替米沙坦在高血压中应用及对ACE2表达的调节机制和血管内皮细胞功能的影响

熊攀 董爱芝 常以芳 冯泽瑞 宋建涛

(1聊城市第二人民医院,山东 临清 252600;2山东大学附属医院)

高血压是以体循环动脉压升高为主要临床表现的心血管综合征,以血压高、头痛、头胀为典型临床表现,可伴心力衰竭、高脂血症、左室肥厚等症状,若患者的血压长期未得到有效控制,可增加主动脉夹层、眼部血管异常、痴呆等并发症发生风险〔1,2〕。目前高血压尚无根治疗法,临床中以降低心脑肾及血管并发症和死亡风险为主要治疗目标,通过药物治疗及改善生活方式,达到控制日常血压的目的〔3〕。高血压作为心血管疾病的常见危险因素,如何控制血压、降低高血压并发症发生风险及高血压对血管管腔内径、管壁厚度、学管结构功能的影响机制,仍是当前的研究热点〔4〕。替米沙坦是常见的血管紧张素受体拮抗剂,可通过抑制血管紧张素Ⅱ,达调节血管收缩、降压的治疗目的〔5〕。血管紧张素转换酶(ACE)2与血管紧张素Ⅱ密切相关,参与肾素血管紧张素系统活动中〔6〕。目前关于替米沙坦在高血压中影响ACE2表达的研究较少,本研究探讨替米沙坦在高血压中的应用及对ACE2表达的调节机制和血管内皮细胞功能的影响。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2020年1月至2021年12月聊城市第二人民医院收治的120例高血压患者按随机数字表法分为对照组与观察组各60例,两组均接受常规西药治疗,观察组在此基础上加上替米沙坦治疗。两组年龄、病程、体质量指数、性别组成等基本资料差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。本研究经医学伦理委员会同意。诊断标准：符合《高血压中医诊疗专家共识》〔7〕中高血压诊断标准,非同一天内3次血压检查均收缩压/舒张压≥140/90 mmHg。纳入标准：①年龄35～85岁;②有血压升高、头晕、头痛、胸闷不适等症状;③基本资料齐全;④患者、家属均自愿签署知情通知书。排除标准：①对本研究用药有过敏反应者;②本研究前1个月内,接受过高血压相关诊疗者;③合并冠状动脉粥样硬化、高血压性脑出血等严重病症;④有感染性、传染性疾病;⑤有肿瘤疾病或肾衰竭等严重器质性疾病;⑥有精神疾病、语言障碍等影响配合度的病症。

表1 两组基本资料对比

1.2治疗方法 对照组：常规西药治疗。根据患者病情,医师适当选取下述药物制定有针对性的用药方案。氢氯噻嗪片(天津力生制药股份有限公司,国药准字H12020166,规格25 mg×100片/瓶),口服,25～100 mg/d,均分1～2次服用;呋塞米片(天津力生制药股份有限公司,国药准字H12020163,规格20 mg×100片/瓶),口服,40～80 mg/d,均分2次服用;阿替洛尔片(天津市中央药业有限公司,国药准字H12020259,规格12.5 mg×60片/盒),口服,12.5 mg/次,2次/d,用药1 w后,可适当增加药量至50～200 mg,均分2～3次服用;盐酸拉贝洛尔片(江苏迪赛诺制药有限公司,国药准字H32026120,规格50 mg×30片/盒),口服,100 mg/次,2～3次/d;硝苯地平控释片(上海现代制药股份有限公司,国药准字H20000079,规格30 mg×6片×2板/盒),口服,30 mg/(次·d)。治疗1个月。观察组：常规+替米沙坦治疗。替米沙坦片(天津华津制药有限公司,国药准字H20051847,规格40 mg×14片/盒),口服,40 mg/(次·d),治疗1个月。本组常规西医药物治疗与对照组一致。

