关于丹参素钠-PLGA缓释微球的制备及药剂学性能评价

吕婷婷

272000济宁市第一人民医院

丹参素钠其实就是丹参素钠盐，主要应用于心脑血管、炎症以及肿瘤疾病中。但是在实际应用的过程中，由于该种药物具有渗透性低、溶解性高的特点，无法将生物功能充分发挥，同时也不能长期使用目前的普通注射剂。因此，本文进一步探究了关于丹参素钠-PLGA缓释微球的制备及药剂学性能评价，详细过程如下。

资料与方法

使用的设备：恒温磁力搅拌器、分析天平、扫描电子显微镜、紫外可见分光光度计、激光粒度分析仪、全自动X射线衍射仪以及半自动冰冻切片机。

使用的材料：酯封端聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物75/25、甲氧基聚二乙醇-聚乳酸乙醇酸共聚物75/25、丹参素钠原料以及丹参素钠对照品[1]。

结 果

测量丹参素钠含量：①制备对照品溶液：将5 mg的对照品放在0.2 g/L的量瓶中，经稀释、摇匀制作成对照品溶液。②制备供试品溶液：用精密称对10 mg的丹参素钠-PLGA缓释微球进行称取，将其放于10 mL量瓶中，与0.5 mL的甲烷混合，通过稀释、静置，让二氯甲烷充分发挥，使高分子材料完全析出，过滤后，将滤液取出。③波长选择检测：对0.04 g/L丹参素钠进行适量的选取，用水做空白溶剂，用200～500 nm扫描。结果显示，丹参素钠最大吸收在280 nm，未受空白溶剂的影响，因此选择检测波长280 nm。④建立曲线标准：对不同容量的对照品溶液进行吸取，分别放置在10 mL量瓶中，加水后定容至刻度，在280 nm处对吸光度A进行测定，并将其作为纵坐标，横坐标用质量溶度表示，得出Y=0.012 3X-0.000 74(r=1.000)这一回归方程，10～70 mg/L为线性范围。⑤回收率的测定分析：取不同容量丹参素钠对照品溶液，将其加入10 mg的空白微球中，并防止在10 mL的量瓶中，在280 nm处对A进行测定，回收率为98.2%～99.9%，平均为98.7%。

丹参素钠-PLGA微球制备：用精密称对适量的丹参素钠进行提取，与水相溶，制备成溶液，成为内相水(W)，混入一定浓度的PLGA的二氯甲烷和丙酮的混合液，进行W/O初乳的乳化，然后用注射器将含司盘80(span80)和正己烷的液体石蜡溶液，搅拌4 h，使其固化，通过抽滤、洗涤、干燥后，完成制备[2]。

选定处方工艺：用单因素试验考察法，对外油相温度、材料种类、浓度、正己烷的加入量对微球形成造成的影响进行分析。①确定外油相温度：质量浓度为125 g/L的PLGA，300μL的内水相体积，比例为3：7的二氯甲烷-丙酮，用200 mL的液体石蜡和6 mL的正己烷做外油相，用0.25%司盘80当作乳化剂，设定转速为1 400 r/min进行4 h的搅拌。对不同温度为微球形态造成的影响进行观察。结果显示，当温度为55℃时，微球呈现出的状态最好。

丹参素钠-PLGA微球的化学剂性能：①粒径的测定：在恒温条件下将适量的丹参素钠-PLGA混悬液取出，利用激光粒度分析仪对微球的粒径进行测定与分布。②观察丹参素钠-PLGA的形态特征：将少量的丹参素钠-PLGA取出，利用电子显微镜对其形态进行观察，结果显示呈球形，并具有良好的完整性，将微球与明胶溶液相混，在1 mL的注射器中固化。在切片前，OCT包埋剂将微球在冷冻切片机上包埋，在温度为-30℃时，用手术刀对其进行厚度为20μm的切片，干燥后，用显微镜对其结构进行观察，结果显示，在乙烷加至6 mL后，微球内部蜂窝状空洞减小[3]。③药物在材料中分散情况的观察与方法的选用：将不同状态下的丹参素钠通过X线衍射法进行药物在材料中分散情况的观察。结果显示，在2θ=15.797°时，丹参素钠特征衍射峰最强，PLGA为无定型物，衍射峰状态为宽而扁的馒头形，微球与两者的物理混合物峰型相同，但丹参素钠的特征衍射峰强度减弱，说明部分药物依然会在载体材料中以晶体状态分散存在。不同考察因素对丹参素钠-PLGA微球质量的影响，见表1。

讨 论

W/O/W能型乳化溶剂能够将多种水溶性药物通过挥发法进行微球的制备。本次试验显示，在利用W/O/W能型乳化溶剂挥发法对丹参素钠-PLGA缓释微球时，对其质量以及性能造成较大影响的因素主要有材料的种类、溶液搅拌时的转速、正乙烷的加入量、司盘80(%)、材料的浓度、外油相温度以及二氯甲烷与丙酮的比例。其中外油相的温度能够对微球成球性造成直接的影响，如果温度过低，就会导致样品很快变黏，而高温度时，制备的微球固化速度相对较快，可有效避免上述问题的发生。本次实验的有机相选用了二氯甲烷和丙酮，主要原因在于二氯甲烷的沸点较低，而丙酮具有一定的水溶性，二者能够在应用后相融合，并在外油相中扩散，但是如果加入的数量过多，就会造成微球载药量与包封率下降。而在试验中选用PLGA50/50COOR主要原因在于其具有较好的亲水性，能够与水溶性丹参素钠相溶，可以促进载药量与包封率的有效提高。

表1 不同因素对丹参素钠-PLGA微球质量的影响(n)