抗核抗体联合T淋巴细胞亚群检测对复发性流产妊娠结局的预测价值
2024-04-04钟凯李嵛冉崔园英李文忠
钟凯 李嵛冉 崔园英 李文忠
【摘要】 目的：探究抗核抗體（ANA）联合T淋巴细胞亚群检测对复发性流产（RSA）妊娠结局的预测价值。方法：选择2020年2月—2022年7月赣州市妇幼保健院收治的50例RSA患者入研究组，另选择50例同期于本院行产前检查的正常妊娠孕妇入对照组。采集所有参检者清晨空腹肘静脉血5 mL，检测ANA、T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+、CD16+CD56+）水平，并计算CD4+/CD8+值。结果：研究组29例患者于孕10周前发生流产，流产率为58.00%（29/50）；对照组于孕10周前发生流产共13例，流产率为26.00%（13/50），两组流产率对比，差异有统计学意义（字2=10.509，P=0.001）。相比于对照组，研究组ANA阳性检出率较高，CD4+、CD16+CD56+、CD4+/CD8+水平均较高，CD8+水平较低，差异均有统计学意义（P<0.05）。联合检测在RSA中的预测价值最高，AUC为0.872，敏感度为0.875，特异度为0.393，其次为CD16+CD56+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、ANA。结论：ANA联合T淋巴细胞亚群检测在RSA诊断中应用价值较高，能够有效预测RSA发生风险，为临床尽早干预提供可靠的参考。
【关键词】 复发性流产 抗核抗体 T淋巴细胞亚群 妊娠结局
The Predictive Value of Combined Detection of Anti Nuclear Antibodies and T Lymphocyte Subsets for Recurrent Miscarriage Pregnancy Outcomes/ZHONG Kai， LI Yuran， CUI Yuanying， LI Wenzhong. //Medical Innovation of China， 2024， 21（04）： -139
[Abstract] Objective： To explore the predictive value of anti nuclear antibody （ANA） combined with T lymphocyte subpopulations detection in pregnancy outcomes of recurrent spontaneous abortion （RSA）. Method： A total of 50 RSA patients admitted to Ganzhou Maternal and Child Health Hospital from February 2020 to July 2022 were selected as the study group， and another 50 normal pregnant women who underwent prenatal examinations in author's hospital during the same period were selected as the control group. 5 mL fasting elbow venous blood was collected from all subjects in the morning to detect the levels of ANA and T lymphocyte subpopulations （CD4+， CD8+， CD16+CD56+）， and the CD4+/CD8+ ratio was calculated. Result： A total of 29 patients in the study group experienced miscarriage before 10 weeks of pregnancy， with a miscarriage rate of 58.00% （29/50）; there were 13 cases of miscarriage in the control group before 10 weeks of pregnancy， with a miscarriage rate of 26.00% （13/50）. The difference in miscarriage rates between the two groups was statistically significant （字2=10.509， P=0.001）. Compared with the control group， the positive detection rate of ANA in the study group was higher， with higher levels of CD4+， CD16+CD56+， CD4+/CD8+， and lower levels of CD8+， the differences were statistically significant （P<0.05）. Joint detection had the highest predictive value in RSA， with an AUC of 0.872， sensitivity of 0.875， specificity of 0.393， followed by CD16+CD56+， CD4+， CD4+/CD8+， CD8+， ANA. Conclusion： The application value of ANA combined with T lymphocyte subpopulations has high application value in the diagnosis of RSA， which can effectively predict the risk of RSA occurrence and provide reliable reference for early clinical intervention.
