IFN-γ、IL-2联合检测对老年发热患者结核病诊断的价值

【摘要】 目的：探索结核特异性细胞因子γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）联合检测在老年发热患者结核病诊断中的价值。方法：回顾性分析2022年1月—2024年3月于安徽医科大学附属阜阳人民医院感染科就诊的≥60岁因反复发热住院患者127例。所有患者在进行相关检查后不排除结核感染，并进行结核特异性细胞因子IFN-γ、IL-2联合检测及结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）扩增检测。比较结核病（TB组）与非结核发热（NTB组）患者的IFN-γ、IL-2水平，并分析IFN-γ、IL-2联合检测诊断结核病的价值。结果：127例发热患者中，结核病18例，占14.2%（18/127），其中肺结核14例，肺外结核4例，非结核发热109例，以感染性发热、慢性阻塞性肺疾病急性加重、肺癌为主。TB组IFN-γ、IL-2水平均显著高于NTB组（Plt;0.05）。以TB-DNA为金标准，IFN-γ、IL-2联合检测的敏感度为83.3%、特异度为84.4%。受试者操作特征（ROC）曲线显示，IFN-γ、IL-2联合诊断结核病的AUC为0.940[95%CI（0.886，0.994）]。结论：结核特异性细胞因子IFN-γ、IL-2联合检测在老年发热患者结核病诊断中具有良好价值。

【关键词】 老年患者 发热 γ干扰素 白细胞介素-2 结核病

Value of Combined Detection of IFN-γ and IL-2 in the Diagnosis of Tuberculosis in Elderly Patients with Fever/LI Qianqian， HUANG Mengxin， LI Jiabin， GAO Yufeng， WANG Baogui. //Medical Innovation of China， 2025， 22（02）： -156

[Abstract] Objective： To explore the value of combined detection of tuberculosis specific cytokines interferon-γ （IFN-γ） and interleukin-2 （IL-2） in the diagnosis of tuberculosis in elderly patients with fever. Method： A retrospective analysis was performed on 127 hospitalized patients ≥60 years old with recurrent fever who were admitted to Department of Infectious Diseases， Fuyang People's Hospital Affiliated to Anhui Medical University from January 2022 to March 2024. Tuberculosis infection was not excluded in all patients after relevant examination， and tuberculosis specific cytokines IFN-γ， IL-2 combined detection and Mycobaterium tuberculosis DNA （TB-DNA） amplification detection were performed. The levels of IFN-γ and IL-2 in patients between tuberculosis （TB group） and non-tuberculosis fever （NTB group） were compared， and the value of combined detection of IFN-γ and IL-2 in the diagnosis of tuberculosis was analyzed. Result： Among the 127 patients with fever， 18 cases of tuberculosis， accounting for 14.2% （18/127）， including 14 cases of pulmonary tuberculosis， 4 cases of extrapulmonary tuberculosis. 109 cases of non-tuberculous fever， mainly infectious fever， acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary diseases， lung cancer. The levels of IFN-γ and IL-2 in TB group were significantly higher than those in NTB group （Plt;0.05）. Using TB-DNA as the gold standard， the sensitivity and specificity of combined detection of IFN-γ and IL-2 were 83.3% and 84.4%， respectively. Receiver operating characteristic （ROC） curve showed that the AUC of IFN-γ and IL-2 combined diagnosis of tuberculosis was 0.940 [95%CI （0.886， 0.994）]. Conclusion： The combined detection of tuberculosis specific cytokines IFN-γ and IL-2 has good value in the diagnosis of tuberculosis in elderly patients with fever.

