异型淋巴细胞比例对传染性单核细胞增多症患儿免疫系统的影响

[摘要]"目的"探讨异型淋巴细胞比例对传染性单核细胞增多症（infectious"mononucleosis，IM）患儿免疫系统的影响。方法"选取2023年5月至2024年5月金华市妇幼保健院收治的153例IM患儿作为IM组，选取同期153名健康儿童作为健康组，分析异型淋巴细胞比例与IM患儿EB病毒载量的关系。检测并比较两组纳入者的免疫系统指标[补体C3、C4、CD19+细胞、T淋巴细胞亚群、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM]表达水平，分析异型淋巴细胞比例与免疫系统指标的关系。根据免疫情况将IM患儿分为严重免疫系统紊乱组、非严重免疫系统紊乱组，分析严重免疫系统紊乱IM患儿的临床特征并比较异型淋巴细胞比例差异。结果"与健康组比较，IM组患儿的异型淋巴细胞比例升高（Plt;0.001）。Pearson检验显示异型淋巴细胞比例与IM患儿EB病毒载量呈正相关（Plt;0.05）。与健康组比较，IM组患儿补体C3、C4、CD8+T细胞、IgA、IgG、IgM水平升高，CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD19+细胞降低（Plt;0.001）。在IM儿童中，异型淋巴细胞比例与CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD19+细胞呈负相关，与CD8+T细胞、IgA、IgG、IgM呈正相关（Plt;0.05）。异型淋巴细胞比例升高是IM患儿免疫系统紊乱程度的危险因素（Plt;0.001）。异型淋巴细胞比例诊断IM患儿免疫系统紊乱的曲线下面积为0.918。结论"IM患儿存在不同程度的免疫系统紊乱现象，以特异性免疫紊乱为主，其紊乱程度与异型淋巴细胞比例升高有关。异型淋巴细胞比例可作为早期诊断IM患儿免疫紊乱程度的参考指标。

[关键词]"传染性单核细胞增多症；异型淋巴细胞比例；细胞免疫；体液免疫；免疫系统紊乱

[中图分类号]"R512.7""""""[文献标识码]"A""""""[DOI]"10.3969/j.issn.1673-9701.2024.36.011

The"effect"of"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"on"the"immune"system"of"children"with"infectious"mononucleosis

LIU"Chuchu，"ZHONG"Xiaoying

Department"of"Pediatrics，"Jinhua"Maternal"and"Child"Health"Care"Hospital，"Jinhua"321000，"Zhejiang，"China

[Abstract]"Objective"To"study"the"effect"of"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"on"the"immune"system"of"children"with"infectious"mononucleosis"（IM）."Methods"153"children"with"IM"admitted"Jinhua"Maternal"and"Child"Health"Care"Hospital"from"May"2023"to"May"2024"were"selected"as"IM"group，"and"153"healthy"children"were"selected"as"healthy"group."The"relationship"between"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"and"EB"virus"load"in"IM"patients"was"analyzed."The"expression"levels"of"immune"system"indicators"[complement"C3，"C4，"CD19+cells，"T"lymphocyte"subsets，"immunoglobulin"（Ig）"A，"IgG，"IgM]"between"two"groups"were"detected"and"compared，"the"relationship"between"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"and"immune"system"indicators"was"analyzed."The"children"with"IM"were"divided"into"severe"immune"system"disorder"group"and"non-severe"immune"system"disorder"group"according"to"the"immune"status，"the"clinical"characteristics"of"children"with"severe"immune"disorder"analyzed"and"compared"the"differences"in"the"proportion"of"atypical"lymphocytes."Results"Compared"with"healthy"group，"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"in"IM"group"increased"（Plt;0.001）."Pearson"correlation"test"showed"a"positive"correlation"between"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"and"EBnbsp;virus"load"in"children"with"IM"（Plt;0.05）."Compared"with"healthy"group，"levels"of"complement"C3，"C4，"CD8+T"cells，"IgA，"IgG"and"IgM"were"increased"in"IM"group，"while"CD4+T"cells，"CD4+/CD8+"ratio，"and"CD19+"cells"were"decreased"（Plt;0.001）."In"children"with"IM，"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"was"negatively"correlated"with"CD4+T"cells，"CD4+/CD8+"ratio，"and"CD19+"cells，"and"positively"correlated"with"CD8+T"cells，"IgA，"IgG"and"IgM"（Plt;0.05）."The"increased"proportion"of"atypical"lymphocytes"was"a"risk"factor"for"the"degree"of"immune"system"disorder"in"children"with"IM"（Plt;0.001）."Area"under"the"curve"for"diagnosing"immune"system"disorders"in"children"with"IM"using"the"proportion"of"atypical"lymphocytes"was"0.918."Conclusion"Children"with"IM"exhibit"varying"degrees"of"immune"system"disorders，"with"specific"immune"disorders"being"the"main"cause."The"degree"of"disorder"is"related"to"an"increase"in"the"proportion"of"atypical"lymphocytes，"which"can"serve"as"a"reference"indicator"for"early"diagnosis"of"immune"disorders"in"children"with"IM.

