CMIA 法和ELISA 法诊断HBV 感染准确率的对比研究

赵晨李萌 戚润鹏

（1. 河南中医药大学第五临床医学院，河南 郑州 450000；2. 郑州人民医院检验科，河南 郑州 450000）

乙型肝炎简称乙肝，是由乙型肝炎病毒（HBV）持续感染的肝脏慢性疾病。据调查结果显示，我国约有9300 万人携带HBV，感染者达7000 万，这也是近年肝癌、肝硬化、肝功能衰竭等疾病发病率较高的原因之一[1]。乙型肝炎具有病程迁延、预后差、难治愈等特点，HBV 感染已成为全球范围内亟待解决的公共卫生问题[2]。HBV 经血液、体液等途径传播，HBV感染患者早期症状不易被察觉，极易导致漏诊。及早对HBV 感染患者确诊，并及时采取有效治疗减轻病情发展，可明显改善预后。

HBV 常用血清标志物为乙肝五项，即乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（HBsAb）、乙肝e 抗体（HBeAb）、乙肝e 抗原（HBeAg）、乙肝核心抗体（HBcAb）。临床通常采取酶联免疫吸附法（ELISA）对其进行检测，ELISA 法具有操作简单、快速等特点，但结果易受环境影响，造成准确率降低[3]。近年来随着检测技术的不断发展，化学发光微粒子免疫法（CMIA）结合免疫发光系统、免疫反应，利用化学发光标记的抗体、抗原，定量检测抗原、抗体，在乙肝五项检测中具有较好的应用价值[4]。为此，笔者收集我院86 例HBV 感染患者血清标本，主要分析CMIA 法、ELISA 法对患者乙肝五项诊断准确率的影响。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取我院2020 年5 月至2022 年4 月就诊的85 例HBV 感染患者，其中女性32 例，男性53例；年龄21~56 岁，平均39.17±5.88 岁；体质量指数19.0~26.5 kg·m-2，平均22.52±1.33 kg·m-2。纳入标准：均符合乙型肝炎诊断标准[5]：HBsAg 阳性超过6 m 以上或既往有乙型肝炎病史，现在HBsAg 或（和）HBV DNA 仍为阳性；患者出现不同程度肝脏肿大、腹水、恶心呕吐等症状；未接受抗病毒相关治疗。排除标准：妊娠期或哺乳期女性；精神疾病、沟通、语言、认知障碍者；严重脑、心、肝、肾等器官衰竭；造血系统疾病；恶性肿瘤；艾滋病感染；免疫功能异常；结缔组织病。本研究已获得本院伦理委员会批准同意，患者均签署知情同意书。

1.2 检测方法

采集患者清晨空腹静脉血3~5 mL，3000 r·min-1离心10 min，收集上清液，置于-20℃冰箱保存，分别采用CMIA 法、ELISA 法检测HBsAb、HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb 浓度，并在当天内检测完毕。

CMIA 法：使用美国雅培Axsym 全自动微粒子酶免疫化学发光仪检测，试剂盒由郑州安图公司提供，操作步骤严格按照操作试剂盒进行。

ELISA 法：使用美国贝克曼UniCel-DxI-800 化学发光免疫分析仪进行检测，试剂盒由上海科华生物公司提供，操作步骤严格按照操作试剂盒进行。

1.3 评估标准

CMIA 法阳性判定标准：HBsAb＞10 m IU·mL-1，HBcAb＞0.15 PEI U·mL-1，HBeAb＞1 PEI U·mL-1，HBsAg＞0.05 IU·mL-1，HBeAg＞0.1 PEI U·mL-1。

ELISA 法阳性判定标准：HBsAg 检测值＞0.05 IU·mL-1，即为阳性；用标本OD 值/临界OD 值比值（S/CO）测定，HBsAg、HBsAb、HBeAg＞1 S/CO，HBeAb、HBcAb＜1 S/CO。

1.4 观察指标

1.4.1 两种方法检测的准确率比较

1.4.2 两种方法血清学标志物检测结果阳性率比较

1.4.3 CMIA 法检测HBsAb、HBsAg 回收率分析

将收集ELISA 法HBsAb、HBsAg 高值血清（H）、低值血清（L），按5 L、4 L+1H、3 L+2H、2 L+3H、l L+4H、5H 梯度进行混合，以X 表示各标本预期值（理论值），以Y 表示各标本的实测值，定量标准溶液各200 μL，放入相应试管内，取1 分HBsAb、HBsAg阳性血清加入已知浓度试管内，用CMIA 法进行检测，重复3 次取平均值，即实测值；ELISA 法检测HBsAb、HBsAg 高值血清标本进行3 次重复测定，取均值作为实验理论值。回收率=各浓度实测值/理论值×100%。

