高灵敏度HBV DNA检测在乙型肝炎相关性肝细胞肝癌中的临床应用价值研究

钟欢妹，何玉花，陈丹娜，梁成结

1广州医科大学附属第四医院，广州 511300；2广州医科大学药学院，广州 511495

肝细胞肝癌（HCC）是常见的一种恶性肿瘤，流行病学显示，肝癌在我国所有恶性肿瘤中居于第四位，而其病死率居第二位[1]。中年男性是此病的高发人群，约有85%的HCC 患者的发病是持续感染乙型肝炎病毒（HBV）导致，有研究指出，导致HCC 的独立危险因素就是HBV DNA，其载量和发病率之间呈正相关性[2]。近几年，临床中广泛应用核苷类抗HBV 的药物，增加了患者HBV DNA 的阴转率[3]。但普通荧光探针法是临床中常用的对HBV DNA 进行检测的方法，相对来讲灵敏度较低，在低病毒载量的患者中假阴性出现率较高，无法为临床的判定和治疗提供依据[4]。高灵敏度HBV DNA 检测具有较高的特异度、灵敏性，能更好地明确低病毒载量患者的HBV DNA复制情况[5]。本文主要分析乙型肝炎相关性HCC 应用高灵敏度HBV DNA 检测的价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2020 年1 月至2022 年5 月于我院经普通荧光探针法检测HBV DNA 水平持续低于1000 IU/ml 的乙型肝炎相关性肝细胞肝癌患者60 例，年龄43～79 岁，平均（56.75±3.64）岁，女7 例，男53 例。纳入标准：确诊为乙型肝炎相关性HCC；获得伦理会批准；患者、家属签订知情同意书。排除标准：有精神病史；存在其他原因导致的肝病，例如病毒性或酒精性肝病。

1.2 方法 所有入选患者均通过高灵敏度HBV DNA进行检测，选用进口的HBV DNA 定量试剂以及全自动核酸扩增仪进行检测，参考范围小于10 IU/ml；通过进口的生化仪对肝功能指标进行监测，主要包含γ-GT（γ-谷氨酰转肽酶）和ALT（丙氨酸转氨酶）。普通荧光探针法PCR 检测应用的试剂盒提供方为中山大学达安基因股份有限公司，参考范围小于1000 IU/ml。

1.3 统计学分析 应用SPSS 20.0 分析数据，其中计数资料以率（%）表示，进行χ2检验，计量资料以±s表示，进行t检测，P＜0.05 提示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 高灵敏度HBV DNA 水平和抗病毒治疗、肝硬化发生情况分析 60 例患者中检出46 例高灵敏度HBV DNA ＞10 IU/ml 的患者（HBV DNA 阳性组），其 中31 例＜100 IU/ml 者，15 例＞100 IU/ml 者；14 例HBV DNA ＜10 IU/ml 者（HBV DNA 阴 性组），HBV DNA 阳性组发生肝硬化的概率（82.61%，38/46）比HBV DNA 阴性组（50.00%，7/14）高；阴性组癌变前进行抗HBV 药物治疗患者占比（45.45%，10/22）比癌变前未进行抗HBV 药物治疗的患者占比（10.53%，4/38）高（P＜0.05），见表1。

表1 高灵敏度HBV DNA水平和抗病毒治疗、肝硬化发生情况分析 [例（%），60例]

2.2 HBV DNA 水平和肝功能指标分析 γ-GT、ALT正常组患者的HBV DNA 阳性率低于γ-GT、ALT 异常组（P＜0.05），见表2。

表2 HBV DNA水平和肝功能指标分析

3 讨论

依据肝癌的组织学类型可以将其分为混合性肝癌、肝细胞癌以及胆管细胞癌三种，其中最常见的就是肝细胞肝癌，在原发性癌中占90%以上，具有较高的病死率，在全球范围内均属于较为常见的一种恶性肿瘤[6-7]。糖尿病、遗传、肥胖、表观遗传改变、吸烟、慢性乙型肝炎、黄曲霉素毒素暴露、丙型肝炎病毒感染等是主要的导致肝细胞肝癌发生的危险因素，患者预后相对较差，具有较高的转移率和复发率[8-9]。临床中多通过抗病毒药物进行HBV 治疗，而最主要的对患者预后进行判断的指标就是HBV DNA 检测，国内相关指南建议，如果临床检验中存在HBV DNA，就代表患者仍需要继续进行抗HBV治疗[10]。目前临床中常用的对HBV DNA 进行检测的方法为普通荧光探针法HBV DNA 定量PCR 检测，其下限检测范围小于1000 IU/ml，因此假阴性出现率较高，无法准确的为临床的判定、治疗提供依据，严重的会延误患者的最佳治疗时间，导致病情加重[11-12]。

高灵敏度HBV DNA 检测具有较高的特异度、准确性和灵敏性[13]。目前较多慢乙肝防治指南中均设定了HBVDNA 的检测下限，并以此对抗病毒疗效评价、治疗终点建议评估进行指导，其中EASL（欧洲肝脏研究协会）2017 年设定HBV DNA 下限小于10 IU/ml[14]。本结果显示：60 例患者中检出46 例高灵敏度HBV DNA ＞10 IU/ml 的患者（HBV DNA 阳性组），其中31例＜100 IU/ml者，15例＞100 IU/ml者；14 例HBV DNA ＜10 IU/ml 者（HBV DNA 阴性组）。临床中较容易忽视乙型病毒性肝炎HBV DNA 低水平复制的患者，因此不利于其治疗方案的及时调整和预后判断[15]。高灵敏度HBV DNA 检测对患者的病情监测有利，可以保证及时对患者的抗HBV 治疗方案进行准确的调整，避免肝脏损伤继续发展的同时降低发生肝细胞肝癌的概率[16]。

相关研究指出，γ-GT 和ALT 和HBV DNA 水平之间存在相关性[17]。本结果发现，γ-GT、ALT 正常组患者的HBV DNA 阳性率低于γ-GT、ALT 异常组（P＜0.05）。由此可见HBV DNA 高水平复制的肝细胞肝癌患者其可能存在更明显肝脏损害，而积极给予患者抗HBV 治疗不仅可以控制患者的肝脏炎症情况，还可以降低发生肝细胞肝癌的发生率[18]。高灵敏度HBV DNA 检测的应用不仅可以更加准确的对病毒复制情况进行判断，还可以帮助临床及时对治疗方案进行调整，另外有利于准确的对病情进行监测、对预后进行判断，和普通荧光探针法检测方法相比临床指导意义更大[19]。临床中在给予患者普通荧光探针检测之后，依据患者的病情、其他实验室数据进一步进行高灵敏度HBVDNA 检测，以此提高患者治疗的准确性、有效性，达到改善患者预后的目的[20]。

综上所述，持续复制的乙型肝炎病毒是导致乙型肝炎相关性肝细胞肝癌发生的关键因素，相较于普通的荧光探针法HBV DNA 检测，高灵敏度HBV DNA检测效果更佳，能为临床提供一定的指导意义。