阿德福韦酯对慢性乙型肝炎患者Th1/Th2型细胞因子和肝纤维化指标的影响

郭 堑

(广西医科大学第四附属医院感染科,广西柳州,545005)

乙型肝炎病毒(HBV)感染有很高的慢性化趋势,而肝纤维化是慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段[1]。但是早期肝脏慢性损伤过程中细胞外基质积累所形成的肝纤维化是可以逆转的,而肝硬化时难以逆转[2]。所以筛选有效的药物阻断或减轻肝纤维化的发生,一直是慢性肝病研究的重要课题。免疫系统在乙型肝炎的发病和病程中起到关键的作用,免疫应答失衡是慢性乙型肝炎的重要发病机制之一。Th1/Th2的平衡在HBV感染人体后病情发展中起决定作用。而白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)是维持Th1/Th2细胞比例的关键分子。因此研究HBV感染时 Th1/Th2状态对认识乙型肝炎发病、发展、预后和观察治疗效果均有积极意义。本研究采用放射免疫法(RIA)检测患者外周血中肝纤维化指标:血清玻璃酸酶(Hyaluronic acid,HA)、Ⅳ型胶原(TypeⅣcollagen,ⅣC)、Ⅲ型前胶原肽(Type Ⅲ procollagen,PCIII)、层 粘连 蛋白(Laminin,LN)的水平;采用双抗体夹心酶免疫吸附试验(DAS.ELISA)测定,观察阿德福韦酯治疗30例慢性乙型肝炎患者对外周血清Th1/Th2型细胞因子的影响。进一步探讨 Th1/Th2型细胞因子水平对肝纤维化指标的影响及其相关性,总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2006年6月～2008年9月收治的慢性乙型肝炎患者60例,其中,男38例,女22例;年龄24～66岁,平均32.3岁。所有患者均符合2000年全国病毒性肝炎会议修订的慢性乙型肝炎诊断标准[3]。入选标准:HBSAg,HBeAg及抗HBc均阳性;HBV-DNA≥105 copica/ml;肾功能正常;排除合并甲型、丙型或戊型肝炎病毒感染;排除合并HIV感染及PTA≤20%,TBIL≥50 μ mol/L的患者。将60例患者随机分为治疗组和对照组,各30例。两组患者在年龄、性别、病程、肝功能及病毒指标方面差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 治疗方法:治疗组给予阿德福韦酯(天津药物研究院药业有限公司)10 mg/次/d,连续48周;对照组采用常规治疗方法(甘草酸二铵、降酶灵等)。治疗组与对照组均给予扶正化瘀胶囊(3粒/次/d,连续48周)抗纤维化治疗。

1.2.2 观察指标:所有患者治疗前常规检查血、尿、大便常规,B型超声检查。用ELISA法检查肝功能,乙肝血清学指标,PCR法查HBV-DNA。治疗组共30例,患者应用阿德福韦酯治疗48周后与对照组患者30例比较,分别用放射免疫法(RIA)检测肝纤维化指标:血清玻璃酸酶(Hyaluronic acid,HA)、Ⅳ型胶原(TypeⅣ collagen,ⅣC)、Ⅲ型前胶原肽(TypeⅢ procollagen,PCIII)、层粘连蛋白(Laminin,LN);采用 DAS ELISA法检测患者血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平。具体操作严格按照说明书进行。治疗后每2周复查1次肝功能,治疗前后复查1次B超及肝纤维化指标,每12周查HBV-DNA定量1次。

1.2.3 统计学方法:采用SPSS 11.0统计软件进行统计分析,计量资料比较采用t检验,计数资料比较用χ2检验。

2 结 果

2.1 治疗前、后肝纤维化指标检测

由表1、表2可知,治疗组与对照组治疗前各项血清肝纤维化指标差异无统计学意义(P>0.05),治疗后各项血清肝纤维化指标差异有统计学意义(P<0.01)。

表1 治疗前2组血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC测定结果( ±s)

表1 治疗前2组血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC测定结果( ±s)

组别 例数 HA(ng/mL)LN(μ g/L)PCⅢ(μ g/L)ⅣC(μ g/L)治疗组 30 268.3±101.4 162.8±67.2 171.3±78.2 139.1±58.2对照组 30 266.5±110.5 159.2±65.1 172.6±77.5 137.6±56.5

表2 治疗后2组血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC测定结果( ±s)

表2 治疗后2组血清HA、LN、PCⅢ、ⅣC测定结果( ±s)

