芪参六味方抑制内皮-间质转化改善自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用机制

黄丽君 董菲 高群 贾文浩 肖华丽 余林波 毛天诗 惠嫣然 林谦 周鹍

摘要 目的：研究芪参六味方对自发性高血压大鼠（SHR）心肌纤维化的作用及机制。方法：构建SHR模型，将大鼠分为模型组、中药低浓度组、中药高浓度组、西药组，另以同龄Wistar-Kyoto（WKY）大鼠作为对照组，每组6只，干预12周。干预12周后进行心功能检测，计算心脏收缩功能指标左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）及心脏舒张功能指标舒张早期跨二尖瓣血流速度（E）与舒张早期二尖瓣环运动幅度（E′）的比值E/E′；干预12周后处死大鼠，取左心室心肌组织，进行苦味酸-天狼猩红染色后观察心肌间质中胶原纤维总面积及Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原面积，计算两种胶原面积比值；蛋白质免疫印迹法（Western Blot）检测心肌组织中心肌纤维化相关指标Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）与内皮-间质转化（EndMT）相关血小板-血管内皮黏附分子（CD31）、血管内皮钙黏蛋白（VE-Cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、人成纤维细胞特异蛋白1（FSP1）的表达水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测EndMT相关指标CD31、VE-Cadherin、α-SMA、FSP1 mRNA的表达水平。结果：干预12周后，与模型组相比，中药高剂量组降低心肌组织MMP-9蛋白表达（P＜0.05），中药高剂量组与西药组均可降低心肌间质Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白表达水平（P＜0.01），改善大鼠心脏舒张功能E/E′（P＜0.01），降低EndMT相关蛋白α-SMA、FSP1蛋白表达及VE-Cadherin、α-SMA mRNA表达水平（P＜0.05或P＜0.01）。结论：芪参六味方可以减轻SHR大鼠心肌纤维化程度，改善心脏舒张功能，其作用机制可能与抑制EndMT有关。

关键词 高血压；芪参六味方；心肌纤维化；内皮-间质转化；机制；气血；实验研究

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.03.009

Mechanism of Qishen Liuwei Formula in Inhibiting Endothelial-mesenchymal Transition to Improve Myocardial Fibrosis in Spontaneously Hypertensive Rats

HUANG Lijun， DONG Fei， GAO Qun， JIA Wenhao， XIAO Huali， YU Linbo， MAO Tianshi， HUI Yanran， LIN Qian， ZHOU Kun

Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100029， China

Corresponding Author ZHOU Kun， E-mail： dfzhk@126.com

Abstract Objective：To investigate the effect and mechanism of Qishen Liuwei Formula on myocardial fibrosis in spontaneously hypertensive rats.Methods：The spontaneously hypertensive rat（SHR） model was used，and the rats were divided into model group，low concentration group，high concentration group and Western medicine group，and Wistar-Kyoto（WKY） rats of the same age were used as control group，with 6 rats in each group.After 12 weeks of intervention，the cardiac function was monitored，and systolic function index such as left ventricular ejection fraction（LVEF），left ventricular short axis shortening rate（LVFS），and diastolic function index（early diastolic blood flow velocity（E） and mitral ring motion amplitude（E′） were calculated.After 12 weeks of intervention，the rats were executed，the left ventricular myocardial tissue was extracted，and the total area of collagen fibers in the myocardium and the area of type Ⅰ collagen and type Ⅲ collagen were observed by picrate scarlet staining，and the ratio of the two collagen areas was calculated.Western Blot analysis was performed to detect the fibrination-related indexes type Ⅰ collagen，type Ⅲ collagen，matrix metalloproteinase 9（MMP-9），matrix metalloproteinase inhibitor 1（TIMP-1），endothelial-mesenchymal transition（EndMT）-associated platelet-vascular endothelial adhesion molecule（CD31），vascular endothelial-calcium-adhesion protein（VE-Cadherin），α-smooth muscle actin（α-SMA），human fibroblast specific protein 1（FSP1）.The mRNA levels of CD31，VE-Cadherin，α-SMA and FSP1 of EndMT were detected by Real-time fluorescence quantification（qPCR）.Result：After 12 weeks of intervention，compared with the control group，the expression of MMP-9 protein of myocardial tissue deceased in the traditional Chinese medicine group（P＜0.05），the levels of myocardial interstitial type Ⅰ collagen and type Ⅲ collagen deceased（P＜0.01），the diastolic function E/E′ of rat heart improved（P＜0.01），and the protein levels of EndMT-related proteins α-SMA，FSP1 and the mRNA levels of VE-Cadherin，α-SMA mRNA deceased（P＜0.05 or P＜0.01）.Conclusion：Qishen Liuwei Formula could reduce the degree of myocardial fibrosis and improve the diastolic function in SHR rats，and its mechanism might be related to the inhibition of EndMT.

