宫颈锥切组织制片方法的改进
2010-02-12王宏艳周秀玉王玉国崔元日
王宏艳 周秀玉 王玉国 崔元日
1 黑龙江省大庆油田总医院病理科(163000)
2 黑龙江省大庆油田总医院神经内科(163000)
在外检标本中,宫颈锥切组织比较多见,所以在实际工作中,做好宫颈锥切组织制片具有重要意义。通常情况下,宫颈锥切组织主要成分为肌肉组织和结缔组织,制作切片时比较难切,主要原因一是硬、脆,二是切片易厚、易碎,三是容易脱片[1-3]。每天科室可收到20~30例宫颈锥切组织,如果制片不佳,就会拖延正常工作进行,而且无形中会加大科室工作量。我们通过多年的实践总结,对宫颈锥切组织的制片进行了改进,取得良好效果。
现总结改进方法如下。
1 取 材
组织块不宜过大,大约0.8cm×0.5cm×0.2cm。如果组织过大会导致标本在正常处理时间内处理效果差。
2 固 定
收到标本后,为了防止宫颈锥切组织固定不充分,而影响切片质量,导致延误诊断。尤其是在北方寒冷季节里,12月至2月更容易出现。为了克服这一现象,我们首先从增强固定效果来解决这一问题。常规标本选用在常温下10%福尔马林固定3h即可,而宫颈锥切标本的固定就需要4h左右,现在我们选用20%福尔马林固定液,并置于60℃环境中作为增强固定,只需要2h左右即可[4]。
3 脱 水
由于用乙醇脱水时需要时间长,往往会造成组织变硬变脆,所以为了防止宫颈锥切组织过硬过脆,不应采用乙醇脱水。我们的改进方法是直接用丙酮脱水,因为丙酮比乙醇浸透组织速度快,脱水时间短,所以组织不宜变硬。具体操作中,要视组织大小,来确定脱水时间,一般来说,脱水时间不易过长,2~3h即可。
4 透 明
二甲苯虽然是组织的良好透明剂,但它容易使组织收缩、变脆,使含有肌肉纤维多的组织变得坚硬难切,使含有胶质丰富的组织发脆,影响切片。具体操作中,我们在常规透明程序中将二甲苯改为松节油,因为松节油对组织作用比较柔和,应用时间要相对长一些。改善以往病理常规制片,达到良好效果[5]。
5 浸 蜡
浸蜡宜用58~60℃熔点石蜡,时间3h,每1h更换一次石蜡,石蜡的熔点不得超过60℃,如果熔点过高,会导致宫颈锥切组织变硬,而中心浸蜡不佳,浸好蜡的组织应该立即包埋于60℃的石蜡中。
6 切 片
切片时要注意以下几点:①蜡块不要冻得过硬,否则组织硬脆,切片时易破碎。②修蜡块时一般用8~10μm,不能修的太厚,易使组织从蜡块上脱落,很难得到完整切片。③切片要用一次性锋利的刀片,切片厚为3μm,不易过厚,否则染色时易脱片或染色过深,连续切片时可向蜡块组织轻轻哈气,以使组织软化,这样切出的宫颈锥切组织连续完整,不易破碎且平展。④烤片温度应于70℃左右,不易过高,时间为1h[6]。
多年实践证明,要制作高质量的宫颈锥切组织切片,对病理技术人员的要求是首先要热爱病理技术工作,有敬业精神,要有高度的责任心,其次是要注意操作的每个细节,执行规范化操作程序,认真摸索,总结经验,就一定能获得一张精良的宫颈锥切组织HE切片。
[1]龚志锦,詹熔洲.病理组织制片和染色技术[M].上海:科学技术出版社,1994:3-24.
[2]倪灿荣.免疫组织化学实验新技术及应用[M].北京:北京科学出版社,1993:165-166.
[3]张哲,陈辉.实用病理组织染色技术[M].沈阳:辽宁科学技术出版社,1988:175.
[4]程国平,徐建业,胡锦林等.超声及微波辐射技术在制备穿刺活检组织切片中的应用[J].诊断病理学杂志,2007,14(6):475.
[5]印志琪,王政禄,张学义等.一种改良的肝穿刺活检标本快速制片方法[J].诊断病理学杂志,2007,14(1):80.
[6]蔡文琴,王伯云.实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术[M].成都:四川科学技术出版社,1994:524.