[Key"words]"Infectious"mononucleosis;"Proportion"of"atypical"lymphocytes;"Cellular"immunity;"Humoral"immunity;"Immune"system"disorders

传染性单核细胞增多症（infectious"mononucleosis，IM）属常见的急性自限性疾病，约90%是由EB病毒引起。IM常见于5岁以下儿童，多表现为发热、咽峡炎、颈部淋巴结肿大，并可累及多器官系统，严重影响患儿预后[1-3]。研究表明IM患儿通常存在不同程度的免疫系统紊乱，可能因为EB病毒侵入机体后免疫系统被激活，触发非特异性和特异性免疫反应，清除有害物质并维持机体稳态[4]。研究发现健康人体B淋巴细胞表面存在EB病毒受体[5]。EB病毒侵袭机体后产生的特异性抗体可与B淋巴细胞表面的EB病毒受体结合，继而激活T淋巴细胞并使其转换为异型淋巴细胞。针对EB病毒感染后异型淋巴细胞特点，临床通常将异型淋巴细胞比例作为儿童IM的辅助诊断指标，且已证实异型淋巴细胞比例可用于IM的诊断。然而，关于异型淋巴细胞比例是否会对宿主免疫系统产生影响的研究较少。本研究通过分析异型淋巴细胞比例对IM患儿免疫系统的影响，明确其相关性，以期为IM的早期诊疗提供参考。

1""资料与方法

1.1""资料来源

选取2023年5月至2024年5月金华市妇幼保健院收治的153例IM患儿作为IM组，男78例，女75例，年龄2～10岁，平均（5.45±1.98）岁。纳入标准：①符合儿童IM的诊断[6]；②初次诊断；③家属签署知情同意书。排除标准：①EB病毒合并其他病原体感染；②患有先天免疫性疾病者；③肝肾原发损伤者；④先天畸形、染色体疾病者。另选取同期于金华市妇幼保健院体检的153名健康儿童作为健康组，男72名，女81名，年龄2～10岁，平均（5.26±1.76）岁。两组纳入者的一般资料比较差异无统计学意义（Pgt;0.05）。本研究经金华市妇幼保健院伦理委员会审批通过（伦理审批号：2024年伦审QT第087号）。

1.2""研究方法

1.2.1""异型淋巴细胞比例检测""抽取纳入者2ml空腹静脉血，使用EDTA-K2抗凝，血涂片后行瑞氏-姬萨姆染液染色，经油镜计数100个白细胞，计算异型淋巴细胞比例。

1.2.2""EB病毒载量检测""抽取纳入者3ml空腹静脉血，3000转/min离心10min获得血清，使用荧光定量聚合酶链反应法检测EB病毒载量。荧光探针序列：5ʹ-CACCCAGGCACAGTACACCTGAT-3ʹ。