1.5 统计学分析

采用Excel 2019 软件录入数据，用统计学软件SPSS 25.0 处理数据；计数资料用n（%）表示，用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CMIA 法、ELISA 法检测HBV 感染的准确率

经CMIA 法检测发现，确诊例数82 例，诊断准确率为96.47%；经ELISA 法检测，确诊例数73 例，诊断准确率为85.88%，CMIA 法诊断准确率高于ELISA 法（P＜0.05）。

2.2 CMIA 法、ELISA 法血清学标志物检测结果分析

CMIA 法检测HBsAg、HBeAb、HBcAb 阳性率高于ELISA 法（P＜0.05）；CMIA 法、ELISA 法检测HBsAb、HBeAg 阳性率比较，差异无统计学意义。见表1。

表1 CMIA 法、ELISA 法血清学标志物检测结果分析（n（%），n=85）

2.3 CMIA 法检测HBsAb、HBsAg 回收率

HBsAg 平均回收率为97.87%（94.16%~99.71%），HBsAb 平均回收率为98.11%（96.68%~99.54%）。见表2、表3。

表2 不同浓度HBsAg 回收率

表3 不同浓度HBsAb 回收率

3 讨论

乙型肝炎是常见传染性疾病，HBV 感染是导致肝癌发生主要危险因素，约占肝癌患者的80%[6]。研究发现，长期HBV 感染患者后期发展为肝癌、肝硬化等肝脏疾病概率远高于健康人群，严重时可危及患者生命[7]。临床通过检测血清学标志物诊断HBV 感染情况，常用血清学标志物为乙肝五项，HBsAg 是乙肝病毒的外壳物质，自身没有传染性，人体通常在HBV 感染后2~6 m 后，可在血液中检测出大量HBsAg，这是感染HBV 特异性标志[8]。HBsAb 是HBV感染恢复期最早出现的特异性抗体，主要由HBsAg诱导产生，高浓度HBsAb 可及时清除体内HBV，是HBV 的免疫和保护性抗体[9]。HBeAg 可在HBV 感染后被检测出，是一种传染性的指标，HBeAg 检出率上升提示肝细胞严重损伤，导致患者HBV 传染性较强[10]。HBeAb是HBeAg 刺激产生的一种蛋白质，HBeAb阳性表示病毒传染性降低，此时人体处于恢复阶段[11]。HBcAb 是乙肝核心抗体，一般在表面抗原出现后4 w 左右形成，是比较敏感的血清学标志物[12]。ELISA法是检测HBV 血清学标志物常用方法，具有灵敏、简单快速、稳定等特点，可用于免疫反应定量、定性检测，但该检测方法可能出现HBsAg假阳性现象[13-14]。CMIA法是在放射免疫分析法、ELISA法基础上改进的一种检测方法，通过微粒子扩大抗体与待测抗原结合，结合化学发光系统、免疫反应等抗体或抗原反应。有研究发现，与ELISA 法相比，CMIA 法不仅具有特异性强、用样少、灵敏度高，还具有操作简便、反应时间短等特点[15]。本研究显示，CMIA 法检测HBV 感染的诊断准确率 96.47%高于 ELISA 法85.88%，HBsAg 平均回收率为97.87%，HBsAb 平均回收率为98.11%，表明CMIA 法用于检测患者血清学标志物水平准确率、精密度、回收率较高，与张楠研究相似[16]。可能是因为CMIA 法全自动化设备、操作步骤简便，可减少因检测环境等对结果的影响，从而提高检测准确度。此外，CMIA 法检测HBsAg、HBeAb、HBcAb 阳性率高于ELISA 法，HBsAb、HBeAg 阳性率比较无明显差异，表明应用CMIA 法用于检测HBV 感染患者血清学标志物水平具有较高诊断价值。综上所述，应用CMIA 法、ELISA 法检测HBV 感染患者具有一定诊断价值，其中用CMIA 法检测HBV 感染患者血清学标志物水平准确率、回收率较高，具有较高的临床应用价值。