1.3检测方法 采集两组研究对象的清晨空腹(禁食≥6 h)静脉血3 ml,用离心机(博科,型号TGL-16EL)进行10 min、15 cm×3 000 r/min离心处理,分离血清,存于-80 ℃下待检。①ACE2检测。用ACE2酶联免疫吸附试验试剂盒(武汉菲恩生物科技有限公司,双抗夹心法,规格48T/96T)、荧光酶标仪(Synergy HT,Bio-Tec,450 nm)完成血清ACE2检测。取10 ml抗凝全血,加等量生理盐水,加淋巴细胞分离液(GE Whatman),经20 min、15 cm×2 000 r/min离心处理,分离外周血单核来源巨噬细胞,于0.25%胰蛋酶(环凯)内收集贴壁单核来源巨噬细胞。用SunShineBioTM总RNA提取试剂盒〔生兴生物技术(南京)有限公司〕完成RNA提取,取2 μl RNA样本,加98 μl 1% 经焦碳酸二乙酯处理的水,用紫外分光光度计(哈希,型号DR6000)完成总RNA浓度、纯度测定,A260/A280在1.8～2.0可进入下一阶段检测。用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)仪(博科,型号BK-CW96)、PCR扩增仪(Applied Biosistems公司,型号SimpliAmp)、超净台(博科,型号BBS-H1800)、PCR引物及探针(上海卓康生物公司),和购自索莱宝公司Taq酶、Mg2+、dNTP完成ACE2 mRNA检测。引物序列：ACE2上游5′-CATTGGAGCAAGTGTTGGATCTT-3′,下游5′-GAGCTAATGCATGCCATTCTCA-3′,扩增片段299 bp。β-actin上游5′-GGACTCCTATGTGGGTGACGAGG-3′,下游5′-GGGAGAGCATAGCCCTCGTAGAT-3′,扩增片段866 bp。反应体系20 μl：0.5 μl反向转录脱氧核糖核酸、引物及探针各0.5 μl、5 μl PCR缓冲液、0.25 μl Taq酶、3 μl Mg2+、4 μl dNTP、加双蒸馏水至20 μl。扩增条件：50 s 94 ℃变性、50 s 55 ℃退火、1 min 72 ℃延伸(34个循环),最后延伸10 min,重复3次。用2-△△Ct法计算ACE2 mRNA检测值。②用购自武汉菲恩生物科技有限公司的脂联素(ADPN)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)-1酶联免疫吸附试验试剂盒完成ADPN、ADPN、ET-1测定。③用超声检测仪(大为,型号DW-T6)完成颈动脉内膜-中层厚度(IMT)的测定。④用血压监测仪(德国里斯特,型号ri-cardio)完成收缩压、舒张压的测定。治疗前、治疗后1、4 w这3个时间段进行上午、下午收缩压、舒张压检测,取均值。对比两组不良反应：统计出现腹痛腹泻、皮肤瘙痒/丘疹、恶心/食欲不振的例数。

1.4统计学方法 采用SPSS22.0软件进行t检验、χ2检验。

2 结 果

2.1两组ACE2对比 两组治疗前血清ACE2、ACE2 mRNA差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后1、4 w血清ACE2、ACE2 mRNA均较治疗前升高,对照组1、4 w ACE2 mRNA较治疗前升高,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组ACE2水平对比

2.2两组内皮细胞功能对比 两组治疗前ADPN、NO、ET-1、IMT水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组1、4 w ADPN、NO水平较治疗前升高,ET-1、IMT水平较治疗前降低,且观察组治疗后1、4 w ADPN、NO水平高于对照组,ET-1、IMT水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3、表4。

表3 两组ADPN、NO水平比较

表4 两组ET-1、IMT水平对比

2.3两组血压情况比较 两组治疗前收缩压、舒张压差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后1、4 w收缩压、舒张压较治疗前降低,且观察组治疗后1、4 w收缩压、舒张压均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 两组血压对比

2.4两组不良反应 观察组不良反应总发生率(6.67%,其中腹痛腹泻2例,皮肤瘙痒/丘疹、恶心/食心不振各1例)与对照组(3.33%,其中腹痛腹泻、恶心/食欲不振各1例)差异无统计学意义(χ2=0.607,P=0.436)。

3 讨 论

高血压是当前常见的慢性病之一。目前关于高血压的具体致病机制尚未明确,但有研究表明,遗传、不良生活饮食习惯、年龄等因素均会增加高血压发病风险〔8〕。此外,有5%左右的高血压患者是因确定疾病或病因引起的血压升高症状,如主动脉缩窄、脑肿瘤、妊娠高血压综合征等,属继发性高血压〔9,10〕。流行病学显示,我国高血压患病率达23.2%,且呈逐年上升趋势,2015年全球因血压升高(收缩压≥110 mmHg)致死亡者达1 850万人左右,因血压升高致缺血性心脏病、缺血性脑卒中、出血性脑卒中并出现死亡者达1 450万人左右〔11,12〕。高血压可增加多种心脑血管疾病的发病风险,会对患者的生命健康造成一定威胁,因而有高血压病症者需重视心脑血管疾病的防治工作。