Keywords hypertension; Qishen Liuwei Formula; myocardial fibrosis; endothelium-mesenchymal transition; mechanism; qi and blood; experimental study

基金项目 国家自然科学基金面上项目（No.81874385）

作者单位 1.北京中医药大学（北京100029）；2.北京市宣武中医医院；3.北京中医药大学东直门医院；4.北京中医药大学第三附属医院；5.浙江大学医学院附属邵逸夫医院新疆兵团阿拉尔医院；6.北京中医药大学东方医院（北京100078）

通讯作者 周鹍，E-mail：dfzhk@126.com

引用信息 黄丽君，董菲，高群，等.芪参六味方抑制内皮-间质转化改善自发性高血压大鼠心肌纤维化的作用机制［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2024，22（3）：452-458.

我国高血压患病率仍呈上升趋势，据报道，截至2018年我国成人高血压患病率为27.5%^［1］。高血压起病大多隐匿，检出时可能已合并有心、脑、肾、血管等靶器官损害，严重影响病人预后，且造成沉重的社会经济负担，因此，在加强血压管理的同时，干预高血压引起的靶器官损害十分必要。心肌纤维化是高血压引起的心脏损害的常见病理表现形式，与心脏重构有着本质联系，严重影响心脏弹性，是高血压发展至心脏舒张功能障碍甚至是舒张性心力衰竭的必经病理环节^［2-3］。心脏间质中过度沉积的细胞外基质（extracellular matrixc，ECM）是心肌纤维化的物质基础，其主要成分由心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts，CFBs）分泌，而内皮-间质转化（endothelial-mesenchymal transition，EndMT）是CFBs的重要来源^［4］。所以抑制EndMT，从而减少CFBs和ECM数量，是抑制心肌纤维化的重要途径，有利于保护正常心肌结构，改善心脏功能，延缓心血管疾病进展。然而目前并无特定的抗纤维化治疗方法，中医药治疗成为一种新思路。

芪参六味方是基于中医气血理论并结合心肌纤维化中医病机所创，具有益气活血、补益肝肾的功效。有研究团队前期通过横断面调查证实，高血压与心脏舒张功能减低紧密相关，且气虚血瘀证是高血压舒张功能障碍病人的常见证型^［5］。通过随机对照试验证明了芪参六味方可以改善高血压病人的心脏舒张功能^［6］，动物实验证明了方中组成药物可以通过改善心肌细胞内钙循环从根本上改善心脏舒张功能并逆转心室重塑^［7］。本研究旨在进一步探讨芪参六味方是否通过抑制EndMT改善心肌纤维化，从而发挥改善心脏舒张功能的作用，为临床干预心肌纤维化提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

20周龄雄性自发性高血压大鼠（SHR）24只，同龄雄性Wistar-Kyoto（WKY）大鼠6只，无特定病原体（SPF）级，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK（京）2012-0001。饲养于北京中医药大学东直门医院医学实验中心SPF级动物房，恒温恒湿，大鼠专用无菌饲料喂养，自由进食和饮水。适应性喂养1周后开始实验。本动物研究方案已经北京中医药大学东方医院伦理委员会批准，动物研究内容及过程均符合国家对动物实验的要求。

1.2 实验药物

芪参六味方配方颗粒，原方饮片组成：生黄芪30 g，丹参30 g，熟地黄15 g，三七10 g，川芎30 g，山茱萸10 g，茯苓10 g，泽泻15 g，夏枯草10 g，益母草15 g，葛根30 g。按原方比例配制颗粒剂，购自北京康仁堂公司，临用使用无菌蒸馏水溶解。氯沙坦钾片（规格：每片50 mg，1盒7片，Merck Sharp Dohme Limited公司生产，批号：J20180054）临用研磨并使用无菌蒸馏水溶解。

