襄州地区10378例妇女人乳头瘤病毒感染状况分析

【摘要】 目的 调查襄阳市襄州区人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）患病率及亚型分布的地理特异性，为中国HPV地理变异特征积累数据。方法 收集襄阳市襄州区人民医院2017年5月4日—2021年5月4日的宫颈拭子标本10 378例，采用微阵列分型检测21种不同的HPV类型，分析襄阳市襄州区女性患者HPV感染特征。结果 19.73%的患者标本中检测到HPV，其中75.34%的患者为单一感染，24.66%为多重感染。样本中最常见感染亚型——HPV16占26.76%，HPV52和HPV58均占11.62%，HPV11占11.04%，样本中感染最多的为>50岁女性。结论 襄州区女性HPV感染以单一感染为主，其中高危型HPV16、HPV52、HPV58最为常见，>50岁女性感染率较高，并且具有一定的地域独特性。

【关键词】 人乳头状瘤病毒;宫颈癌;基因分型

文章编号：1672-1721（2024）05-0030-03     文献标志码：A     中国图书分类号：R737.33

宫颈癌（cervical cancer，CC）是全球妇女中第4常见的癌症，每年都有超过30万人死于该疾病，是导致妇女死亡的主要原因之一[1]。亚洲、大洋洲地区宫颈癌发病率占全世界病例的50%以上。宫颈癌是少数能够通过全面筛查癌前病变并进行后续治疗而预防的癌症之一[2]，大多数人HPV感染在临床上可自发清除。然而，在少数情况下，HPV感染会持续存在，可引起不同解剖部位的良性或恶性肿瘤[3]。全世界大约有2.91亿妇女是

HPV DNA携带者，HPV诱导的癌症通常发生在感染数年后[4]。恶性肿瘤往往由不同亚型的致癌或高危（high risk，HR）HPV类型引起[3]。流行病学研究表明，HPV与宫颈癌之间的联系紧密，独立于其他危险因素，具有一定的地理变异性[5]。对于癌前病变的检测，HPV DNA检测具有较高的敏感性，这种方法已成为宫颈癌筛查的首选方法[6]。HPV感染具有较强的区域性特点，不同国家和地区该病毒基因型的流行病学分布也不同[7]。本研究对襄阳市襄州区女性HPV感染情况进行调查分析，采用导流杂交技术对襄州区妇女21种高危型HPV进行检测，以了解襄州区妇女高危型HPV感染情况，比较分析单一型别感染率及多重型别感染率等情况，为HPV感染地域特异性研究积累资料。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集襄阳市襄州区人民医院检验科2017年5月4日—2021年5月4日宫颈拭子标本共10 378例，患者年龄18～77岁，均来自襄州及其周边地区，样本一定程度上可代表襄州区HPV的感染地域特征。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂

主要试剂：细胞裂解液（分离法）试剂盒（美国西格玛），HPV基因微阵列分型检测试剂盒（广东凯普）。

主要儀器：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增仪（美国ABI公司），Hybribio医用核酸分子快速杂交仪（广东凯普），高速低温离心机（美国Bio-Rad公司）。

1.2.2 检测方法

（1）目的DNA片段的PCR扩增。PCR反应体系（25 μL）为10×Ex Buffer（2.5 μL），2.5 mM dNTP（2 μL），上、下游引物（各0.5 μL），Ex-Taq polymerase（0.2 μL），cDNA模板（0.5），ddH2O（up to 25 μL）。反应条件为95 ℃9 min，40个循环（95 ℃ 20 s、55 ℃ 30 s、72 ℃ 30 s），72 ℃ 5 min。（2）微阵列分型检测HPV DNA亚型。采用导流杂交技术对21种HPV基因型进行分型检测，包括6种低危型和15种高危型。高危型包括16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、53型、56型、58型、59型、66型、68型，低危型包括6型、11型、42型、43型、44型、CP3408型。具体实验步骤参照试剂盒说明书进行，主要包括样品采集及保存、DNA分离提取、PCR扩增、杂交前准备、PCR杂交、显色过程。

