注射液对急性脑梗塞患者血清TNF-α与IL-6的影响[J].中华医药,2003,3(3):97-98.

[5]傅强,崔华雷,孙中吉,等.醒脑静注射液对脑缺血-再灌注诱导的脑神经细胞凋亡防治作用的试验研究[J].中国中西医结合急救,2000,3(7):144-146.