酵母双杂交文库筛选及hTRIP15与Y盒结合蛋白-1相互作用的探讨

彭永德　宋怀东　曲　建　张　新　韩泽广　陈家伦

摘要：为探讨甲状腺素受体相互作用蛋白（hTRIP15）是否与其他核蛋白发生相互作用，以hTRIP15作为“诱饵”，用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库，在高严格度选择培养基（SD-Trp-Leu-Ade-His）上长出的克隆773个，再经β-gal表达和PCR等技术进一步缩小范围，经Blastn搜寻最终显示2个重复克隆编码一种共调节辅因子—Y盒结合蛋白-1（YB-1)。将插入序列与全长YB-1比较发现进入ORF内320bp，插入序列编码82aa，该蛋白称为YB-1-p，经蛋白体外翻译及GST-pulldown试验证实YB-1-p与hTRIP15可通过与YB-1相互作用，参与调控MHCⅡ及TSH受体等甲状腺细胞重要基因表达。

关键词：Y盒结合蛋白-1（YB-1）；hTRIP15；酵母双杂交文库筛选；GST pulldown 试验

中图分类号：Q758

文献标识码：A

文章编号：1007-7847(2005)01-0015-04