[Key words] Recurrent spontaneous abortion Anti nuclear antibodies T lymphocyte subpopulations Pregnancy outcome
复发性流产（RSA）是妇产科常见疾病，该病指连续3次或3次以上发生的自然流产，病因较为复杂，可能与染色体异常、生殖器官解剖结构异常、免疫因素等存在密切联系[1]。相关研究显示，免疫功能异常可能是引发RSA的重要病因，其中抗核抗体（ANA）等自身抗体干扰正常妊娠、分娩，ANA为识别核大分子及复合物的自身抗体，能够与细胞多种成分之间发生免疫反应[2-3]。另ANA还可以免疫复合物的形式沉积于胎盘组织上，使得补体被激活后影响胎盘正常发育而致流产。淋巴细胞作为自身免疫细胞在调节机体免疫功能中具有重要作用，妊娠期间若母胎界面发生免疫失衡，则会引发免疫功能紊乱而导致流产[4]。鉴于此，本研究选择RSA患者50例作为研究对象，分析ANA联合T淋巴细胞亚群检测在RSA患者中妊娠结局中的预测价值，以为临床医生尽早采取恰当的干预措施提供参考，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2020年2月—2022年7月赣州市妇幼保健院收治的50例RSA患者入研究组，另选择50例同期于本院行產前检查的正常妊娠孕妇入对照组。纳入标准：研究组符合文献[5]《复发性流产诊治的专家共识》中相关诊断标准，同一性伴侣，且连续两次或两次以上孕龄均<10周的自然流产病史；对照组孕妇为自然受孕，单胎妊娠，均无先天性免疫系统疾病。排除标准：伴有内分泌系统疾病及染色体异常疾病；因外界因素导致的流产；合并其他感染性疾病；子宫解剖结构异常；凝血功能异常；意识障碍，无法配合完成本次研究。本研究经赣州市妇幼保健院医学伦理委员会批准，患者及家属均知情同意本研究。
1.2 方法
采集所有参检者清晨空腹肘静脉血5 mL，于室温环境下静置30 min后行离心处理（3 500 r/min，离心10 min，离心半径10 cm）获得上层血清，采用猴肝片及HEP-2细胞作为抗原基质，应用免疫印迹法检测ANA。另参照T细胞亚群比例检测说明书，应用BD Bioscience公司的FACS Calibus流式细胞仪应用免疫荧光法测定CD4+、CD8+、CD16+CD56+T细胞比例，并计算CD4+/CD8+值。
1.3 观察指标
（1）RSA患者的妊娠结局；（2）ANA检测结果；（3）对比两组T淋巴细胞亚群水平；（4）T淋巴细胞亚群单项及联合ANA检测在RSA中的预测价值。
1.4 统计学处理
数据处理应用SPSS 22.0软件，以（x±s）表示计量资料，应用t检验，用率（%）表示计数资料，应用字2检验，采用受试者操作特征（ROC）曲线分析T淋巴细胞亚群在RSA中的预测价值，AUC≤0.50：无诊断价值，0.50
2 结果
2.1 两组基线资料比较
研究组年龄22～36岁，平均（28.67±3.62）岁；体重指数21.31～26.59 kg/m2，平均（23.96±0.43）kg/m2；孕26～65 d，平均（45.57±5.69）d；孕次3～7次，平均（4.08±1.39）次；孕早期自然流产3～6次，平均（4.86±0.57）次。对照组年龄21～36岁，平均（29.04±3.16）岁；体重指数21.40～26.53 kg/m2，平均（23.88±0.45）kg/m2；孕29～66 d，平均（45.60±5.71）d。两组基线资料对比，差异均无统计学意义（P>0.05）。
2.2 两组妊娠结局比较
研究组29例患者于孕10周前发生流产，流产率为58.00%（29/50）；对照组于孕10周前发生流产共13例，流产率为26.00%（13/50）。两组流产率对比，差异有统计学意义（字2=10.509，P=0.001）。
2.3 两组ANA检测结果比较
研究组ANA阳性检出率高于对照组，差异有统计学意义（字2=6.353，P=0.012），见表1。
2.4 两组T淋巴细胞亚群水平比较
相比于对照组，研究组CD4+、CD16+CD56+、CD4+/CD8+水平均较高，CD8+水平较低，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。
2.5 抗核抗体联合T淋巴细胞亚群检测在RSA中的预测价值
联合检测在RSA中的预测价值最高，AUC为0.872，敏感度为0.880，特异度为0.500，其次为CD16+CD56+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、ANA。见表3、图1。
3 讨论
相关研究显示，免疫功能异常是引发RSA的重要病因[6-7]。其中ANA等自身抗体可对正常妊娠及分娩造成干扰，作为识别核大分子及复合物的自身抗体，ANA可与细胞多种成分发生免疫反应，其存在表明患者自身可能有影响胎盘发育的潜在自身免疫过程，可导致早期妊娠的丧失[8-9]。目前，临床对于ANA导致RSA的发病机制暂无明确定义，认为自身免疫失败是受到抗核抗体循环水平升高的影响而导致RSA[10]。
T淋巴细胞根据表型不同分为抑制型与辅助型两种，其中辅助型的T细胞能够通过分泌多种细胞因子后参与机体免疫调节，对胚胎着床及发育造成影响[11-12]。研究显示，具有正常生育能力的女性外周血T淋巴细胞水平无明显差异[13-14]。本研究结果显示，研究组流产率、ANA阳性检出率、CD4+、CD16+CD56+、CD4+/CD8+水平均高于对照组，CD8+水平低于对照组（P<0.05）。联合检测在RSA中的预测价值最高，AUC为0.872，敏感度为0.875，特异度为0.393，其次为 CD16+CD56+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、ANA，表明ANA与T淋巴细胞亚群联合检测在RSA的妊娠结局中均具有一定的预测价值，通过分析ANA阳性检出率有助于判断RSA风险，同时结合T淋巴细胞亚群联合检测可更好的预测患者的妊娠结局，为临床尽早干预提供可靠依据[15-16]。临床将CD16+CD56+称为NK细胞，作为大颗粒淋巴细胞可对感染细胞及肿瘤细胞产生一定的毒性，从而诱发多种细胞因子以参与机体免疫调节[17-19]。本次研究中CD16+CD56+在预测RSA中应用价值最高，故临床可将其作为预测RSA的重要指标，为指导患者是否接受治疗干预等提供理论依据[20-21]。
综上所述，ANA联合T淋巴细胞亚群检测在RSA中具有较高的预测价值，二者与RSA间存在密切联系，可为RSA早期诊断提供科学依据，有助于协助医生尽早采取干预措施以改善妊娠结局。
参考文献
[1]余倩，王露，王文，等.不良妊娠结局的危险因素及血清中抗核抗体和抗心磷脂抗体检测的临床意义[J].广西医科大学学报，2020，37（3）：454-458.
