巨幼细胞性贫血患者血清叶酸、维生素B12水平和骨髓细胞形态学检测及疾病严重程度的相关性

全 红

(佳木斯市中心医院检验科,黑龙江 佳木斯 154000)

巨幼细胞性贫血(MBA),又称巨细胞性贫血,其特点是红细胞数量减少,同时存在异常、发育不良的红细胞(巨幼细胞),导致其不能顺利进入到血液循环中[1]。由于大多数MBA患者多年来无症状,只有在晚期才会表现出皮肤苍白、呼吸短促和困难、头晕和疲劳等症状,因此早期诊断困难[2]。从机制上讲,叶酸或维生素B12缺乏会抑制DNA合成和诱导前成红细胞凋亡,阻碍细胞向网织细胞的转化,从而最终导致全血细胞减少,引发MBA[3]。此外,MBA的疾病严重程度也与叶酸或维生素B12水平变化存在相关性[4]。本研究探究巨幼细胞性贫血患者血清叶酸、维生素B12水平和骨髓细胞形态学检测及疾病严重程度的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料:选取2019年3月～2022年3月佳木斯市中心医院收治的巨幼细胞性贫血患者79例为研究对象。纳入标准:男性血红蛋白(Hb)水平<120 g/L,女性血红蛋白水平<110 g/L;患者临床资料完整准确,且无其他疾病;所有患者及其家属均已签署知情同意书。排除标准:合并肝肾功能损害或风湿病;伴随有肿瘤的或其他疾病如缺铁性贫血和地中海贫血;其他原因引起的贫血(失血、慢性疾病引起的贫血等);其他因素引起的溶血(免疫性溶血性贫血、药物性溶血、人工心脏瓣膜置换术)。根据患者贫血程度划分:Hb≥90 g/L为轻度贫血组(n=35);60 g/L≤Hb≤89 g/L为中度贫血组(n=20);30 g/L≤Hb≤59 g/L为重度贫血组(n=16);Hb<30 g/L为极重度贫血组(n=8)。其中,轻度贫血组男19例,女16例;年龄(57.89±5.62)岁;体重指数(BMI)(23.17±2.63)kg/m2。中度贫血组男11例,女9例;年龄(57.65±6.62)岁,BMI(23.22±1.63)kg/m2。重度贫血组男8例,女8例;年龄(56.89±5.62)岁;BMI(22.86±1.63)kg/m2。极重度贫血组男5例,女3例;年龄(56.35±5.54)岁;BMI(22.86±5.25)kg/m2。四组患者性别、年龄、BMI差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2观察指标:①检测血清叶酸、维生素B12水平:抽取所有患者外周静脉血3 ml,3 000 r/min离心,分离上清,采用化学发光法检测叶酸、维生素B12水平。②检测血涂片、骨髓涂片:两组患者行细胞形态学检测,包括外周血涂片和骨髓涂片,采用瑞氏染色,于高倍镜下观察细胞形态。

1.3统计学方法:所有数据采用SPSS24.0统计学软件采用t及χ2检验或单因素方差分析。

2 结果

2.1各组血清叶酸、维生素B12水平比较:各组血清叶酸、维生素B12水平比较发现,轻度贫血组>中度贫血组>重度贫血组>极重度贫血组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组血清叶酸、维生素B12水平比较

2.2各组血涂片情况比较:各组细胞总数、单核细胞正常形态比例比较,轻度贫血组>中度贫血组>重度贫血组>极重度贫血组(P<0.05);多分叶核中性粒细胞比例比较,轻度贫血组<中度贫血组<重度贫血组<极重度贫血组(P<0.05),其中极重度贫血组细胞总数、单核细胞正常形态比例最低,多分叶核中性粒细胞比例最高。见表2。

表2 各组血涂片情况比较

2.3各组骨髓涂片情况比较:各组原始细胞和核型异常比例比较,轻度贫血组<中度贫血组<重度贫血组<极重度贫血组(P<0.05)。见表3。

表3 各组骨髓涂片情况比较[n(%)]

