CD7在儿童急性髓细胞性白血病中表达的临床意义

李争 朱洁 冯丹 梁昌达

[摘要] 目的 探討CD7在儿童急性髓细胞性白血病（acute myeloid leukemia，AML）中表达的临床意义。方法 回顾性分析2016年10月至2020年12月江西省儿童医院收治的60例AML患儿资料，根据免疫分型结果分为CD7阳性（CD7+）组和CD7阴性（CD7–）组，对比两组患儿的临床特征、免疫表型及治疗效果。结果 60例AML患儿中，CD7+18例，阳性率为30.00%；以M2及M5为主，其中M2的表达率为55.56%，高于其他亚型。CD7+组患儿的白细胞计数及骨髓原始粒细胞计数显著高于CD7–组（P<0.05），而两组患儿的血小板计数、血红蛋白、乳酸脱氢酶及肌酐等实验室指标均相近（P>0.05）。患儿均接受标准诱导化疗方案治疗1个疗程后，CD7+组的完全缓解率低于CD7–组（P<0.05）。两组患儿1年和2年的总生存率及无病生存率均相近（P>0.05）。结论 与CD7–患儿比较，CD7+患儿外周白细胞计数和骨髓原始细胞计数均显著增高，且第1疗程的完全缓解率显著降低。CD7抗原表达对AML患儿的不良预后具有显著的预测价值，可能为AML患儿的治疗策略提供新的思路，并为进一步探索CD7在AML发展中的作用机制奠定基础。

[关键词] CD7；儿童；急性髓细胞性白血病；临床意义

[中图分类号] R725.5；R733.7      [文献标识码] A      [DOI] 10.3969/j.issn.1673-9701.2024.12.006

The clinical significance of CD7 expression in children acute myeloid leukemia

LI Zheng1， ZHU Jie2， FENG Dan3， LIANG Changda1

1.Department of Hematology and Oncology， Jiangxi Province Childrens Hospital， Nanchang 330006， Jiangxi， China; 2.Department of Nephrology， Jiangxi Province Childrens Hospital， Nanchang 330006， Jiangxi， China; 3.Department of General Surgery， Jiangxi Province Childrens Hospital， Nanchang 330006， Jiangxi， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of CD7 expression in childhood acute myeloid leukemia （AML）. Methods A retrospective analysis was performed on 60 children with AML admitted to Jiangxi Province Childrens Hospital from October 2016 to December 2020. According to the results of immunophenotyping， the children were divided into CD7 positive （CD7+） group and CD7 negative （CD7–） group. The clinical characteristics， immunophenotype and treatment effect of the two groups were compared. Results Among 60 children with AML， 18 cases were CD7+， and the positive rate was 30.00%， mainly M2 and M5， the expression rate of M2 was 55.56%， which was higher than that of other subtypes. The CD7+ group had significantly higher white blood cell count and bone marrow blast granulocyte count than the CD7– group （P<0.05）. There were no significant differences in platelet count， hemoglobin， lactate dehydrogenase， creatinine and other laboratory indicators between the two groups （P>0.05）. After 1 course of standard induction chemotherapy， the CD7+ group had a significantly lower complete remission rate than the CD7– group （P<0.05）. There was no statistically significant difference （P>0.05） in the overall survival  rate and disease free survival rate between the two groups of patients at 1 year and 2 years. Conclusion Compared with CD7– children， the peripheral white blood cell count and bone marrow blast cell count of CD7+ children were significantly higher， and the complete remission rate of induction chemotherapy was significantly lower. The expression of CD7 antigen has a significant predictive value for the poor prognosis of children with AML， which may provide new ideas for the treatment strategy of children with AML， and lay the foundation for further exploring the mechanism of CD7 in the development of AML.