1.3 主要试剂与仪器

RIPA裂解液（北京索莱宝生物科技有限公司，批号：R0020）、30%丙烯酰胺（北京索莱宝生物科技有限公司，批号：A1010）、1 mol Tris-HCL（pH 6.8）（北京索莱宝生物科技有限公司，批号：T1020）、1.5 mol Tris-HCL（pH 8.8）（北京索莱宝生物科技有限公司，批号：T1010）、4×蛋白上样缓冲液（北京索莱宝生物科技有限公司，型号：P1016）、实时荧光定量（PCR）引物（北京Invitrogen公司）、预染蛋白marker（美国thermo公司，批号：26616）、聚偏乙烯（PVDF）膜（美国MILLPORE公司，批号：IPVH00010）、天狼星红染色试剂盒、增强型化学发光（ECL）试剂盒（南京诺唯赞生物科技有限公司，批号：E411-04）、一抗GAPDH（美国bioworld公司，批号：AP0063）、二抗（美国KPL公司，批号：074-1506）。

小动物超声心动检测仪（美国Visual Sonics公司，型号：Vevo770）、 QL-902型号涡旋振荡仪（海门市其林贝尔仪器制造有限公司，型号：QL-902）、离心机（德国Eppendorf公司，型号：Centrifuge 5415D）、分光光度计（美国Therno scientific公司，型号：NANODROP 2000）、凝胶成像系统（上海天能科技有限公司，型号：Tanon 1600）、荧光定量PCR仪（美国Applied Biosystems公司，型号：ABI7500）；电泳仪、垂直电泳槽、转移槽（北京六一仪器厂）。

1.4 分组及给药

适应性喂养1周后，将24只SHR大鼠随机分为模型组、中药低浓度组、中药高浓度组、西药组，每组6只，6只WKY大鼠作为对照组。各组给予相应药液灌胃12周。模型组与对照组给予无菌蒸馏水；中药低浓度组给予相当于生药量17.08 g/（kg·d）的配方颗粒溶液（相当于临床剂量的一半）；中药高浓度组给予相当于生药量34.16 g/（kg·d）的配方颗粒溶液（相当于临床剂量）；西药组给予氯沙坦钾片8.33 mg/（kg·d）（相当于临床剂量50 mg/d）。

1.5 超声心动检测

给药12周后，将大鼠脱毛，使用2%异氟烷麻醉大鼠，控制大鼠心室率在300～350次/min，然后使用Vevo770型小动物超声心动检测仪采集相关指标。将探头置于大鼠胸骨旁短轴切面乳头肌水平，测量左心室舒张末期内径与左心室收缩末期内径，计算左室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）与左室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening，LVFS）；然后切换到心尖四腔心切面，将取样容积置于二尖瓣瓣口，测量舒张早期跨二尖瓣血流速度（E）与舒张早期二尖瓣环运动幅度（E′），并计算E/E′值，每个参数重复测量3次取平均值。

1.6 左室心肌组织病理形态

颈椎脱臼处死大鼠后迅速取出大鼠心脏，分离出完整左心室冻存备用。取冻存的心肌组织，于4%甲醛溶液中浸泡固定48 h后，使用石蜡包埋切片，选取合格的切片进行苦味酸-天狼猩红染色。在普通光学显微镜下观察切片中呈红色的胶原纤维含量及分布；在偏光显微镜下观察Ⅰ型胶原与Ⅲ型胶原各自的含量及分布，利用Image-pro Plus 6.0图像分析软件分别测量两种胶原纤维的面积，并计算Ⅰ型胶原/Ⅲ型胶原面积比值。

