胃癌与慢性萎缩性胃炎胃黏膜SLC26A9基因表达情况分析

买春阳 张 健 闫振宇

作者单位：473001 河南省南阳市中心医院

慢性萎缩性胃炎(CAG)为胃肠道常见慢性疾病之一[1]。CAG病情进展后可能发生肠上皮化生、异形增生生长、上皮细胞瘤变等情况,严重者可能恶化为胃癌,因此世界卫生组织将CAG定义为存在恶化潜能、存在癌前病变的疾病,因此临床需探索CAG恶化为胃癌的机制,并在胃癌早期诊断及时实施干预治疗,避免胃癌进一步恶化[2]。胃黏膜上皮细胞在CAG发生及进展中存在重要作用,其分化方向、稳态维持情况是CAG发生发展的起始。胃黏膜SLC26A9基因为新型多功能阴离子,在调节胃酸分泌、转运氯离子等过程中具有重要作用,其形成减少会直接导致胃壁细胞、主细胞、胃酸分泌减少以及胃腺体萎缩等情况[3],说明胃黏膜SLC26A9基因在CAG疾病发生发展中存在重要作用,对此,本次研究分析胃癌与CAG患者胃黏膜SLC26A9基因表达情况,探究胃黏膜SLC26A9基因表达情况与胃癌发生及其进展程度的相关性,先将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2019年5月至2022年5月我院收治的200例过往CAG入院复查患者,纳入标准:过往均符合CAG诊断标准;低级别瘤变组患者均经病理活检确诊为胃黏膜低级别上皮细胞瘤变[4];高级别瘤变组患者均经病理活检确诊为胃黏膜高级别上皮细胞瘤变[5];胃癌组患者均经病理活检确诊为胃癌[6];首次入院复查;未实施放化疗等治疗;临床资料完整。排除标准:存在其他恶性肿瘤病史;实施手术治疗后复发患者;合并心肺功能不全者;存在免疫系统、凝血系统疾病者。以其中69例CAG患者为胃炎组,40例胃黏膜低级别上皮细胞瘤变患者为低级别瘤变组,34例胃黏膜高级别上皮细胞瘤变患者为高级别瘤变组,57例胃癌患者为胃癌组;胃癌组中根据胃癌进展程度[7]分为早期组(n=31)和进展期组(n=26)。

胃炎组中性别(男/女):35/34例;平均年龄(37.98±5.31)岁;CAG病程平均(2.03±0.49)年;幽门螺旋杆菌感情况:感染32例,未感染37例。

低级别瘤变组中性别(男/女):22/18例;平均年龄(38.52±5.29)岁;CAG病程平均(2.94±0.62)年;幽门螺旋杆菌感情况:感染25例,未感染15例。

高级别瘤变组中性别(男/女):16/18例;平均年龄(40.90±5.35)岁;CAG病程平均(3.88±0.81)年;幽门螺旋杆菌感情况:感染23例,未感染11例。

胃癌组中性别(男/女):32/25例;平均年龄(43.21±5.32)岁;CAG病程平均(4.75±1.02)年;幽门螺旋杆菌感情况:感染42例,未感染15例。

1.2 检测方法

使用实施荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测200例患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平:(1)提取总核糖核酸(RNA):获得患者胃黏膜细胞后,放置在细胞培养液中保存,测量时除去细胞培养液,加入5 ml磷酸盐缓冲液(PBS),混匀清洗1次,以10 cm2/ml比例加入Trizol,在室温下放置5 min,进行消化裂解,裂解后于12000 rpm转速下离心5 min,取其上层清液,加入200 μl氯仿/ml Trizol混匀,在室温下放置15 min,于4 ℃下离心15 min,取上层水相按照500 μl异丙醇/ml Trizol混匀放置10 min,再次离心,取下层沉淀按照1 ml 75%酒精/ml Trizol混匀放置离心,取下层沉淀物在室温下晾晒10 min,晾晒后以30 μl焦炭酸二乙酯水溶液溶解。(2)测定O.D值:使用德国TMPLEN超微量分光光度计测量其O.D值。(3)测定定量RNA浓度:设置各样品RNA浓度均为0.2 μg/μl,体积为20 μl,经逆转录、扩增后,使用相对定量法计算其基因表达水平。

1.3 观察指标

比较胃炎组、低级别瘤变组、高级别瘤变组、胃癌组4组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平;比较早期组和进展期组2次组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平。使用logistic相关性分析模型分析胃黏膜SLC26A9基因表达水平与胃癌发生、胃癌进展程度的相关性。使用受试者工作曲线(ROC)分析胃黏膜SLC26A9基因表达水平对胃癌的诊断价值;使用ROC曲线分析胃黏膜SLC26A9基因表达水平对胃癌进展程度的诊断价值。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 4组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平比较

胃炎组、低级别瘤变组、高级别瘤变组、胃癌组4组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平均存在明显差异,且胃炎组>低级别瘤变组>高级别瘤变组>胃癌组(P<0.05),见表1。