[Key words] Elderly platients Fever IFN-γ IL-2 Tuberculosis

First-author's address： Department of Infectious Diseases， Fuyang People's Hospital Affiliated to Anhui Medical University， Fuyang 236000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2025.02.035

截至2023年末，我国60周岁及以上人口约2.97亿，占总人口的21.1%，老年人口基数大[1]。老年患者多有基础疾病及免疫力下降，部分患者接受激素或免疫抑制剂治疗，免疫系统容易出现功能紊乱[2-3]。老年发热患者的病因诊断是临床常见难题之一，引起发热的病因繁多，如感染、肿瘤、结缔组织病等[4]。但有研究表明，在发热患者中，有50%～80%是由于感染性疾病造成的，其中结核感染引发的发热比例呈明显上升趋势，结核病占感染性发热的13%～60%[5-6]。结核病的临床表现多为不典型症状，发热是结核病常见临床表现之一，容易造成误诊或延误诊断，当无法获取病原学证据时，对发热患者快速诊断结核病并采取精准治疗和结核病防控至关重要[7]。在诊断结核感染中，除肺结核外，淋巴结结核、骨结核等肺外结核感染引发的发热也多见，提示临床医生对老年发热患者应重视结核病的可能[8-9]。本研究回顾性分析了127例老年发热患者的临床资料，对不明确是否因结核感染造成发热的患者进行辅助诊断与鉴别诊断，旨在分析结核特异性细胞因子γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）联合检测在老年发热患者中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用回顾性研究，选择2022年1月—2024年3月于安徽医科大学附属阜阳人民医院感染科就诊的≥60周岁反复发热住院患者127例。纳入标准：（1）年龄≥60周岁；（2）反复发热，进行相关检查后不排除结核感染；（3）行IFN-γ和IL-2检测；（4）临床资料完整。排除标准：（1）合并多种免疫系统疾病；（2）陈旧性结核。本研究已获得安徽医科大学附属阜阳人民医院医学伦理委员会批准[批号：2021（141号）]。

1.2 方法

1.2.1 IFN-γ、IL-2检测 肝素抗凝管采集所有患者外周血4 mL，采用结核分枝杆菌特异性细胞因子检测试剂盒（广州迪澳医疗科技有限公司），从全血中分离外周血单个核细胞（PBMC），在细胞培养板上按照每份样本分布阴性对照孔（N）、蛋白刺激孔（T）、阳性对照物孔（P），每孔加入的细胞数量为2.5×105个。将细胞培养板放入37 ℃，5% CO2培养箱培养16～20 h，使用酶联免疫吸附试验分别对上清中IFN-γ和IL-2进行浓度测定。结果判定：IFN-γ T-N≥7 pg/mL和/或IL-2 T-N≥20 pg/mL为阳性；IFN-γ T-Nlt;7 pg/mL，IL-2 T-Nlt;20 pg/mL且IFN-γ P-N≥35 pg/mL，IL-2 P-N≥130 pg/mL为阴性；若IFN-γ T-Nlt;7 pg/mL，IL-2 T-Nlt;20 pg/mL而IFN-γ P-Nlt;35 pg/mL和/或IL-2 P-Nlt;130 pg/mL为不确定。

1.2.2 结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）扩增检测 用结核分枝杆菌特异性引物和特异性荧光探针，配以聚合酶链式反应（PCR）反应液、耐热DNA聚合酶、4种核苷酸单体等成分，通过PCR体外扩增法进行DNA扩增，从而检测结核分枝杆菌。

1.2.3 诊断标准 在样本中检测到结核分枝杆菌存在确诊为结核病，以TB-DNA扩增检测作为诊断金标准。非结核病按相应疾病的诊断标准进行诊断，并经临床诊断及鉴别诊断最终确诊。

1.3 统计学处理

采用SPSS 26.0软件对数据进行统计分析。正态分布计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验；非正态分布计量资料用M（P25，P75）表示，组间比较用Man-Whitney U检验；计数资料以率（%）描述，组间比较采用字2检验。采用受试者操作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲线评估IFN-γ和IL-2联合检测在老年发热患者中的诊断价值。以Plt;0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基线资料