1.7 蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测心肌组织中相关蛋白的表达

RIPA裂解液提取心肌组织中总蛋白，制备十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），电泳；将蛋白转印至PVDF膜上，室温下封闭1 h，加入一抗工作液在4 ℃条件下反应过夜；酸性磷酸酶抗体（TBST）洗膜后加入二抗工作液，室温孵育1 h，再次洗膜；加入ECL发光液显影；UVP凝胶成像分析系统分析Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）与内皮-间质转化（EndMT）相关指标血小板-血管内皮黏附分子（CD31）、血管内皮钙黏蛋白（VE-Cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、人成纤维细胞特异蛋白1（FSP1）条带的灰度值。

1.8 实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-PCR）检测心肌组织中EndMT相关mRNA的表达

取冻存的大鼠左心室心肌组织，按照Trizol试剂说明书提取心肌组织中的总RNA，用分光光度计检测纯度及含量；参照Real-Time PCR试剂盒说明书进行逆转录反应，得到逆转录产物cDNA，加入相应引物进行扩增；将所有扩增后的cDNA样品分别配置RT-PCR反应体系进行PCR反应；采用2^{－△△ Ct}法分析CD31、VE-Cadherin、α-SMA、FSP1 mRNA的表达。

1.9 统计学处理

采用IBM SPSS Statistics 25.0软件进行数据统计分析。实验所涉及心功能指标、Ⅰ型/Ⅲ型胶原面积比值、纤维化相关蛋白相对表达水平、EndMT相关蛋白及mRNA相对表达水平等符合正态分布的定量资料以均数±标准差（x^-±s）表示。经检验所有数据均符合正态分布，且均方差齐，故多组间比较采用ANOVA分析，组间两两比较用LSD法。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 对心功能的影响

给药12周后，各组LVEF比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。与对照组相比，模型组LVFS下降（P＜0.05）；与模型组相比，中药低浓度组、中药高浓度组、西药组LVFS比较差异均无统计学意义。与对照组相比，模型组大鼠E/E′明显升高（P＜0.05）；与模型组相比，中药低浓度组E/E′下降（P＜0.05），中药高浓度组、西药组E/E′ 明显下降（P＜0.01）。结果表明，SHR大鼠心脏收缩和舒张功能都有所减低，但以舒张功能减低为主，而芪参六味方可以改善SHR大鼠心脏舒张功能，给予高浓度时作用更显著。详见表1。

2.2 对心肌组织胶原纤维含量的影响

2.2.1 普通光镜下观察苦味酸-天狼星红染色切片

经苦味酸-天狼星红染色后胶原纤维在普通光镜下观察呈红色，心肌细胞呈黄色。对照组心肌间质中胶原纤维含量较少，且排列均匀；与对照组相比，模型组胶原纤维含量明显增多，且排列紊乱；与模型组相比，中药低浓度组、中药高浓度组、西药组胶原纤维含量均减少，分布较均匀，其中中药高浓度组胶原纤维含量最少。说明SHR大鼠心肌组织存在胶原纤维增多即纤维化现象，而芪参六味方可以改善其胶原纤维沉积，且高浓度作用更显著。详见图1。

2.2.2 偏光显微镜下观察Ⅰ型与Ⅲ型胶原分布并计算二者面积比值

在偏光显微镜下，可以清晰显示Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维，Ⅰ型胶原纤维排列紧密，呈橙黄色或亮红色，Ⅲ型胶原纤维呈绿色。对照组中胶原纤维含量较少，排列均匀；与对照组相比，模型组胶原纤维面积明显增大，以Ⅰ型胶原纤维为主；与模型组相比，中药低浓度组、中药高浓度组、西药组胶原纤维面积均减小。Ⅰ型与Ⅲ型胶原面积比值：与对照组相比，模型组比值显著增大（P＜0.05）；与模型组相比，中药高浓度组、西药组比值下降（P＜0.05），中药低浓度组差异无统计学意义。结果表明，高浓度芪参六味方可以减少SHR大鼠心肌组织中胶原纤维沉积，且以减少Ⅰ型胶原为主。详见图2及表2。

基于以上结果，芪参六味方高浓度组改善SHR大鼠心功能、减少胶原纤维沉积的作用明显优于低浓度组，故后续检测心肌组织中蛋白及mRNA表达时均保留芪参六味方高浓度组，舍弃低浓度组。

2.3 Western Blot法检测大鼠心肌组织中蛋白表达水平

2.3.1 心肌纤维化相关蛋白Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-9、TIMP-1的表达水平