＊＊PP<0.01

组别 例数 HA(ng/mL)LN(μ g/L)PCⅢ(μ g/L)ⅣC(μ g/L)治疗组 30 98.4±33.4 87.5±38.6 97.1±34.9 84.1±31.6对照组 30 226.2±74.3＊＊ 137.2±49.4＊＊ 151.6±40.7＊＊ 123.5±46.4＊＊

2.2 治疗前、后血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平检测

由表3可知,治疗组与对照组治疗前血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗后IFN-γ、IL-4水平差异有统计学意义(P<0.01)。

表3 2组治疗前后血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平( ±s)

表3 2组治疗前后血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平( ±s)

治疗后两组比较,＊＊P<0.01

组别 例数 IFN-γ(pg/mL)IL-4(pg/mL)治疗组 30 治疗前 166.2±19.4 56.5±12.6治疗后 247.3±23.2 37.7±11.9对照组 30 治疗前 160.3±21.1 58.9±13.4治疗后 170.8±17.4＊＊ 53.2±12.5＊＊

3 讨 论

肝纤维化是慢性肝炎发展为肝硬化的主要病理基础。肝组织活检仍是目前主要诊断手段,但难以重复,且有一定的局限性。国内外不少研究已证明,在慢性肝病患者血清中检测HA、PCIII、ⅣC、LN能可靠地反应肝纤维化的程度和活动度,是目前观察抗纤维化药物较为公认的血清学指标。由于这4项指标的机制不同,故联合检测观察对肝纤维化诊断具有较大意义。一般认为,HBV感染人体后引起的肝脏和其它脏器病变,以及疾病的发生发展,并非病毒本身所致,而与人体的免疫状态有关。乙型肝炎病毒感染人体后,Th1/Th2比例是否平衡是机体能否有效清除病毒和病毒感染细胞的主要因素。在乙肝病毒感染的过程中如果Th1细胞亚群占优势,将促进细胞免疫反应,有利于清除细胞内病毒,同时加重肝细胞的损伤;如果Th2细胞亚群占优势,将促进体液免疫反应,抑制细胞免疫,肝细胞损伤减轻,感染慢性化[4]。慢性乙型肝炎患者体内存在Th1/Th2细胞因子失衡可能是导致其慢性化的原因之一[5]。

本研究通过检测治疗前后 2组血清HA、PCIII、IVC及LN的水平变化可以看出,治疗前2组血清肝纤维化指标差异无统计学意义(P>0.05)。经过48周阿德福韦酯治疗后,治疗组血清HA、PCIII、IVC及 LN指标与对照组治疗后比较,差异有统计学意义(P<0.01)。说明阿德福韦酯具有抗纤维化的作用。在本研究中,慢性乙型肝炎患者血清中Th1型细胞因子IFN-γ水平普遍较低,提示患者细胞免疫功能低下,不能有效清除体内的HBV,使HBV持续感染形成慢性化。通过检测2组治疗前后血清中IFN-γ、IL-4水平变化可以看出,治疗组与对照组治疗前血清中细胞因子IFN-γ、IL-4水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗后IFN-γ、IL-4水平差异有统计学意义(P<0.01)。

IFN-γ、IL-4等细胞因子水平在阿德福韦酯疗程中的变化及其与肝纤维化的关系提示他们可以作为阿德福韦酯治疗疗效预测指标和疗效评价指标,从而了解机体抗HBV免疫功能恢复情况,在免疫学指标方面对阿德福韦酯疗效做出预测并评价治疗效果。这将有利于加深对慢性乙型肝炎的认识,对临床治疗有一定的指导作用。

[1]王健,江水清,项水清,等.慢性乙肝患者HBVX-DNA表达与M11-2R相关性[J].中国公共卫生,2006,22(10):118.

[2]李素珍,尚佳,邓予晖.肝硬化及血小板活化指标检测分析[J].中国公共卫生,2006,22(8):949.

[3]中华医学会病毒性肝炎防治组.慢性乙型肝炎防治指南[J].中华传染病杂志,2005,23(1):425.

[4]Minoru Ayada,Tetsuya Ishikawa,Akihiko Okumura,et al.Alteration of serum cytokine balances among different phases of chronic hepatitis B virus infection[J].Hepatology Research,2006,34(4):214.

[5]Yong Xie,Hong-Xiang Sun,Duo Li.Platycodin D is a potent adjuvant of specific cellular and humoral immune responses against recombinant hepatitis B antigen[J].Vaccine,2009,27(5):757.