2 结果

2.1 HPV感染总体情况

所有检测患者中，HPV阳性感染总数为2 048例，占总人数的19.73%，其中单一感染患者1 543例，占总感染的75.34%，多重感染患者505例，占总感染的24.66%。单一感染和多重感染的阳性结果参照说明书（蓝色斑点为阳性，黑色斑点为阳性对照，灰色斑点为阴性对照）。HPV阳性率具有明显的年龄段差异，50岁以上女性HPV感染患者1 074例，占总感染的52.44%，其次为20岁以下妇女HPV感染患者487例，占总感染的23.78%。

2.2 HPV亚型感染分布

阳性患者中，共检测出15种HPV高危型和5种低危型亚型，样本中最常见感染亚型——HPV16共548例，阳性率为26.76%（548/2 048），HPV52和HPV58各有238例，阳性率均为11.62%（238/2 048）。样本中最常见低危亚型——HPV11有226例，阳性率为11.04%（226/2 048），CP8304有86例，阳性率为4.20%（86/2 048），未检测出43型，见图1。

2.3 HPV单一亚型及多重亚型感染分布

单一亚型感染患者比率超过10%的有4种——16型（364例）、52型（187例）、58型（177例）、11型（166例），所占比率分别为23.59%（364/1 543）、12.12%（187/1 543）、11.47%（177/1 543）、10.76%（166/1 543），见图2，与HPV亚型分布检测结果中感染最多的4种亚型趋势一致。

多重亚型感染患者中，占比最高的为HPV11+HPV16感染，有57例，占多重感染的11.29%（57/505），其次是HPV52+HPV58，有38例，占多重感染的7.52%（38/505），见表1。

3 讨论

尽管有广泛的筛查项目，宫颈癌仍然是发展中国家第三大最常见的癌症。参与HPV筛查项目可提高对癌前病变的检测，大大降低宫颈癌病死率[8]。本研究中共检测了10 378例样本，阳性病例有2 048例，阳性率为19.73%，高于深圳罗湖区（12.62%）[9]、沈阳（13.91%）[10]阳性检出率，低于上海长宁地区（24.61%）[11]、江西宜春地区（28.30%）[12]、贵阳地区（28.81%）[13]阳性检出率，与泉州市泉港区（19.99%）[14]、宁夏银川地区（18.73%）[15]阳性感染率接近。这表明，HPV感染具有显著的地区分布差异，各地区可根据其HPV感染分布特点制定相应的预防或筛查措施。

年龄是导致HPV感染及宫颈癌发生的相关因素。本研究中襄州地区50岁以上妇女阳性检测率最高，其次为20岁以下妇女，感染年龄分布两端高、中间低。而深圳罗湖區25岁以下女性HPV感染阳性率最高，呈显著年轻化趋势。现代社会年轻人思想开放，初次性生活年龄提前，而50岁以上妇女大部分处于绝经期或已经绝经，机体免疫功能降低，病毒抵抗力下降[16]，提示加强两端年龄女性HPV筛查，可有效提高宫颈癌的发现概率。

低危型HPV一般会引起如尖锐湿疣等良性病变，高危型HPV则会引起宫颈癌等恶性疾病。HPV DNA感染亚型国内外存在较大差异，在我国不同地区亦存在差异。深圳罗湖区、泉州泉港区高危HPV感染亚型主要有52型、16型、58型，上海长宁地区感染亚型主要有52型、53型、53型。本研究中襄州地区感染亚型最多的是16型、52型、58型，与深圳罗湖区和泉州泉港区相近。低危型HPV感染亚型地域差异更加明显，沈阳地区6型、11型、14型最多，上海长宁最多的是81型、43型、42型，泉州泉港区低危感染亚型最多的是42型、43型、6型。本研究中襄州地区低危感染亚型最多的是11型、CP8304型。从上述资料来看，各地区高危型感染率最高的常见16型，地域差异性不明显，其他型的高危和低危亚型均存在较大的地域差异。多重感染的类型较多，贵阳地区最常见52型、51型多重感染型，本研究中襄州地区多重感染最常见11型、16型，存在较大的地区差异性。襄州地区多重感染率为4.87%（505/10 378），比沈阳地区（2.46%）高，比贵阳地区（8.54%）低。

