黏附分子和血管内皮生长因子在卵巢上皮性肿瘤中的表达及临床意义

苏 悦,韩素萍

(南京医科大学第一临床医学院妇产科,江苏南京,210009)

卵巢恶性肿瘤死亡率目前居妇科生殖道恶性肿瘤死亡率的首位[1],其原因除难以早期诊断及易产生耐药性外,对其发生发展的过程尚缺乏了解,且目前仍无完善的卵巢癌早期诊断方法[2]。近来研究发现,黏附分子(MUC)是由多种分泌上皮细胞分泌的高分子量、高度糖基化蛋白,当发生癌变时,其表达的量和质将出现异常。由于卵巢上皮性癌来源于卵巢表面的生发上皮,黏附分子在卵巢癌的诊断方面将可能是一有意义的分子标志物[3]。血管内皮生长因子(VEGF)是已知最强的促血管生成因子,在肿瘤组织中,VEGF的表达直接影响着肿瘤血管的生长和原发瘤的生长和浸润[4]。本研究将采用免疫组化的方法,联合观察MUC4和VEGF在卵巢癌组织的表达,并探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

收集筛选江苏省扬州大学临床医学院病理科和扬州大学病理教研室2005年1月～2009年12月存档的卵巢肿瘤蜡块共90例,其中,卵巢良性上皮性肿瘤20例,卵巢交界性上皮性肿瘤10例,卵巢恶性上皮性肿瘤60例。患者平均年龄55岁(33～71岁)。所有患者手术均为确诊后的第1次手术,术前均未进行任何放、化疗处理。对60例卵巢恶性上皮性肿瘤进行分类:病理分化程度:Ⅰ级18例,Ⅱ、Ⅲ级42例;手术病理分期按国际妇产科联盟(FIGO)标准(1986年):早期(Ⅰ、Ⅱ期)22例,晚期(Ⅲ、Ⅳ期)38例;CA125正常24例,升高36例。

1.2 检测方法

上述标本均为10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,鼠抗人MUC4单克隆抗体IgG1,购自美国Zymend公司,浓缩型,工作浓度 1∶100;兔抗人VEGF单克隆抗体选自北京中杉生物公司,浓缩型,工作浓度 1∶100。

1.3 结果判定

免疫组化染色阳性表达为境界清晰,突出于背景的棕黄色或棕褐色颗粒,细胞质、胞膜或胞核内有棕黄色颗粒则者为阳性细胞。MUC4阳性信号主要定位于胞质或胞膜,VEGF阳性信号主要定位于胞浆、胞膜。每张切片随机选5个200倍视野观察,阳性细胞百分率>10%为阳性表达,阳性细胞<10%为阴性表达[5]。

2 结 果

在20例良性肿瘤组织中,MUC4的表达均为阴性,在交界性卵巢肿瘤标本中表达率为50%(5/10),恶性卵巢组织中表达率为81.7%(49/60),2者相比差异有显著性(P<0.05);VEGF在良性卵巢组织中表达为10%(2/20),在交界性卵巢肿瘤标本中表达率为20%(2/10),恶性卵巢组织中表达率为60%(36/60),良性卵巢组织与恶性卵巢组织中的表达相比差异有显著性(P<0.01);在交界性卵巢肿瘤与卵巢癌中表达差异有显著性(P<0.05)。

在60例上皮性卵巢癌中,根据组织分化程度的不同,分为高分化组和中低分化组,经统计学分析,MUC4与VEGF的表达在高分化组和中低分化组中差异有显著性(P<0.01)。

将卵巢癌根据临床分期的不同,分为早期(Ⅰ、Ⅱ期)和晚期(Ⅲ、Ⅳ期),经统计学分析,VEGF在早期和晚期卵巢癌中表达差异有显著性(P<0.05);而MUC4在早期与晚期卵巢癌组织中的表达差异无显著性(P>0.05)。

