三种不规则抗体筛选方法对比分析

范少英 杨君青

红细胞ABO血型以外的不规则抗体是引起输血不良反应、新生儿溶血病、血型鉴定困难及疑难配型等的主要原因［1］。交叉配血不合时，对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者必须按《全国临床检验操作规程》有关规定作抗体筛选试验［2］。本文采用微柱凝胶法、凝聚胺法和LIM抗人球法对献血者血清进行不规则抗体检测。

1 材料与方法

1．1 试剂 各种血型抗原抗血清均由Immucor Gamma公司提供。抗IgG，C3d由上海血液生物医药有限责任公司提供。抗体筛查细胞由上海血液生物医药有限责任公司提供，由3个细胞组成，包括 Rh，Kidd，MNSs，Duffy，Diego，Kell，Lewis，P 等 8 个血型系统的19个抗原互补;抗体鉴定细胞由上海血液生物医药有限责任公司提供。凝胶卡由达亚美公司提供。聚凝胺试剂盒由台湾贝索公司提供。

1．2 仪器 KA-2200小型台式离心机(日本久保田公司)，瑞士达亚美卡式血型配血系统。

1．3 方法

1．3．1 使用商品的筛选细胞分别采用微柱凝胶法、凝聚胺法、LIM抗人球法对倍比稀释后的各种抗血清进行检测，比较三种实验方法对不同血型系统抗体的敏感性。见表1。

1．3．2 对用微柱凝胶法筛查存在不规则抗体的献血者血清用凝聚胺法和LIM抗人球法进行确认，比较三种实验方法用于抗体筛查的适用性。

2 结果 见表1。

表1 3种实验方法测定不同血型系统抗体效价比较

表2 3种实验方法测定献血者不规则抗体的效价比较

3 讨论

不规则抗体指不符合ABO血型系统规则的血型抗体，分为IgM抗体和IgG抗体。IgM分子量较大在盐水介质中能直接连接相应的红细胞，使之发生肉眼可见的凝集，IgG在盐水介质中不凝集而只能致敏带有相应抗原的红细胞，必须通过其他介质如酶法、低离子强度溶液法、抗人球蛋白法、聚凝胺法、凝胶法等血清学技术才能检出［3］。

抗体筛选技术要求是尽量不漏检有临床意义的抗体，尽快完成抗体检测。临床常用的不规则抗体筛查技术中抗人球蛋白法被认为是理论上最明确、最准确的方法，但正是由于其繁琐的操作，又不能同时对多份标本检测，因此不适用于大批量筛查，只能将该实验方法用在对少数标本的确定中。在抗人球法的基础上加上LIM使试验方法更加敏感。微柱凝胶法简单、方便、敏感性高，结果易判断又能较长时间保存，标本用量少，又能同时检测多份标本［4］。微柱凝胶法可适用于常规的抗体筛查，但该方法相对于其他两种方法成本较高。凝聚胺法灵敏度高、价廉、快速，且操作简单方便，但是反应温度为室温，因此无法排除室温以下反应的无临床意义的冷抗体的干扰。

实验结果可以看出微柱凝胶法灵敏度略优于LIM抗人球法，凝聚胺法对有些血型系统灵敏度又高于其他两种方法，对于Lewis血型系统凝聚胺法灵敏度明显低于其他两种方法。但是临床上极少见到因Lewis抗体所致的溶血性输血反应，原因是a．Lewis抗原只是吸附在红细胞上，且可以放散。b．供(受)者血浆中的可溶性Lewis抗原可中和受(供)者的循环抗体。除此以外，在生理的温度下，大多数Lewis抗体不会广泛地起反应［5］。

综上所述，笔者认为应该根据实验室的具体条件选择适当的抗体筛选实验方法。对于基层实验室用凝取胜胺法进行常规筛检，遇到阳性标本再用微柱凝胶法或LIM抗人球法复检不失为一个较好的选择。

值得注意的是，在抗体筛查试验阳性应进一步明确抗体的反应特性比如反应温度范围、是否激活补体等，判断该抗体是否具有临床意义。如果条件允许最好能鉴定抗体类型，区分是自身抗体、类抗体还是同种抗体，了解抗体的来源，为交叉配血提供详细的资料。

1 Moise KJ．Red blood cell alloimmunization in pregnancy．JSemin Hematol，2005，42:169-178．

2 中华人民共和国卫生部．临床输血技术规范．2000．106．

3 雷再芬．1501例预输血者血清抗体筛选的临术意义．中国基层医药，2010，17:639-640．

4 李勇主编．实用血液免疫学血型理论与实验技术．北京:科学技术出版社，2006．595．

5 刘达庄主编．免疫血液学．第1版．上海:上海科学技术出版社，2002．77．