综上所述，HPV感染亚型具有一定的地域差异性，早期、定期进行HPV分型检测，有助于对生殖系统良性病变和癌变做出可能性预测。

参考文献

[1] WARD Z J，GROVER S，SCOTT A M，et al.The role and contribution of treatment and imaging modalities in global cervical cancer managementf survival estimates from a simulation-based analysis[J].Lancet Oncol，2020，21（8）：1089-1098.

[2] GARLAND S M，BHATLA N，NGAN H Y S.Cervical cancer burden and prevention strategies：asia oceania perspective[J].Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2012，21（9）：1414-1422.

[3] PRIGGE E S，DOEBERITZ M V K，REUSCHENBACH M.Clinical relevance and implications of HPV-induced neoplasia in different anatomical locations[J].Mutat Res Rev Mutat Res，2017，772：51-66.

[4] SOOHOO M，BLAS M，BYRAIAH G，et al.Cervical HPV infection in female sex workers：a global perspective[J].Open AIDS J，2013，7：58-66.

[5] BOSCH F X，MANOS M M，MU?OZ N，et al.Prevalence of human papillomavirus in cervical cancer：a worldwide perspective.International biological study on cervical cancer（IBSCC）study group[J].J Natl Cancer Inst， 1995，87（11）：796-802.

[6] SALIMOVI-BE?I I，TOMI-IA A，HUKIM.Genotyping test based on viral DNA，RNA or both as a management option for high-risk human papillomavirus positive women：a cross sectional study[J].Med Glas（Zenica），2019，16（2）：1030.

[7] HOFFMAN S R，LE T，LOCKHART A，et al.Patterns of persistent HPV infection after treatment for cervical intraepithelial neoplasia（CIN）：a systematic review[J].Int J Cancer，2017，141（1）：8-23.

[8] TSIKOURAS P，ZERVOUDIS S，MANAV B，et al.Cervical cancer：screening，diagnosis and staging[J].J BUON，2016，21（2）：320-325.

[9] 何文凤，王莉辉，曾红燕，等.深圳市罗湖区女性HPV感染分布特点及类型特征分析[J].中国实验诊断学，2021，25（8）：1172-1176.

[10] 李翔，马宁耶，张瑶.4万余例沈阳地区妇女HPV感染情况分析[J].现代肿瘤医学，2022，30（5）：884-887.

[11] 侯雅萍，骆莺，吴磊，等.上海长宁地区58 217例女性宫颈HPV感染情况及基因亚型分布研究[J].中国社区医师，2022，38（7）：92-94.

[12] 朱小燕，刘梦姮，徐文群.宜春市2 194例妇女人乳头瘤病毒感染情况分析[J].实验与检验医学，2021，39（2）：460-462，478.

[13] 杨丹，韩然，罗振元，等.贵阳地区5 151例医院就诊女性HPV感染亚型分析[J].国际检验医学杂志，2019，40（23）：2827-2831.

[14] 陈冰.泉州市泉港区6 367例女性宫颈人乳头瘤病毒筛查结果分析[J].中国妇幼保健，2021，36（17）：4049-4051.

[15] 张宁娟，白利平，陈家乐.银川地区2 532例HPV分型定量检测结果分析[J].中国妇幼保健，2021，36（1）：4153-4155.

[16] 涂权梅，邱海凡，刘奕，等.人乳头瘤病毒检测筛查早期宫颈癌的意义：妇科门诊3 700例人乳头瘤病毒筛查分析[J].中国全科医学，2010，13（5）：1611-1612.

（编辑：郭晓添）

作者简介：周晓珊，女，硕士，主管技师。