[Key words] CD7; Children; Acute myeloid leukemia; Clinical significance

急性髓细胞性白血病（acute myeloid leukemia，AML）是急性白血病中一种常见类型，起源于造血干细胞的恶性克隆性增殖。作为一种严重的血液系统疾病，AML具有高度异质性，起病急骤且病情进展迅速，对患者的身体健康构成极大威胁。深入研究AML的发病机制及探索有效的治疗策略，对改善患者的预后具有重要意义。目前AML的治疗手段包括放化疗、免疫抑制剂治疗及造血干细胞移植等，一定程度上可实现疾病的完全缓解，但复发率仍较高，且其疗效及预后受多种因素影响[1]。值得注意的是大量AML患者并未出现相关的遗传学改变，同时，并非所有患者的分子生物学标志均可被检测到。临床中始终在寻求简便易行、广泛适用的预后因素，以便对患者进行精准的预后分层。流式细胞术是一种先进的细胞分析技术，它利用流式细胞仪的高精度测量能力对细胞膜表面或细胞质内的特异性抗原进行精确检测。通过该技术可深入探究细胞的系列归属、分化阶段及功能特性，为细胞生物学和医学研究提供全面、细致的数据支持[2]。该检测技术可用于识别白血病细胞上不同抗原的表达，以便对急性白血病进行更精细的分层。白血病细胞在其免疫表型上常出现跨系抗原表达，次类抗原可反映白血病细胞发育与分化的异常状态，该指标在疾病的监测与预后评估中具有重要的参考意义。在深入理解其表达规律及临床意义的基础上可更好地指导临床治疗方案的选择和预后的评估，为靶向药物治疗和疗效监测提供有力的科学依据[3]。CD7为AML常见的跨系表达的免疫表型，目前关于CD7阳性（CD7+）AML患者临床特征及预后暂无统一的认识，尤其针对儿童AML的研究少之又少[4]。基于此，本研究以江西省儿童医院收治的60例AML患儿为研究对象，对其临床特征、免疫表型及治疗效果进行比较，现报道如下。

1  资料与方法

1.1  一般资料

选取2016年10月至2020年12月江西省儿童医院收治的60例AML患儿为研究对象。纳入标准：①经骨髓细胞形态学、细胞遗传学、免疫表型及分子生物学检查确诊为AML，诊断符合WHO标准[5]；②接受规律化疗并完成至少1个疗程；③临床资料完整。排除标准：①确诊为AML-M3的患儿；②规律治疗前已在外院接受过放化疗的患儿。收集患儿的相关临床资料用于統计分析。根据免疫分型结果将患儿分为CD7+组和CD7–组。本研究中男26例，女34例；年龄9月龄至13.0岁，平均年龄（7.23±2.45）岁；FAB分型：M0 1例，M2 38例，M4 3例，M5 16例，M7 2例。所有患儿的监护人均签署知情同意书。本研究经江西省儿童医院伦理委员会审批通过（伦理审批号：JXSETYY-YXKY-20220030）。

1.2  免疫表型分析

本研究采用流式细胞术检测患儿骨髓样本中白血病细胞表面抗原分子的表达情况。首先取50份患儿骨髓样本，加入荧光标记的抗人单克隆抗体，室温下避光孵育15min。随后加入1ml溶血素，裂解红细胞10min。离心后弃去上清液，用磷酸盐缓冲液（phosphate buffered saline，PBS）洗涤2次。然后通过流式细胞仪（美国BD公司FACSCanto型）进行检测，采用Diva软件进行数据分析。检测过程中以CD45/SSC双参数二维散点图设门，以细胞膜抗原表达量≥参数二为阳性，细胞质抗原阳性率≥阳性，作为判定阳性的标准。实验中使用的荧光标记的抗人单克隆抗体及相应同型对照抗体、破膜剂均购自美国BD公司。

1.3  实验室检测

抽取患儿静脉血3ml，并采用日本Sysmex公司生产的Sysmex xN2000全自动血液分析仪进行血液细胞学分析，包括白细胞计数、血小板计数、血红蛋白水平及骨髓原始粒细胞比例、乳酸脱氢酶和肌酐等指标。实验所用试剂盒购自日本世诺公司，所有步骤均严格按照说明书操作。

1.4  治疗方案

对患儿病情进行评估后，采用CCLG-2015AML方案进行规范化疗[6]。化疗前均取得患儿/监护人的知情同意。

1.5  疗效判定

完全缓解（complete response，CR）定义为患儿所有相关症状和体征均完全消失，外周血中不存在原始细胞，且无髓外白血病表现；同时，患儿的骨髓造血功能恢复正常，骨髓中原始粒细胞比例<5%，血小板计数≥100×109/L。本研究采用总生存（overall survival，OS）和无病生存（disease free survival，DFS）评估患儿的预后。OS为从患儿确诊至因任何原因死亡、失访或随访截止时的时间。DFS指从患儿达到CR至白血病复发、因任何原因死亡、失访或随访截止时的持续时间。

1.6  统计学方法

采用SPSS 26.0统计学软件对数据进行处理分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，比较采用t检验；不符合正态分布的计量资料以中位数（四分位数间距）[M（Q1，Q3）]表示，比较采用秩和检验。计数资料以例数（百分率）[n（%）]表示，比较采用c2检验。应用Kaplan-Meier绘制生存曲线。P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  两组患儿的一般资料比较