1.2.3""免疫系统指标检测""抽取纳入者3ml空腹静脉血，使用Multiskan"FC全自动酶标仪检测补体C3、C4、免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）A、IgG、IgM水平，使用BD"FACSAriaⅡ流式细胞仪检测CD19+细胞（B细胞）、CD4+T细胞、CD8+T细胞比例，并计算CD4+/CD8+。

1.2.4""IM患儿免疫系统紊乱程度评价""根据IM患儿T淋巴细胞亚群与正常儿童的差异值评价免疫系统紊乱程度，将CD4+T细胞、CD4+/CD8+低于同龄正常儿童均值±2标准差、CD8+T细胞高于同龄正常儿童均值±2标准差定义为严重免疫系统紊乱，最终筛选得到严重免疫系统紊乱组112例，非严重免疫系统紊乱组41例。采集两组患者的性别、年龄、临床表现、EB病毒抗体阳性、异型淋巴细胞比例及免疫系统指标。

1.3""统计学方法

采用SPSS"21.0统计学软件对数据进行处理分析。计量资料以均数±标准差（"）表示，组间比较采用独立样本t检验；计数资料以例数（百分率）[n（%）]表示，组间比较采用c2检验；Pearson检验分析指标的相关性；经Logistic回归分析异型淋巴细胞比例是否为影响IM患儿免疫系统状态的危险因素；采用受试者操作特征曲线（receiver"operating"characteristic"curve，ROC曲线）分析异型淋巴细胞比例诊断IM患儿免疫系统状态的效能。Plt;0.05为差异有统计学意义。

2""结果

2.1""两组纳入者的异型淋巴细胞比例比较

与健康组纳入者[（1.97±0.23）%]比较，IM组患儿的异型淋巴细胞比例[（16.56±1.34）%]升高（t=132.700，Plt;0.001）。

2.2""异型淋巴细胞比例与IM患儿EB病毒载量的关系分析

IM患儿EB病毒载量为（7.56±2.15）×103copy/ml，Pearson分析显示异型淋巴细胞比例与IM患儿的EB病毒载量呈正相关（r=0.504，Plt;0.05），见图1。

2.3""两组纳入者的免疫系统指标比较

与健康组纳入者比较，IM组患儿的补体C3、C4、CD8+T细胞、IgA、IgG、IgM升高，CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD19+细胞降低（Plt;0.001），见表1。

2.4""异型淋巴细胞比例与IM患儿免疫系统指标的相关性分析

IM患儿中异型淋巴细胞比例与补体C3、C4无关（Pgt;0.05），与CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD19+细胞呈负相关，与CD8+T细胞、IgA、IgG、IgM呈正相关（Plt;0.05），见表2。

2.5""不同免疫系统紊乱程度IM患儿的临床特征分析

与非严重免疫系统紊乱组患儿比较，严重免疫系统紊乱组患儿的热程更长，更易出现发热、咽峡炎表现，EB病毒载量更高（Plt;0.05），见表3。

2.6""不同免疫系统紊乱程度IM患儿异型淋巴细胞比例及免疫指标的比较

与非严重免疫系统紊乱组患儿比较，严重免疫系统紊乱组患儿的异型淋巴细胞比例更高，免疫细胞指标异常更显著（Plt;0.001），见表4。

2.7""影响IM患儿免疫系统紊乱程度的因素分析

Logistic回归分析显示，异型淋巴细胞比例升高是IM患儿免疫系统紊乱程度的危险因素（Plt;0.001），见表5。

2.8""异型淋巴细胞比例诊断IM患儿免疫系统紊乱程度的效能分析

绘制ROC曲线分析异型淋巴细胞比例诊断IM患儿免疫系统紊乱程度的效能发现，异型淋巴细胞比例诊断的曲线下面积为0.918，95%CI：0.876～0.961，当截断值为16.00%时诊断效能最佳，敏感度为89.97%，特异性为85.64%。