在22例早期卵巢癌标本中,MUC4的表达高于VEGF,差异有显著性(P<0.01)。

在60例上皮性卵巢癌病例,在CA125正常组与CA125升高组中,VEGF的表达差异有显著性(P<0.05),MUC4表达差异无显著性(P>0.05)。见表1,图1-4。

表1 MUC4、VEGF在上皮性卵巢癌中的表达

图1 MUC4在卵巢浆液性囊腺癌中阳性表达SP法,200倍

图2 MUC4在卵巢粘液性囊腺癌中阳性表达SP法,200倍

图3 VEGF在卵巢浆液性囊腺癌中阳性表达SP法,200倍

图4 VEGF在卵巢粘液性囊腺癌中阳性表达SP法,200倍

3 讨 论

卵巢癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤,寻找敏感性高,特异性强的肿瘤指标,提高卵巢癌的早期诊断率,同时寻找与肿瘤患者预后密切相关的指标是目前急需要解决的问题。

黏附分子(MUC)是由多种分泌上皮细胞分泌的高分子量、高度糖基化蛋白,目前已发现13种[6],可分为3个类型:分泌型包括胶体蛋白MUC2、MUC5AC 、MUC5B 、MUC6 和非胶体蛋白MUC7;膜结合型 MUC1、MUC3、MUC4[7]、MUC12;未分类 MUC13[8]、MUC16。在正常情况下能促进上皮细胞的更新和分化,对上皮组织有润滑和保护作用,但一旦瘤变或者癌变,其表达的量和质将出现异常。国外研究发现,上皮细胞的恶性转变过程多伴有MUC异常糖基化,MUC在肿瘤的发生、发展及生物学特性中具有重要作用[9-10],而国内对MUC4与卵巢癌相关性方面的研究较少。本研究发现,MUC4在正常卵巢组织均无阳性表达,在卵巢癌与卵巢交界性瘤中阳性表达率差异显著,MUC4的表达与临床分期以及CA125值无关,中低分化卵巢癌患者阳性表达率明显高于高分化者,在早期、晚期卵巢癌MUC4表达无明显差异,可见MUC4黏蛋白的过度表达与卵巢癌的发生、发展密切相关,尤其在早期卵巢癌可能成为优于CA125早期诊断指标[11]。

肿瘤的生成、浸润、转移与血管的生成密切相关。VEGF是最为关键的血管形成促进分子之一,在多种肿瘤组织均过度表达,且其表达水平与患者的预后相关[12]。其表达强度直接影响着肿瘤血管的生长和原发瘤的生长与浸润,能够强烈刺激血管内皮增生,诱导血管生成,并可增加血管通透性。本研究中,VEGF在卵巢恶性肿瘤中的表达显著高于良性肿瘤,在中低分化组织中的表达显著高于高分化组,且VEGF过表达与卵巢癌临床分期有关[13],说明VEGF的表达量与肿瘤的良恶性有关,肿瘤恶性程度越高,其产生促血管生成因子的能力越强。VEGF对判断卵巢癌的恶性程度及预后有参考意义,可作为评判卵巢癌患者预后的重要参考指标[14],对于CA125正常的卵巢癌患者,VEGF可能成为随访的优良候选指标之一。

本研究表明,MUC4在卵巢癌组织中的表达与VEGF有一致性,但在早期卵巢癌中的表达差异有显著性,且MUC4的高表达与CA125值以及肿瘤的分期无关,在CA125正常组以及卵巢癌早期和晚期组均有强表达,提示其可作为卵巢上皮性肿瘤早期诊断的优秀标志物。而VEGF的异常表达与患者的肿瘤分期和转移关系密切,提示VEGF能更好的用于预后的判断,二者有各自不同的敏感区域。总之,随着研究不断深入,MUC4及VEGF两种肿瘤标志物在肿瘤的诊断及预后判断方面将拥有广阔的前景。

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