自拟平衡针灸通过调控PI3K-AKT信号通路及血清GABA水平对老年失眠的治疗作用

许珂 蔡丽伟 周书喆 刘晨 刘淑清 马学红

(1北京大学第六医院 北京大学精神卫生研究所 国家卫生健康委员会精神卫生学重点实验室(北京大学) 国家精神心理疾病临床医学研究中心(北京大学第六医院)精神科,北京 100191;2北京中医药大学第二临床医学院;3北京中医药大学东方医院针灸科)

老年失眠是指年龄超过60岁的人在睡眠方面出现困难或睡眠质量下降,导致白天感到疲劳、精神不振等情况〔1〕。老年失眠与生理和心理因素有关,如老年人身体功能下降、慢性疾病、药物副作用、情绪压力等〔2〕。平衡针灸作为中医传统疗法之一,在老年失眠治疗中具有一定优势和作用。通过调整神经系统功能、改善睡眠质量、促进身体代谢和调节内分泌系统等机制达到缓解老年失眠的目的〔3〕。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶 B(AKT)信号通路在一定程度上反映了患者大脑神经元细胞的增殖与凋亡〔4〕。通过对患者PI3K/AKT信号通路相关指标的监测,可以对患者的治疗效果进行评估。4-氨基丁酸(GABA)是一种重要的神经递质,在老年失眠中具有重要作用〔5〕。当GABA水平下降时,可能会导致睡眠障碍〔6〕。本研究旨在通过对平衡针灸调控PI3K-AKT信号通路及血清GABA水平治疗老年失眠的作用进行研究,以期为临床治疗提供科学依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2021年5月至2023年12月于北京大学第六医院和北京中医药大学东方医院治疗的老年失眠患者120例作为研究对象,纳入标准:①均符合失眠诊断标准〔7〕;②病程均在6个月以上;③近3个月未使用精神类药品;④临床资料完整。排除标准:①合并严重的脑血管疾病;②心理疾病异常;③自身免疫性疾病、凝血功能异常。按照随机分组原则分为研究组及对照组各60例,两组一般资料差异无统计学意义(P>0.05),见表1。患者均签署知情同意书,本研究经伦理委员会研究通过。

表1 两组一般资料比较

1.2干预方法 两组均采取阿普唑仑〔江苏恩华药业股份有限公司,国药准字H32020215,1次0.4 mg(1片),每日3次〕进行治疗,研究组在此基础上联合采取平衡针灸进行治疗,两组均治疗4 w。平衡针灸:分别对患者双侧肢体的失眠相关穴位进行针灸,针刺患者内关穴、关元穴、三阴交穴、神门穴、大陵穴、太溪穴针刺,顺时针及逆时针分别进行捻转6圈后退出针灸器具,留针15 min,连续治疗4 w。

1.3两组治疗效果比较 分别对两组治疗4 w后的效果进行评价。治疗效果评价标准〔8〕:患者睡眠得到完全恢复或夜间的整体睡眠时间在6 h以上则为痊愈;患者夜间的整体睡眠时间在3～6 h则为显效;患者睡眠有所改善,夜间的整体睡眠时间不足3 h则为有效;其他则为无效。总有效率=(痊愈+显效+有效)/总病例数。

1.4两组临床改善指标比较 分别对两组治疗4 w后睡眠潜伏期、睡眠总时间及觉醒次数之间的差异进行比较。

1.5两组PI3K-AKT信号通路及GABA水平比较 分别对两组治疗前及治疗4 w的PI3K、AKT、GABA水平进行比较。PI3K、AKT水平的检测采用免疫印迹法进行检测,GABA水平的检测采用酶联免疫法进行检测。患者进行静脉采血,对血细胞内总蛋白进行提取后,测定蛋白浓度,使用浓缩胶及分离胶对蛋白进行转膜过夜,在封闭条件下进行常温孵育1 h,同时使用兔抗人多克隆抗体常温孵育再次进行洗膜,随后再次进行兔抗人多克隆抗体进行常温孵育1.5 h,使用化学法进行发光及显影,使用ImageJ软件进行蛋白测定,测定过程中使用β-actin作为内标。

1.6两组多导睡眠监测仪指标比较 采用澳大利亚康迪公司的Somte 28多导睡眠监测仪,对治疗组及对照组进行监测,监测指标包括总睡眠时间(TST)、睡眠效率(SE),第一(TS1)、二(TS2)、三(TS3)及四期(TS4)睡眠、快速眼动睡眠时间(REM)、觉醒期时间(WASO)、睡眠潜伏期时间(SL)等指标。

1.7两组睡眠质量比较 睡眠质量采取匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)进行评价,该量表主要通过对患者的日间功能障碍、睡眠质量、睡眠时间、睡眠障碍及入睡时间等进行评价,总分共计18分,分数越高,患者的睡眠质量越差〔9〕。