[2]李国华，李阳阳，鲍时华.不明原因复发性流产患者孕前维生素D水平与妊娠结局的关系[J].中国医师杂志，2021，23（5）：702-706.
[3]李静，毛宝宏，王文第，等.不同淋巴细胞主动免疫疗法次数对复发性流产孕妇妊娠结局及免疫功能的影响[J].中国妇产科临床杂志，2021，22（5）：536-537.
[4]韩健，陈韶慧，王海青，等.孕早期子宮动脉血流参数联合外周血Th1/Th2对不明原因复发性流产的预测价值研究[J].新疆医科大学学报，2022，45（7）：738-742.
[5]中华医学会妇产科学分会产科学组.复发性流产诊治的专家共识[J].中华妇产科杂志，2016，51（1）：3-9.
[6]李慧，廖碧翎，林小红.外周血CD3+T淋巴细胞对习惯性流产患者不良妊娠的预测价值[J].生殖医学杂志，2020，29（1）：79-84.
[7]杨攀玉，曲婷，曾莉，等.外周血TBNK淋巴细胞亚群和血清Th1/Th2细胞因子与不明原因复发性流产的相关性研究[J].中国免疫学杂志，2021，37（6）：729-736.
[8]周燕，罗孟军，陈莉农，等.抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗心磷脂抗体和抗核抗体检测在复发性流产诊断中的价值[J].中国计划生育和妇产科，2020，12（5）：25-51.
[9]郭慧敏，朱镭，张晋丽，等.反复自然流产患者淋巴细胞亚群及CD4+CD25+CD127lowT细胞百分率分析[J].中国药物与临床，2019，19（9）：1533-1534.
[10]赵美兰.复发性流产患者外周血T淋巴细胞封闭效率与地屈孕酮联合安子合剂疗效的关系[J].中国妇幼保健，2019，34（14）：3289-3292.
[11]黄萍，董喜凤，曾健，等.不明原因复发性流产患者蜕膜组织SOCS-3、NK细胞及T淋巴细胞亚群的表达及临床意义[J].武警后勤学院学报，2019，28（11）：49-52.
[12]李阳阳，朱丹，阮加里，等.孕前外周血淋巴细胞亚群与IVIG治疗反复妊娠失败患者妊娠结局的相关性[J].中国免疫学杂志，2019，35（17）：2116-2121.
[13]陆子贇，岳朝艳，应春妹.抗核抗体检测和抗核抗体谱检测在复发性流产诊断中的应用分析[J].医学食疗与健康，2022，20（6）：135-138.
[14]郑琦，钟素琴，朱丽君.免疫型复发性流产患者血清封闭抗体、TPOAb及ANA的临床治疗变化[J].分子诊断与治疗杂志，2022，14（12）：2090-2093，2097.
[15]黄海珍，常亚杰.血清T淋巴细胞亚群表达水平对复发性流产的预测价值[J].临床医学，2021，41（10）：54-56.
[16]郝月兰，刘辉，吕明云，等.复发性流产孕妇血清25（OH）D水平与炎症因子、自身免疫抗体及T淋巴细胞亚群分布的相关性分析[J].分子诊断与治疗杂志，2020，12（6）：799-802.
[17]谢立汉，谢美芬，谢强，等.抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗心磷脂抗体、抗核抗体检测对复发性流产的诊断价值分析[J].中国社区医师，2023，39（8）：88-90.
[18]崔蓉，钟兴明，苗竹林，等.抗核抗体与不明原因复发性流产相关性的初步探讨[J].中国实用医药，2020，15（13）：1-3.
[19]李彩娟.淋巴细胞主动免疫治疗对复发性流产患者封闭抗体水平及妊娠结局影响[J].中国民康医学，2020，32（2）：51-53.
[20]陈艺璇，唐相靖，崔金全.外周血淋巴细胞亚群对早期复发性流产妊娠结局的预测价值[J].中国免疫学杂志，2019，35（22）：2765-2773.
[21]林杨，张丽.抗子宫内膜抗体、抗核抗体联合子宫动脉血流阻力对复发性流产的临床意义[J].医学理论与实践，2022，35（20）：3549-3551.
