化学致癌物DNP致人胚鼻咽上皮细胞转化相关基因的鉴定

段朝军　关勇军　何春梅　李　峰　肖志强　陈主初

摘要：为了探讨DNP致癌的分子机理，鉴定出化学致癌物二亚硝基哌嗪（DNP）致人胚鼻咽上皮细胞转化相关的基因及其活化方式。采用DNA共转染、裸鼠致瘤性试验、Southern杂交、PCR测序和序列同源性比较分析等，对DNP转化的人胚鼻咽上上皮细胞株HENE-DNP进行研究。经过两轮DNA共转染和裸鼠致瘤性实验，Southern杂交表明，裸鼠肿瘤DNA中均含有人特异性高度重复序列Alu。用人Ha-ras、Ki-ras及N-ras癌基因特异性引物对裸鼠肿瘤DNA进行PCR扩增，仅能扩增出人Ha-ras基因相应的片段。Southern杂交进一步证实，裸鼠肿瘤DNA中存在与人Ha-ras基因片段大小一致的杂效带。RT-PCR产物测序，并将测序结果与GenBank进行序列同源性比较分析，发现裸鼠肿瘤中人Ha-ras基因cDNA第26位密码子第2位碱基发生了T→C的转换，编码的氨基酸由亮氨酸相应地变换成丝氨酸。化学致癌物DNP致人胚鼻咽上皮细胞转化相关的基因是Ha-ras，原癌基因c-Ha-ras激活可能是DNP转化人胚鼻咽上皮细胞的分子机制之一。

关键词：二亚硝基哌嗪；共转染；转化基因或癌基因

中图分类号：R392

文献标识码：A

文章编号：1007-7847(2005)01-0084-06