TB-DNA扩增检测确诊结核病患者18例，纳入TB组，非结核发热患者109例，纳入NTB组。结核病患者中，肺结核11例，肺结核合并结核性胸膜炎3例，结核性胸膜炎2例，腰椎结核1例，心包结核1例。非结核发热患者中，感染性发热63例、慢性阻塞性肺疾病急性加重20例、肺癌14例、非结核分枝杆菌（NTM）肺病11例、结缔组织病1例。127例患者中，因感染导致的发热共92例（包括结核病、感染性发热、NTM肺病），占72.4%，其中结核病占感染导致的发热的19.6%。TB组男12例（66.7%），女6例（33.3%）；年龄61～83岁，平均（73.50±6.67）岁。NTB组男60例（55.0%），女49例（45.0%）；年龄60～89岁，平均（71.38±7.31）岁。两组性别、年龄比较，差异均无统计学意义（字2=0.850、P=0.357，t=1.156、P=0.845）。

2.2 IFN-γ、IL-2联合检测结果

IFN-γ、IL-2联合检测诊断肺结核的敏感度为83.3%，特异度为84.4%；TB组IFN-γ、IL-2水平均显著高于NTB组（Plt;0.05）。见表1、表2。

2.3 IFN-γ、IL-2联合检测诊断结核病的价值

IFN-γ、IL-2联合检测诊断老年发热患者结核病的AUC为0.940[95%CI（0.886，0.994）]，见图1。

3 讨论

发热为结核病常见症状之一，与其他感染、基础疾病、癌症等造成的发热进行鉴别诊断非常重要，特别是在结核病发现的主要场所和前哨的综合医院，提高结核实验室诊断和鉴别诊断能力，是提高综合医院结核病诊、治、防、控水平的首要任务[10-12]。本研究中老年发热患者127例，因感染造成的发热占72.4%，是引发患者发热的主要原因，与以往文献[13]研究一致，其中结核病引发的发热占19.6%，与以往文献[14]研究数据基本相符。我国作为结核病的高发地区，老年人作为结核病高危人群，及时进行活动性结核病的排查，是早期主动发现活动性结核病的重要措施，对未明确发热原因怀疑结核病老年患者进行结核病筛查，排除结核病值得关注。

结核病的诊断是以病原学（细菌学、分子生物学）、病理学作为确诊依据，在样本中找到结核分枝杆菌，可确诊为结核病。但在老年人群中，由于呼吸道生理学特点、基础疾病及普遍无力型体质，部分患者不会咳痰或不易获得高质量的痰标本，且结核分枝杆菌培养、基因检测时间较长，不利于结核病的早期诊断和治疗[15-16]。故找到高效、快速诊断结核病的方法，对于结核病的早发现、早治疗十分重要。近些年IFN-γ释放试验作为新建立的细胞免疫学检测方法，广泛应用于结核病的辅助诊断、非结核病的鉴别诊断及高危、健康人群潜伏性结核感染的筛查，具有较好的结核病辅助诊断价值，但是无法区分潜伏性结核感染和活动性结核病[15]。近些年发现结核特异性细胞因子IFN-γ和IL-2联合检测在提示活动性结核病中有良好的价值[17-18]，且IL-2应用于结核病的研究也较多[19-21]。本研究中TB组IL-2的水平显著高于NTB组，说明IL-2可作为结核病诊断标志物对结核病辅助、鉴别诊断。在老年发热患者中IFN-γ、IL-2联合检测的敏感度为83.3%，AUC为0.940，提示双因子联合检测在老年发热患者结核病的辅助诊断中有良好的应用价值，可更好的警示活动性结核病。

本研究不足之处在于病例数量有限，特别是老年结核病患者数量较少，且并未考虑患者之间差异，如基础疾病、合并感染等。在未来，需要更大规模的前瞻性研究来确定IFN-γ、IL-2联合检测作为结核分枝杆菌感染诊断标志物的临床应用，并收集各类结核患者，以更好的分析IFN-γ、IL-2联合检测在肺结核、肺外结核诊断中的应用效果。还有研究表明，IFN-γ、IL-2水平比值与结核病状态、治疗效果具有一定相关性，有待于进一步研究。

综上所述，结核特异性细胞因子IFN-γ、IL-2联合检测在老年发热患者结核病诊断中有良好的诊断价值。

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（收稿日期：2024-05-21） （本文编辑：陈韵）