表1 4组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平比较

2.2 2次组胃黏膜SLC26A9基因表达水平比较

早期组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平显著高于进展期组(P<0.05),见表2。

表2 2次组胃黏膜SLC26A9基因表达水平比较

2.3 相关性分析

经logistic相关性分析,胃黏膜SLC26A9基因表达水平与胃癌发生、胃癌进展程度均呈负相关(P<0.05),见表3。

表3 相关性分析

2.4 胃黏膜SLC26A9基因表达水平对胃癌发生的诊断价值分析

ROC曲线中,胃黏膜SLC26A9基因表达水平诊断胃癌发生的AUC为0.935,95%CI为0.892～0.965,敏感度为91.23%,特异度为87.41%,截断值为0.2787,见图1。

图1 胃黏膜SLC26A9基因表达水平对胃癌发生诊断价值ROC曲线

2.5 胃黏膜SLC26A9基因表达水平对胃癌进展程度的诊断价值分析

胃黏膜SLC26A9基因表达水平诊断胃癌进展程度的AUC为0.881,95%CI为0.768～0.952,敏感度为92.31%,特异度为80.65%,截断值为0.2368,见图2。

图2 胃黏膜SLC26A9基因表达水平对胃癌进展程度诊断价值ROC曲线

3 讨论

CAG为常见消化系统慢性疾病之一,若控制不当疾病恶化可能发展成胃癌,且由于胃癌早期无特异性症状,难以诊断,导致很多患者确诊时已发展至晚期,导致治疗效果及预后均不理想,因此需研究特异性指标用于诊断CAG患者胃癌发生及胃癌进展程度[8]。

SLC26家族为新发新的多功能阴离子转运家族,其中SLC26A9为跨膜蛋白,主要分布在肺泡、气管、胃黏膜上皮细胞、胃壁细胞中,主要作为氯离子转运通道、钠氯离子共转运体等,有研究表明,肺部疾病患者SLC26A9基因表达水平存在明显异常,因此分析SLC26A9基因表达水平与CAG患者胃癌发生的相关性[9]。本次研究结果中,胃炎组、低级别瘤变组、高级别瘤变组、胃癌组4组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平均存在明显差异,且胃炎组>低级别瘤变组>高级别瘤变组>胃癌组;经logistic相关性分析,胃黏膜SLC26A9基因表达水平与胃癌发生呈负相关;ROC曲线中,胃黏膜SLC26A9基因表达水平诊断胃癌发生的AUC为0.935,95%CI为0.892～0.965,敏感度为91.23%,特异度为87.41%,截断值为0.2787,提示胃黏膜SLC26A9基因表达水平与CAG患者发生胃癌密切相关,用于临床诊断CAG患者胃癌发生的诊断价值理想。原因在于,胃黏膜SLC26A9基因表达减少导致离子通道减少,影响胃黏膜细胞分化分泌,减少胃酸分泌,导致胃内酸碱度紊乱,进而导致壁细胞及泌酸腺体萎缩,引发胃壁细胞、胃黏膜组织形态学改变,发生上皮细胞瘤变等情况,进一步发展为胃黏膜高级别上皮细胞瘤变,若未得到及时控制,胃组织形态学改变进一步加重,且胃黏膜SLC26A9基因表达减少会抑制胃黏膜凋亡,并导致其过度增殖,将进一步发展为胃癌,因此胃黏膜SLC26A9基因表达水平为CAG患者胃癌发生密切相关,当其水平<0.2787时,可初步诊断为胃癌发生[10]。

CAG患者疾病恶化为胃癌后,其胃癌进展程度与治疗方案制定、患者生存时间等密切相关。本次研究结果中,早期组患者胃黏膜SLC26A9基因表达水平显著高于进展期组;经logistic相关性分析,胃黏膜SLC26A9基因表达水平与胃癌进展程度呈负相关;胃黏膜SLC26A9基因表达水平诊断胃癌进展程度的AUC为0.881,95%CI为0.768～0.952,敏感度为92.31%,特异度为80.65%,截断值为0.2368,说明胃黏膜SLC26A9基因表达水平与胃癌进展程度也存在明显相关性,可用于诊断胃癌进展程度。究其原因,恶性肿瘤发展过程中,细胞凋亡为对抗肿瘤发展的途径,胃黏膜SLC26A9基因表达会增加抑癌基因p53表达,从而促进肿瘤细胞凋亡,当胃黏膜SLC26A9基因表达减少,抑癌基因表达随之降低,导致肿瘤细胞增殖与凋亡失衡,肿瘤细胞快速增殖,使胃癌进一步发展恶化。

综上所述,胃黏膜SLC26A9基因表达与CAG患者胃癌发生、胃癌进展程度密切相关,用于诊断胃癌发生及其进展程度具有理想诊断价值,可为临床诊断提供参考依据。