ECM降解与沉积的动态平衡主要由基质金属蛋白酶（MMPs）及基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）共同调节，二者比例失调则会促进心肌纤维化。与对照组相比，模型组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达量显著增加（P＜0.05）；与模型组相比，中药高浓度组与西药组Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原表达量均显著下降（P＜0.01）。与对照组相比，模型组MMP-9表达量增加（P＜0.01），TIMP-1表达量降低（P＜0.05）；与模型组相比，中药高浓度组MMP-9表达量下降（P＜0.05），TIMP-1表达量差异无统计学意义，西药组MMP-9表达差异无统计学意义，TIMP-1表达量增加（P＜0.05）。结果表明，芪参六味方可以降低SHR大鼠心肌组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-9的表达，减轻心肌纤维化程度。详见图3及表3。

2.3.2 EndMT相关蛋白CD31、VE-Cadherin、α-SMA、FSP1表达水平

CD31、VE-Cadherin为内皮细胞特异性蛋白，α-SMA、FSP1为间质细胞特异性蛋白，EndMT表现为内皮细胞标志物减少，而间质细胞标志物表达增加。与对照组相比，模型组VE-Cadherin表达明显下降（P＜0.01），α-SMA、FSP1表达增加（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组相比，西药组VE-Cadherin表达增加（P＜0.05），中药高浓度组与西药组干预后α-SMA表达均下降（P＜0.05）、FSP1表达均显著下降（P＜0.01）；各组CD31表达量差异无统计学意义（P＞0.05）。结果表明，芪参六味方可以增加内皮细胞标志物表达，同时降低间质细胞标志物的表达，即抑制EndMT进程。详见图4及表4。

2.4 qRT-PCR法检测大鼠心肌组织EndMT相关蛋白mRNA表达水平

与对照组相比，模型组CD31与VE-Cadherin mRNA表达显著下降（P＜0.01）；与模型组相比，中药高浓度组与西药组VE-Cadherin mRNA表达显著增加（P＜0.01），而CD31 mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05），但中药高浓度组有增加趋势（P＝0.065）。与对照组相比，模型组α-SMA mRNA表达显著增加（P＜0.01），FSP1 mRNA表达增加（P＜0.05）；与模型组相比，中药高浓度组与西药组干预后α-SMA mRNA均显著下降（P＜0.01），西药组FSP1 mRNA表达下降（P＜0.05），中药高浓度组有下降趋势（P＝0.07）。结果表明，芪参六味方可以增加内皮细胞标志物mRNA的表达，降低间质细胞标志物mRNA表达，具有抑制EndMT的作用。详见表5。

3 讨 论

芪参六味方来源于临床治疗高血压的有效方剂补肾降压方，该方由经典名方六味地黄丸结合知名专家刘渡舟治疗高血压的三草汤^［8］化裁而来。目前普遍认为肝肾不足是高血压病的发病基础^［9］，而团队在前期研究中发现高血压合并舒张功能障碍病人常见气虚血瘀证^［5］，基于此，本团队通过随机对照试验证实了在补肾降压方的基础上加用生黄芪、三七、川芎等益气活血药物有利于改善病人的心脏舒张功能^［6］，且疗效优于单用补肾降压方^［10］，由此形成芪参六味方。中医理论认为气与血是构成人体和维持人体生命活动的两大基本物质，是人体生命活动能力的集中体现，二者相互依存，其中气起主导作用，《血证论》有言：“夫载气者，血也；而运血者，气也。人之生也，全赖乎气”。《素问》言：“心主身之血脉”，心气是推动血液循行的基本动力，心气的强弱在血液循行中起着十分关键的作用，心气虚者，常因运血无力，血行迟滞，而产生心脉瘀阻。血能载气，气存于血中，赖血之运载而达全身，若血行不畅，则反过来加重气虚。有学者认为气虚是心肌纤维化的始动因素，心肌纤维化形成的机制亦与中医“心气虚，无力鼓动气血”的病机相似^［11］。而研究表明，益气活血药可改善舒张性心力衰竭大鼠的心脏舒张功能，且重用益气药时疗效更佳^［7］。李辉等^［12］证实以益气活血、补肝温肾为主要功效的参鹿宁心汤可延缓顽固性心力衰竭病人的心肌重塑，与抑制心肌纤维化有关。