3""讨论

异型淋巴细胞多见于EB病毒感染后，可严重影响患儿的生长发育[7]。研究发现EB病毒通过口腔进入机体后，可感染具有相关受体的咽上皮细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞，导致T淋巴细胞异常增殖，最终形成异型淋巴细胞[8]。本研究发现与健康组比较，IM组患儿的异型淋巴细胞比例显著升高，且与EB病毒载量呈正相关，提示异型淋巴细胞的产生与EB病毒有关，这可能与EB病毒持续刺激下正常的B、T淋巴细胞发生形变进而生成大量异型淋巴细胞有关。该结果与钟田花等[9]研究认为异型淋巴细胞比例升高与EBV-DNA载量呈正相关的结果一致，但与石秋萍等[10]研究认为异型淋巴细胞比例与IM患者EB病毒载量无关的结果相悖，归因于纳入人群年龄或样本量不同。

近年来随着免疫学研究的深入，IM免疫系统紊乱机制越来越受到临床关注。研究表明EB病毒感染后，一方面细胞吞噬系统、补体系统迅速启动非特异性免疫反应，另一方面激活细胞与体液免疫产生特异性免疫反应，导致免疫细胞、分子活性异常，免疫系统紊乱[11]。补体C3、C4作为非特异性免疫的重要标志物，具有维持机体免疫平衡、避免免疫复合物沉积的功能，可通过抵御外界病原微生物入侵阻碍疾病的进展[12-13]。本研究发现IM患儿补体C3、C4水平高于健康儿童，但异型淋巴细胞比例与两者并无明显关联，提示异型淋巴细胞比例增加可能对机体非特异性免疫反应产生的影响较小。

研究表明IM发生后存在不同程度的EB病毒寡克隆或多克隆增殖现象，此过程中B、T淋巴细胞共同诱导机体产生特异性免疫反应，即CD19+细胞分泌减少，CD4+T细胞、CD8+T细胞数量异常[14-16]；另有研究显示，当EB病毒攻击T淋巴细胞时，免疫反应增强，CD8+T细胞大量增殖，杀伤感染EB病毒的CD19+细胞，促使其凋亡[17-19]。B淋巴细胞在适应性免疫反应中具有关键作用，可生成高亲和力抗体和充当抗原呈递细胞并分泌细胞因子，并生成IgA、IgG、IgM等抗体[20-21]。本研究发现IM患儿较健康儿童存在明显的免疫系统紊乱现象，其中特异性免疫反应指标改善更显著，提示EB病毒感染可引起IM患儿免疫系统紊乱且以特异性免疫反应异常为主。经相关性分析发现，在儿童IM中异型淋巴细胞比例与CD4+T细胞、CD4+/CD8+、CD19+细胞呈负相关，与CD8+T细胞、IgA、IgG、IgM呈正相关，提示异型淋巴细胞比例升高可影响IM后特异性免疫反应。分析原因可能为EB病毒攻击B、T淋巴细胞产生异型淋巴细胞后反向引起B、T淋巴细胞功能改变，介导特异性免疫反应，最终导致免疫系统紊乱。

为进一步分析IM患儿免疫系统紊乱特征，本研究与健康儿童比较，分析得出IM患儿免疫系统紊乱程度。结果显示所纳入的IM患儿大多存在严重免疫系统紊乱表现，且此类患儿热程更长，更易出现咽峡炎表现，EB病毒载量更高。由此可见，严重免疫系统紊乱的IM患儿临床特征更突出。

综上所述，IM患儿异型淋巴细胞比例升高，与免疫系统紊乱程度有关。异型淋巴细胞比例升高是IM患儿免疫系统紊乱的危险因素，可作为早期诊断IM患儿免疫系统紊乱程度的参考指标。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

[参考文献]

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