CCCK-18 CTRP-3 miR-340-5p预测重症高血压性脑出血患者预后的价值

庞珊珊 姜 莹 姜 旭

哈尔滨医科大学附属第一医院，黑龙江 哈尔滨 150000

高血压性脑出血是高血压最严重的并发症，其会导致患者肢体偏瘫、认知障碍等后遗症，病情持续恶化会发生脑水肿［1］。早期识别高血压性脑出血对改善患者生存状况具有重要意义［2］。细胞角蛋白18 裂解片段（cytokeratin18，CCCK-18）水平与脑卒中、创伤性脑损伤等不良预后有关［3］。补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3（complement-C1q/tumor necrosis factor-related protein 3，CTRP-3）参与炎症反应、细胞凋亡等生理过程［4］。微小核糖核酸（microRNA）340-5p（miR-340-5p）广泛参与细胞增殖、分化等多种生命活动过程［5］。本研究旨在探讨CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 预测重症高血压性脑出血患者预后的价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取哈尔滨医科大学附属第一医院2019-10—2021-10 收治的80 例重症高血压性脑出血 患 者 为 观 察 组，男45 例，女35 例；年 龄40～80（53.21±3.41）岁；体重指数16～26（22.35±2.25）kg/m2；高 血 压 病 程2～15（8.58±1.33）a；血 肿 体 积15～30（20.87±1.05）mL；合并血脂异常20 例，糖尿病15 例，冠心病10 例。另选取80 例同期健康体检者为对照组，男42 例，女38 例；年龄40～80（53.42±3.25）岁；体重指数17～25（22.31±2.20）kg/m2。2 组研究对象性别、年龄、体重指数对比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 纳入及排除标准纳入标准：（1）符合2010美国《成人自发性脑出血诊断标准》［6］中的诊断标准；（2）年龄在40～80岁者；（3）有明确高血压史者；（4）就诊时发病时间24 h 以内；（5）参与研究前未服用过降压药；（6）首次发病；排除标准：（1）脑血管畸形；（2）合并其他器质性病变；（3）入院时呈深度昏迷、双侧瞳孔散大者；（4）既往有脑血管疾病、脑创伤史、脑卒中病史；（5）血液疾病、动脉瘤、抗凝药物导致的脑出血；（6）既往有开颅手术史者；（7）恶性肿瘤患者。本研究经医院伦理委员会批准，患者及家属均知情同意。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法：重症高血压性脑出血患者入院后给予常规心电监护，给予依达拉奉注射液、奥美拉唑注射液、甘露醇注射液等治疗。

1.3.2 随访结果：对患者进行3 个月的随访，参照改良Rankin量表（modified Rankin scale，mRS）［7］评估预后，mRS 评分在2 分及以下为预后良好组（55 例），2分以上为预后不良组（25例）。

1.3.3 血清CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 检测：采集2 组空腹静脉血5 mL，离心半径14 cm，3 000 r/min离心5 min 分离血清，置于低温环境中保存备用，使用酶联免疫吸附法检测血清CCCK-18、CTRP-3水平。另采集2 组空腹静脉血3 mL，抗凝，分离血清，上层血浆分装至1 mL 冷冻管，-15 ℃保存备用；向400 μL血浆中加入QIAzol 试剂和等体积100%氯仿，放置3 min，离心15 min，取上层水相300 μL 加入100%乙醇，混匀，12 000 r/min 离心15 s，弃废液，加入500 μL RPE，离心，弃废液，换新2 mL 收集管，空转2 min，使用3 μL 的RNease water 溶解RNA。使用逆转录定量聚合酶链反应技术检测miR-340-5p水平。

1.4 观察指标和评价标准比较对照组与观察组血清CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 水平，比较不同预后患者各项临床指标水平，Logistic 回归分析影响重症高血压性脑出血患者的预后因素，Person相关系数分析血清CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 水平间的相关性，分析CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 单独及联合检测对重症高血压性脑出血预后的预测价值并编制ROC曲线。

1.5 统计学方法数据录入SPSS 22.0软件中分析，计数资料用频数（百分率）［n（%）］表示，行χ2检验，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，行t检验，Logistic 回归分析影响患者预后的因素，Pearson 相关系数进行相关性分析，使用受试者工作特征（Receiver operating characteristic，ROC）曲 线 分 析CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 单独及联合检测的灵敏度和特异度，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组与观察组血清检测结果比较观察组血清CCCK-18水平高于对照组，CTRP-3、miR-340-5p低于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 对照组与观察组血清检测结果比较 （x±s）Table 1 Comparison of serum test results between control group and observation group （x±s）

2.2 影响重症高血压性脑出血患者不同预后的单因素分析预后良好组与预后不良组年龄、性别、体重指数、高血压病程、血肿体积、出血量差异无统计学意义（P＞0.05），血清CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 影响重症高血压性脑出血患者不同预后的单因素分析Table 2 Univariate analysis of different outcomes in patients with severe hypertensive intracerebral hemorrhage

2.3 影响重症高血压性脑出血患者不同预后的多因素分析Logistic 回归分析显示，血清CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 均是重症高血压性脑出血患者预后的影响因素（P＜0.05），见表3。

表3 影响重症高血压性脑出血患者不同预后的多因素分析Table 3 Analysis of multiple factors affecting prognosis of patients with severe hypertensive intracerebral hemorrhage

2.4 相关性分析Person 相关性分析显示，血清CCCK-18 与血清CTRP-3、miR-340-5p 呈负相关（r=-0.385、-0.406，P＜0.05）。