CD7+组18例，其中男10例，女8例；CD7–组42例，其中男16例，女26例。CD7+组患儿中位发病年龄低于CD7–组，差异无统计学意义（P> 0.05）；CD7+组患儿的FAB分型以M2及M5为主，其中M2的表达率为55.56%，高于其他亚型。两组患儿的分型分布比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2  两组患儿的实验室检查结果比较

CD7+组患儿的白细胞计数及骨髓原始粒细胞计数显著高于CD7–组（P<0.05）；两组患儿的血小板计数、血红蛋白、乳酸脱氢酶及肌酐等指标比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表2。

2.3  两组患儿的近远期疗效比较

在接受标准诱导化疗方案治疗1个疗程后，CD7+组CR9例，无缓解9例，CR率50.00%，显著低于CD7–组的76.19%（P<0.05）。两组患儿1年、2年的OS率及DFS率比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

3  讨论

AML是一种恶性克隆性疾病，其生物学特性展现出显著的异质性，临床主要根据患者初诊时的细胞遗传学或分子生物学异常改变，判断疾病的危险度分层情况，为治疗及预后判断提供参考。然而>1/2的AML患者在初诊时染色体核型检测结果正常，也未见核分裂相，传统的细胞遗传学技术在针对残留病灶的分层分析上，显得无能为力[7]。因此，为更准确地判断患儿的预后，并为AML的治疗提供指导，避免过度治疗或治疗不足带来的不良后果，临床上亟需寻找既简单易行又易于获取的特异性标志物，以便与遗传学检查结果相互补充。流式细胞术近年来在临床广泛使用，可用于检测白血病细胞表面特异性抗原标志物，其操作方便且敏感度高，广泛用于AML的诊断及分型，对疾病的治疗与预后判断有重要意义。

CD7抗原是一种单链糖蛋白，是T细胞发育过程中的血液肿瘤特异且敏感的标志性抗原指标。该抗原不仅在健康人的T细胞及自然杀伤细胞中表达，同时也在淋系、髓系前体细胞等造血干细胞中有所表达[8]。研究显示，其表达与疾病侵袭性、耐药性和预后不良有着密切关联[9]。有文献报道，在初诊AML患儿中的CD7阳性率为10%～19%[10]。卢业健等[11]研究显示，CD7+AML患儿占34.8%，FAB亚型以M2及M4为主。本研究中，60例AML患儿中CD7+18例，阳性率为30.00%，以M2及M5为主，其中M2的表达率为55.56%，高于其他亚型。

影响AML预后的因素较多，如年龄、白细胞计数、染色体核型、早期治疗反应等，而CD7表达是否对AML预后产生影响仍存在争议。有研究显示，CD7+AML患儿多存在肝脾大、血管内凝血及中枢神经系统浸润等表现[12]。栾春来等[13]研究发现，CD7+及CD7–患儿肝脾肿大比例比较差异无统计学意义。本研究结果显示，CD7+组与CD7–组患儿年龄、性别、FAB分型之间均相近，CD7+组白细胞计数及骨髓原始粒细胞计数显著高于CD7–组，可见CD7+患儿肿瘤负荷更高，更易出现白细胞瘀滞症，预后情况更差。

近年来随着化疗、造血干细胞移植及支持治疗技术的不断发展，患儿的预后得到较大改善，30%～50%的AML患儿可长期生存；但仍有部分复发/难治的患儿，由于化疗再缓解率低、耐受性差，预后十分不理想，此类患儿是目前治疗难点。有研究认为，CD7+患儿的PFS及OS短于CD7–患儿，CR率低于CD7–患儿，认为CD7+是AML的预后不良因素[14]；然而也有学者认为，CD7的表达对AML患儿的CR率及远期预后无显著影响[15]。本研究结果显示，患儿接受诱导化疗方案治疗1个疗程后，CD7+组CR9例，无缓解9例，CR率50.00%显著低于CD7–组的76.19%，而两组1年、2年的OS率及DFS率相近。由此可看出CD7+患儿诱导缓解率较低，早期治疗反应欠佳，可能与其肿瘤负荷高有关，但两组之间在远期预后上相近。当然，本研究样本量较小，遗传学资料不全，且病例均来源于单中心，CD7能否作为判断儿童AML预后的独立风险因子还需开展大样本量及多中心的研究验证。

综上，CD7为AML常见的跨系表达抗原，CD7+患儿外周白细胞计数及骨髓原始粒细胞计数更高，诱导缓解率更低，CD7抗原表达可能对AML不良预后有预测价值。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

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（收稿日期：2023–06–25）

（修回日期：2024–04–08）