心肌纤维化可由心脏压力超负荷、心肌持续或反复缺血缺氧等导致，被称为反应性纤维化，表现为心脏间质和血管周围胶原增多，心肌僵硬度增加而顺应性下降^［13］。高血压可直接造成左心室代偿性向心性重构，心肌壁僵硬，心室容量减少，出现左心室在舒张期充盈受损、舒张末压增高，进而发生心力衰竭，心肌纤维化是该过程的病理基础^［14］。E/E′比值与舒张功能减退程度呈正相关，E/E′≥8提示存在舒张功能障碍^［15］。ECM是心肌纤维化的物质基础，Ⅰ型和Ⅲ型胶原构成心肌胶原网络的主要成分，Ⅰ型胶原决定心肌的硬度，Ⅲ型胶原决定心肌的弹性，心肌组织Ⅰ型与Ⅲ型胶原比值增加即说明出现纤维化趋势。ECM的降解主要由MMPs调节，TIMPs是MMPs的特异性抑制剂，二者比例失调可导致ECM代谢紊乱，促进心肌纤维化进程^［16］。ECM过度沉积由成纤维细胞介导，EndMT是人体募集成纤维细胞的重要途径，约有27%～33%的成纤维细胞来源于EndMT，压力负荷过重、缺氧等多种损伤因素可以诱导这一过程，从而增加成纤维细胞数量和ECM分泌^［4］。EndMT是一个复杂的内皮迁移过程，内皮细胞从内皮分离，并在不同程度上减少内皮特性而获得间充质特性，表现为内皮细胞标志物如CD31、VE-Cadherin减少，间质细胞标志物如FSP1、α-SMA增加^［17-18］。

抑制EndMT成为减轻心肌纤维化、保护心功能、延缓心血管疾病进程的重要途径，然而目前尚且缺乏有效的临床干预手段。本研究以20周龄SHR大鼠建立高血压心肌纤维化模型^［19］，通过实验证实，模型组大鼠较对照组E/E′ 升高、心肌组织中胶原面积扩大、Ⅰ型/Ⅲ型胶原面积比值增加，且Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-9蛋白相对表达量增加，提示模型组大鼠存在心肌纤维化；而心肌组织CD31蛋白表达、VE-Cadherin蛋白及mRNA表达减少，FSP1、α-SMA蛋白及mRNA表达增加，提示模型组大鼠存在EndMT。芪参六味方干预后，E/E′下降，胶原面积明显缩小，Ⅰ型/Ⅲ型胶原面积比值下降，而Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、MMP-9蛋白表达减少，证实该方可以降低心肌间质中胶原纤维含量并改变其成分占比，从而减轻心肌纤维化，改善心脏舒张功能；且芪参六味方可以增加VE-Cadherin蛋白及mRNA表达，而降低FSP1与α-SMA蛋白及mRNA表达，说明该方抑制EndMT作用明确。由此提出，芪参六味方具有抑制心肌纤维化、改善心脏舒张功能的作用，且作用机制可能与抑制EndMT有关。

4 小 结

综上所述，高血压造成的一系列靶器官损害是影响病人生存质量和预后的关键，其中以心脏损害首当其冲，而心肌纤维化是其主要表现形式。因此，延缓甚至逆转靶器官损伤是高血压治疗过程中不可缺少的一环，然而目前并无有效的干预措施。总结现有研究发现，气虚血瘀是高血压心肌纤维化的关键病机，芪参六味方具有益气活血化瘀、补益肝肾的功效，符合高血压心肌纤维化的中医病机。本研究立足于高血压心肌纤维化的基本中医病机，结合现代基础研究成果，从EndMT出发，证实了芪参六味方可以通过抑制EndMT，调整MMP-9与TIMP-1比例，减轻心肌间质中胶原纤维沉积，调整胶原成分占比，改善心肌纤维化，最终改善心脏功能、保护心脏结构，对高血压引发的心肌纤维化有良好的干预作用。

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（收稿日期：2022-11-11）

（本文编辑 王雅洁）