2.5 CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p检测对重症高血压性脑出血预后的预测价值CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 联合检测预测重症高血压性脑出血预后的AUC值高于单项检测（P＜0.05），见表4。ROC曲线见图1。

图1 CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 检测预测重症高血压性脑出血预后的ROC曲线Figure 1 ROC curve of CCCK-18,CTRP-3 and miR-340-5p detection to predict prognosis of severe hypertensive intracerebralhemorrhage

表4 CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p检测对重症高血压性脑出血预后的预测价值Table 4 Predictive value of CCCK-18，CTRP-3 and miR-340-5p detection for prognosis of severe hypertensive cerebral hemorrhage

3 讨论

高血压、血液疾病及脑部细小动脉硬化患者罹患脑出血风险显著高于正常人群［8］。脑出血导致的脑水肿多在出血24 h 后进展到高峰状态，且持续时间较长，若脑水肿控制效果不佳，会升高颅内压，引起脑疝，威胁患者生命安全，同时血肿产生的毒性作用会导致脑水肿坏死，增加患者神经功能障碍［9-10］。重症高血压性脑出血可在发病数分钟内死亡，原因为急性出血压迫正常脑组织，影响心血管运动中枢和呼吸中枢。随着近年来高血压脑出血诊疗方法不断优化，虽一定程度上降低了其致死率和致残率，但仍会出现不同程度的认知功能障碍、语言功能障碍及运动功能障碍［11］。现阶段临床缺乏诊断重症高血压性脑出血特异性诊断指标，目前主要采用影像学检查方法进行诊断，但敏感度较低，选择合理、有效指标评估重症高血压性脑出血患者病情和预后，对临床治疗和提高患者生存质量具有重要意义。

随着近年来分子生物学技术的不断发展，重症高血压性脑出血病理变化过程中的生物因子受到临床关注。细胞凋亡在脑缺血过程中发挥主导作用，高血压性脑出血后由于血液供给减少，相应细胞因子活化，加重了神经细胞破坏［12］。细胞角蛋白与胞内其他蛋白形成复杂系统，其中CCCK-18 在上皮细胞凋亡时会进入血液。有学者在恶性肿瘤、脓毒症、肝脏疾病、器官移植患者中检测出了CCCK-18 的循环水平，认为其可能是神经系统疾病预后的潜在标志物［13］。另有研究显示，高水平的CCCK-18 是头部损伤后继发恶性中脑动脉梗死及脑梗死的独立危险因素［14］。本研究中观察组血清CCCK-18水平高于对照组，预后良好组血清CCCK-18 水平低于预后不良组，表明血清CCCK-18参与了重症高血压性脑出血的病情进展。分析原因在于，重症高血压性脑出血后的缺血缺氧导致裂解的CCCK-18进入血液，细胞凋亡加重，使机体血清CCCK-18 水平进一步升高［15］。血清CCCK-18水平越高，患者的脑细胞凋亡越严重，预后越差，因此其可作为重症高血压性脑出血患者的独立危险因素［16-17］。

脑缺血后的炎症反应穿过血管壁浸润脑组织可引发继发性脑损害，其释放的自由基会导致氧化应激，出现脑细胞死亡，加剧脑组织损害［18］。CTRP-3与脂联素有多种类似的生理活性，其以内分泌形式在多种器官组织中发挥生物学效应，可通过抑制白介素-6、肿瘤坏死因子-α等促炎因子的表达抑制机体炎症反应［19-21］。既往研究显示，CTRP-3 与脑出血损伤有关，其通过影响心肌组织中缺氧诱导因子信号通路，调节血管新生的过程，进而达到保护血-脑屏障、减轻脑水肿的多重功效［22-23］。本研究显示，观察组血清CTRP-3低于对照组，预后良好组血清CTRP-3高于预后不良组，进一步Logistic 回归分析显示，血清CTRP-3 水平降低是影响高血压性脑出血患者病情严重程度和预后的独立危险因素。分析原因可能是重症高血压性脑出血使机体出现炎症反应，激活脑细胞凋亡通路，随着血清CTRP-3 水平的降低，加剧了患者脑组织功能的破坏，血脑屏障受损，加重了神经功能缺损［24］。

miRNA 是非编码RNA 的一种，主要发生在细胞内［25］。miR-340-5p在血液、神经及消化等多系统组织中均有分泌，在神经元病理过程中有一定调控作用，可影响炎症和免疫反应过程。高血压脑出血患者多合并血液流变学异常，血小板功能变化会导致血栓形成，增加脑组织缺血缺氧程度，加重病情。本研究显示，观察组miR-340-5p水平低于对照组，预后良好组miR-340-5p高于预后不良组，提示miR-340-5p参与高血压性脑出血疾病的发生和发展，影响患者的预后。为进一步明确影响疾病预后不良的危险因素，Logistic 回归分析显示，miR-340-5p 水平降低是影响患者预后的独立危险因素。高血压脑出血后miR-340-5p 水平降低可能是通过负向调控血清CCCK-18 和CTRP-3，参与脑损伤病理过程。另外本研究还显示，CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p联合检测预测重症高血压性脑出血预后的AUC值高于单项检测，表明上述指标联合检测对预测重症高血压性脑出血患者预后的的价值较高。

重症高血压性脑出血患者CCCK-18 呈高表达，CTRP-3、miR-340-5p呈低表达，其对高血压脑出血病情判断和预后具有重要意义。早期监测CCCK-18、CTRP-3、miR-340-5p 的表达，有助于及时采取措施，对改善患者预后有重要作用。