替米沙坦多用于成年人原发性高血压的临床治疗中,可达较显著的用药效果。本研究结果提示,替米沙坦能有效改善ACE2表达情况。可能原因如下：替米沙坦作为血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,主要有降低血压、降低心血管风险的功效。血管紧张素是一类具有强收缩血管、刺激肾上腺皮质分泌醛固醇等作用的肽类物质,可参与血压、体液的调节。正常生理状态下,血管紧张素Ⅱ可通过收缩全身小动脉来提升血压检测值,且有促进肾上腺皮质分泌醛固醇的作用〔13,14〕。醛固醇作为类固醇类激素,可作用于肾脏,促进肾脏对离子、水分的再吸收,达保钠、保水、排钾、增多血量的作用〔15〕。醛固醇水平的提升,会增加血量、加重血压。以替米沙坦为主的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂类药物,通过替代血管紧张素Ⅱ受体,同特异性血管紧张素Ⅱ受体亚型相结合,达阻断血管紧张素生理作用,抑制血管收缩,降低、控制血压,减轻血管壁受损情况的治疗目的〔16,17〕。高血压患者因血压呈持续升高状态,致血管壁长期承受着高于正常血压值的侵损,刺激血管胶原纤维增生、细胞外基质沉积,诱发血管肥厚及血管重塑的形成,增加心脑血管疾病发生风险。实施替米沙坦治疗后,通过阻断血管紧张素Ⅱ及其受体间的信号途径,可改善血管收缩,达舒张血管、降低血压的治疗效果。ACE作为肾素-血管紧张素系统中的重要调节物质,此物质可将血管紧张素Ⅰ转化成血管紧张素Ⅱ,ACE2是ACE同源物,能将血管紧张素Ⅱ裂解成血管紧张素1～7多肽〔18,19〕。本研究说明,替米沙坦促有抑制血管紧张素Ⅱ生理作用,降低血压的功效外,还可通过提升ACE2,促进血管紧张素Ⅱ受体的被裂解,降低血管紧张素Ⅱ水平,达显著的血管舒张效果,有效降低血压,减少高血压对血管壁的损害。本研究结果提示,替米沙坦治疗能达更好的血管内皮细胞功能改善效果和降压效果。原因可能如下：ADPN有降低血管内壁脂肪附着,促进内皮细胞修复,激活巨噬细胞,间接发挥抗炎的作用〔20,21〕。NO主要由内皮来源NO合酶eNOS催化L-精氨酸代谢生成,有抗炎、扩张血管、抑制细胞凋亡的作用〔22〕。因而,血清ADPN、NO水平上升,利于帮助患者达更显著的血管保护效果,对促进血管内皮细胞功能的恢复有积极影响。ET-1主要有促进血管收缩的作用,ET-1、IMT水平下降,利于血管扩张,降低血压检测值,可帮助患者维持更平稳、长效的血压状态,对维持患者血压监测的稳定、良好状态有重要意义。本研究结果提示,在常规西药治疗基础上,加上替米沙坦进行联合药物治疗,能达到更显著的用药效果,且有一定用药安全度。这可能是因为,替米沙坦主要是调节改善血管紧张素Ⅱ水平,对血管肾素、离子通道等无显著影响,无过多毒副作用。王静等〔23〕研究表明,接受了替米沙坦治疗的原发性高血压患者,其NO检测值更高,ET检测值更低,血管内皮细胞功能改善效果更佳,与本研究结果一致。说明将替米沙坦应用到高血压中,能达到较好的血管内皮细胞功能改善效果。

综上,将替米沙坦应用到高血压的临床治疗中,可有效提升ACE2表达,促进血管紧张素Ⅱ的裂解,调节血管内皮细胞功能,促进内皮细胞修复,有显著的心血管保护效果,对降低血压检测值,控制病情等均有重要意义,且用药安全度高。