1.8统计学方法 采用SPSS26.0软件进行χ2检验、χ2分割法及独立样本t检验。

2 结 果

2.1两组治疗效果比较 研究组治疗总有效率(95.00%;包括痊愈27例,显效20例,有效10例)显著高于对照组(83.33%;包括痊愈20例,显效10例,有效20例;χ2、U值分别为4.227、2.561,均P<0.05)。

2.2两组临床改善指标比较 治疗前,两组睡眠潜伏期、睡眠总时间及觉醒次数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组睡眠潜伏期、睡眠总时间及觉醒次数均显著改善,且研究组睡眠潜伏期、觉醒次数显著低于对照组,睡眠总时间显著高于对照组(均P<0.05),见表2。

2.3两组PI3K-AKT信号通路及GABA水平比较 治疗前,两组PI3K、AKT相对表达量及GABA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组PI3K、AKT及GABA均显著改善,且研究组PI3K、AKT显著低于对照组,GABA显著高于对照组(均P<0.05),见表2、3。

表2 两组临床改善指标及GABA水平比较

表3 两组PI3K-AKT信号通路比较

2.4两组多导睡眠监测仪指标比较 治疗前,两组TST、SE、TS1、TS2、TS3、TS4、REM、WASO、SL差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组TST、SE、TS1、TS2、TS3、TS4、REM、WASO、SL均显著改善,且研究组以上指标改善显著优于对照组(均P<0.05),见表4。

2.5两组睡眠质量比较 治疗前,两组睡眠效率、日间功能障碍、睡眠质量、睡眠时间、睡眠障碍、入睡时间及总分差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组睡眠效率、日间功能障碍、睡眠质量、睡眠时间、睡眠障碍、入睡时间及总分均显著改善,且研究组睡眠效率、日间功能障碍、睡眠质量、睡眠时间、睡眠障碍、入睡时间及总分评分显著低于对照组(均P<0.05),见表5。

表4 两组多导睡眠监测仪指标比较

表5 两组睡眠质量比较分)

3 讨 论

老年失眠表现为入睡困难、夜间醒来频繁、早醒等〔10〕,对生活质量和健康状态都会产生不良影响。统计数据显示〔11〕,老年失眠患病率高达30%～50%,其中女性比男性更容易受到影响。随着年龄的增长,人体内分泌系统和神经系统等逐渐衰退,导致身体代谢率下降、免疫力下降等问题,从而引起睡眠质量下降,老年失眠的发生率也逐渐升高。中医学中,失眠症主要表现为“不寐”“不得眠”,多由于劳神思虑过度、情志不畅等导致神失所养〔12〕。清末名医张锡纯曾提出“心神共主神明”的理念,强调心神与脑神共同维持人体情志活动。因此,治疗失眠的关键在于调节身体内部功能,而通督则是调节身体内部机能的重要途径〔13〕。

本研究采用的平衡针灸法,通过针灸的方法给患者的神经支进行有效的刺激,较为迅速对患者的中枢指挥系统进行应激性调整,同时还可以对机体的递质进行优化调控,提升患者的治疗效果。有研究通过对患者GABA水平分析显示,患者的GABA水平得到有效提升,改善递质的异常分布〔14〕。GABA是一种神经递质,在神经系统中起到抑制性调节作用,其能够结合到神经元膜上的受体上,从而抑制神经元的兴奋性〔15〕。在睡眠过程中,GABA能够降低大脑皮层的兴奋性,使人产生困倦和进入睡眠状态。因此,GABA水平的改变会导致睡眠障碍。而在本研究中,随着患者GABA水平的提升,患者的治疗效果及睡眠质量得到显著的改善。同时也有研究认为,在对患者进行平衡针灸法进行治疗过程中,可以对患者神经系统的炎性反应进行优化,通过机体的自我修复作用,进而改善局部的新陈代谢紊乱状态〔16〕。PI3K-AKT信号通路在调节神经元生长、存活和突触可塑性等方面发挥着重要作用〔17〕,该通路能够通过激活AKT蛋白激酶来促进突触形成和维持。而在老年人中,这一信号通路则会发生变化,从而导致老年失眠。首先,在老年人中,PI3K-AKT信号通路通常会受到抑制。在大脑皮层中,AKT蛋白激酶的活性下降,导致突触可塑性降低,从而影响睡眠质量。此外,老年人PI3K-AKT信号通路可能会受到一些损伤因素的影响,如氧化应激、炎症反应等,导致AKT激酶的活性下降,从而影响突触可塑性和神经元存活〔18〕。其次,PI3K-AKT信号通路还与老年失眠相关的神经递质有关,该通路能够调节多巴胺、5-羟色胺等神经递质的合成和释放〔19〕。黄攀登等〔20〕在对慢性失眠患者的治疗中,通过对PI3K-AKT信号通路的改善及治疗效果的分析,发现其呈现显著的相关性,与本研究结果一致。