不同厂家香丹注射液中丹参素钠和原儿茶醛含量的比较

尹 萌，孟月兰，闻琍毓，徐 力(江苏省扬州药品检验所，扬州 225009)

香丹注射液为临床常用的中药制剂，由丹参水提取液和降香经水蒸气蒸馏后的饱和溶液制备而成，具有扩张血管、增进冠状动脉血流量的功效。卫生部药品标准十七册质量标准中采用HPLC法测定丹参中原儿茶醛的含量，本文建立一种用HPLC法同时测定丹参中丹参素和原儿茶醛两种水溶性成分含量的方法，简便、准确、无干扰，可更好的控制香丹注射液的质量;同时采用该方法测定了共12个生产厂家16批样品中两成分的含量。结果表明，不同厂家的香丹注射液中，丹参素和原儿茶醛的含量差异很大，质量标准急待提高以进一步控制产品质量，保证人民用药安全。

1 仪器与试药

Waters 2695 HPLC色谱仪，包括2996检测器、Empower色谱工作站;AG-135型电子分析天平(梅特勒-托利多上海有限公司);原儿茶醛对照品(批号:110855-200508)、丹参素钠对照品(批号:110810-200506)均由中国药品生物制品检定所提供;甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯;香丹注射液为本所抽检样品，测定时均在样品标注有效期内，见表1。

表1 样品情况一览表Tab 1 Data of samples

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Alltima C18(150 mm ×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇 -0.5%冰醋酸(90∶10);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:280 nm;柱温:25℃ ;进样量:10 μL。

2.2 对照品溶液的制备

分别精密称取置五氧化二磷干燥器中干燥12 h的丹参素钠对照品26.38 mg和原儿茶醛对照品12.10 mg，置同一50 mL量瓶中，加流动相适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密吸取该贮备液5 mL，置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 供试品溶液的制备

精密吸取样品2 mL，置50 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4 阴性对照溶液的制备

取降香药材按香丹注射液制备工艺制成不含丹参的阴性对照溶液，按“2.3”项下方法制得阴性对照溶液。

2.5 系统适用性试验

取阴性对照溶液、对照品溶液和供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定。结果，丹参素钠和原儿茶醛的保留时间分别为7.02 min和14.40 min，理论板数按丹参素钠峰计算，达到7 000以上，与其他杂质峰的分离度大于1.5，色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图Fig 1 HPLC

2.6 线性关系考察

精密吸取对照品贮备液 0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL，置10 mL量瓶中，分别用流动相稀释至刻度，摇匀，按“2.1”色谱条件分别吸取10 μL进样测定，以所得的峰面积(A)对进样量(C)进行线性回归，得回归方程:A丹参素钠=6 433.7C+18 540(r=0.999 5);A原儿茶醛=42 039C+52 708(r=0.999 6)。结果表明，丹参素钠、原儿茶醛进样量分别在0.26 ～1.58 μg和 0.121 ～0.726 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2.7 精密度试验

取对照品溶液10 μL，按“2.1”项下色谱条件连续进样6次。结果丹参素钠、原儿茶醛峰面积的 RSD分别为0.4%和0.3%，表明仪器精密度良好。

2.8 重现性试验

取同一批样品，按“2.2”项下方法制备样品溶液，共取6份，按“2.1”项下色谱条件测定。结果，丹参素钠、原儿茶醛峰面积的RSD分别为1.2%和0.9%，表明方法重现性良好。

2.9 加样回收率试验

取已知含量的同一批样品1 mL，置50 mL量瓶中，分别加入对照品适量，加流动相稀释至刻度，摇匀。按“2.1”项下色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表2。

表2 加样回收试验结果(n=6)Tab 2 Results of recovery test of samples(n=6)

2.10 样品含量测定

取供试品溶液和对照品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样10 μL，用外标法计算含量，结果见表3。

表3 样品含量测定结果Tab 3 Results of content determination of samples

3 讨论

实验时，选用的冰醋酸的浓度分别为0.2%、0.5%和1.0%，结果冰醋酸的浓度为0.5%时，峰形对称性好，且流动相甲醇-0.5%冰醋酸的比例为90∶10时，丹参素钠、原儿茶醛两峰与相邻杂质峰均能达到很好的分离效果。

丹参(salvia miltiorrhiza beg)为唇形科鼠尾草属植物的干燥根，具有祛痰止痛、活血通经、清心除烦之功效。近来对丹参化学成分的研究很多，一致认为丹参的化学成分主要分为两类，即水溶性成分和脂溶性成分。水溶性成分主要有原儿茶醛、丹参素、丹酚酸 A、丹酚酸 B等，脂溶性成分有丹参酮ⅡA、隐丹参酮等。而香丹注射液由降香经水蒸气蒸馏后与丹参水提取液制备而成。由此可以认为香丹注射液中丹参的主要成分为水溶性成分，所以选择丹参中两类最主要的水溶性成分丹参素和原儿茶醛，作为定量指标，从而达到控制质量的目的。

在测定样品时发现，大多数样品的色谱图基本一致，但有两批样品色谱图中在与原儿茶醛色谱峰相对保留时间约为0.43处，有一较大的色谱峰，而其他样品的色谱图在相应的位置上只有一很小的色谱峰。目前仍不能确定该色谱峰的来源，此项工作有待进一步研究。鉴于香丹注射液组成简单，只有两味药，建议可以在质量标准中增加以标准指纹图谱作为对照图谱的鉴别试验，保证药品质量。

共测定了12个厂家生产的16批样品中丹参素钠和原儿茶醛的含量，样品中两成分的含量差异很大。丹参药材由于产地、生长环境、采收时间、贮藏条件、炮制以及制备工艺的不同，对其中有效成分均会造成影响。因此建议厂家重视药材质量，改善制备工艺，提高产品质量，保证人民用药安全。

［1］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［S］.2005年版.北京:化学工业出版社，2005:52-53.

［2］ 国家药典委员会.药品标准中成药成方制剂(17册)［S］.1998:200.

［3］ 蔡 梅，季一兵，骆雪芳，等.高效液相色谱法测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量［J］.海峡药学，2004，16(3):54.

［4］ 徐 曼，刘爱华，崔亚君，等.不同厂家生产的香丹注射液中丹参色谱指纹图谱的比对研究［J］.中国天然药物，2007，5(2):120.