我院儿科下呼吸道感染分离的金黄色葡萄球菌耐药性分析

李 明，吴润转

（广东省东莞市太平人民医院检验科，广东东莞 523907）

金黄色葡萄球菌（SAU）是一种极其常见的病原菌，很容易引起小儿呼吸道感染。近年来随着金黄色葡萄球菌引起的感染逐步上升，特别是在社区及医院感染，成为了目前临床上的一个亟待解决的问题。我们知道SAU分布非常广泛，感染方式多样，其耐药性非常之高，是临床抗感染治疗的一个重点攻克对象，特别是其耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），多重耐药性非常严重，引发死亡率较高。为了了解SAU的耐药状况，从而最大限度地降低其耐药性发生，对我院2008年1月～2009年12月儿科呼吸道感染患儿标本3 152例中分离得到的金黄色葡萄球菌的耐药性进行分析，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 菌株

本文菌株来自我院2008年1月～2009年12月从儿科下呼吸道感染患儿标本3 152例中分离到的71株SAU，其中MRSA 4株，MSSA 67株。金黄色葡萄球菌ATCC 25923用作纸片扩散法药敏试验的质控菌株（购于杭州天和有限公司）。

1.2 药敏纸片

青霉素、苯唑西林、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素、红霉素、克林霉素、四环素、多西环素、莫西沙星、复方新诺明、万古霉素、利奈唑胺，奎奴普汀/达福普汀、β-内酰胺酶纸片均来源英国OXOID公司。

1.3 仪器与试剂

VITEK-32鉴定仪、比浊仪、GPI鉴定卡均来自法国生物梅里埃公司。血平板培养基购自广州迪景公司。

1.4 方法

菌株的分离与培养鉴定，将所取标本仔细划线接种于血平板上，在35℃下培养，时间约为24 h。严格按照《全国临床检验操作规程》3版进行[1]。对可疑菌落进行分纯，再通过革兰染色、触酶试验、血浆凝固酶试验等外部试验，对纯化后的菌落采用GPI鉴定卡在VITEK-32鉴定仪上进行菌株鉴定，操作步骤要严格遵循仪器操作说明。

1.5 药敏试验方法

采用纸片扩散法即K-B法进行药敏试验，操作过程中用标准菌株进行平行的测验，按照CLSI 2008 M100-S18[2]相关标准判断。将纯化后的待检验菌用0.85%盐水调至0.5个麦氏单位，均匀地涂布于M-H药敏平板上，在35℃下进行培养16～18 h，对头孢西丁耐药菌株判断为MRSA。

表1 MRSA与MSSA对常见抗菌药物耐药率比较分析（%）

1.6 统计学处理方法

MRSA同MSSA在耐药性上的比较分析，统计学处理方法采用χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

在71株金黄色葡萄球菌中检出MRSA 4株，MSSA 67株。MRSA与MSSA在对青霉素、苯唑西林、氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、妥布霉素、红霉素、克林霉素、四环素、多西环素、莫西沙星、复方新诺明总体上的耐药性差异有统计学意义（P＜0.05），见表 1。

克林霉素对治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染有非常好的疗效，但临床上出现了体外克林霉素敏感而导致治疗失败的病例发生，通过试验证实克林霉素具有诱导耐药性。在药敏试验中，取红霉素参照，质控菌株为ATCC BAA-976和ATCC BAA-977。同样采用纸片扩散法。此外再进行D试验，按CLSI 2008 M100-S18相关标准判断。结果发现，对于红霉素耐药而克林霉素敏感的葡萄球菌，克林霉素诱导耐药性发生率为11.3%（8/71）。

3 讨论

金黄色葡萄球菌可以引起化脓性感染，局部和全身感染，是一种常见的顽固病原菌，因其高耐药性而引起医学研究方面的重视。要早发现早治疗，通过药敏结果监控，力争优化选择抗菌药物提高治疗效果[3]。

由研究结果知，标本主要来自于儿科呼吸道感染患儿，共分离得到金黄葡萄球菌71株，其中MRSA 4株，MSSA 67株。未发现对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普汀/达福普汀耐药的菌株。本地区儿童下呼吸道感染分离的金黄色葡萄球菌以MSSA为主，对大部分抗菌药物保持较好的敏感性，MRSA分离率虽低，但MRSA较MSSA的耐药性高，而且多重耐药严重，但万古霉素例外，所以对耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VISA及VRSA)的连续监测、了解葡萄球菌属的耐药机制具有重要的临床意义，以最大限度降低其耐药性发生[4]。

本研究同时对克林霉素的诱导耐药性进行了简述，克林霉素的诱导耐药性多发生在MSSA中，因此在MSSA的药敏试验中，对红霉素耐药，而克林霉素中介或敏感的菌株，必须通过D试验，从而排除克林霉素诱导型耐药引起的临床治疗失败[5]。而在MRSA中，由于不能完全排除克林霉素诱导耐药的存在，对红霉素耐药而克林霉素中介或敏感菌株，可以根据临床需要，做克林霉素D试验。

总之，针对MRSA的检测必须高度重视，这对控制MRSA的传播，提高临床上抗菌药物的运用都有着非常重要的意义。了解临床分离的金黄色葡萄球菌对常用抗生素的耐药趋势，以指导临床合理使用抗生素[6-7]。

[1]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M].2版.南京:东南大学出版社,1997:897-902.

[2]Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing [S].Eighteenth Informational Supplement,2009,29(3):M100-S18.

[3]邱嘉民,何志捷,肖秀红,等.重症监护病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的耐药性分析[J].广东医学,2006,44(1):92-94.

[4]纪文军,陈亚生,杨慧.获得性感染金黄色葡萄球菌耐药的现状及治疗对策[J].中国当代医药,2009,16(7):61-62.

[5]汤瑾,王坚镪,蒋燕群.71株葡萄球菌克林霉素诱导耐药[J].中国感染与化疗杂志,2006,6(2):110-112.

[6]郭健.儿童急性下呼吸道感染细菌病原学调查及药敏分析[J].中国现代医生，2008,46(25):113-114.

[7]朱晓鸿.儿童764株金黄色葡萄球菌的耐药性监测[J].中国现代医生,2008,46(23):10-11.