2.4多元逐步回归分析:以疾病严重程度为因变量,血清叶酸、维生素B12水平和骨髓细胞形态学检测为自变量进行多元逐步回归分析,结果显示血清叶酸、维生素B12水平和骨髓细胞形态学检测是疾病严重程度的影响因素(P<0.05)。见表4。

表4 多元逐步回归分析

2.5相关性分析:结果显示,血清叶酸(r=0.654,P=0.005)、维生素B12(r=0.552,P=0.002)水平以及骨髓细胞形态学(r=0.582,P=0.004)与疾病严重程度之间存在正相关(P<0.05)。

3 讨论

MBA主要由维生素B12和/或叶酸减少引起,其特征是红细胞异常大(巨幼细胞),并与许多神经疾病有关[5-7]。巨幼细胞的特点是存在异常的核物质,这是由于核成熟和细胞质含量之间的不平衡导致的[8-9]。近期研究结果表明,维生素B12和叶酸在MBA疾病严重程度的发生和发展中发挥着关键的作用[10-11]。缺乏维生素B12会抑制蛋氨酸和腺苷蛋氨酸的合成,而这两种氨基酸都是髓鞘合成所必需的,导致恶性贫血脱髓鞘病变,且维生素B12缺乏程度越高,患者发生巨细胞增多和巨幼细胞性贫血的风险也会增加[12]。叶酸被FDA批准用于治疗因叶酸缺乏引起的巨幼细胞性贫血和巨细胞性贫血,其作为一种水溶性维生素,用于管理和治疗巨幼细胞性贫血[13-14]。本研究结果提示患者疾病越严重,机体叶酸、维生素B12水平越低。

关于骨髓细胞形态学,巨幼细胞性贫血主要表现为呈大红细胞性贫血,在骨髓内也会出现巨幼红细胞系列,观察发现,该巨幼红细胞极易在骨髓内发生一定程度的破坏,从而形成无效性红细胞生成[15-16]。对于巨幼细胞性贫血患者而言网织红细胞数量会大大降低,周围血中原始细胞数量不超过1%,骨髓内原始细胞数量则不超过5%。骨髓细胞增生正常或亢进,红系增生多较明显,环形铁粒幼细胞少见,红细胞形态异常多见[17]。此外,叶酸或维生素B12水平下降是巨幼细胞贫血最可靠的标准,如果血清水平无法获得,尤其是严重贫血,应该同时检测血清中这两种维生素,从而区分叶酸和维生素B12缺乏症[18]。

本研究提示叶酸和维生素B12参与了巨幼细胞性贫血严重程度的整个过程,叶酸和维生素B12的水平高低能通过反应巨幼细胞性贫血的发生和发展过程。并且,骨髓细胞形态能够在一定程度上能够间接反映巨幼细胞性贫血严重程度。有学者发现随着巨幼细胞性贫血严重程度的增加,血清叶酸,维生素B12水平逐渐降低,明贫血越严重,叶酸和维生素B12的水平降低越显著,骨髓细胞形态异常率越高[19],与本研究结果一致。大量研究显示,叶酸、维生素B12和骨髓细胞形态在巨幼细胞性贫血严重程度的判断中具有潜在的、重要的作用,是预防及治疗极重度巨幼细胞性贫血的新靶点[20]。然而,目前叶酸、维生素B12和骨髓细胞形态及其下游信号通路在极重度巨幼细胞性贫血中的研究尚处于初步阶段,仍需通过大量的基础及临床试验,进一步深入探讨其在极重度巨幼细胞性贫血的具体作用机制。为完善极重度巨幼细胞性贫血的发病机制提供更加重要的依据,也为极重度巨幼细胞性贫血的早期发现和防治、改善预后以及极重度巨幼细胞性贫血患者的生活质量等方面,提供新的治疗靶点及治疗手段。根据本研究结果,对MBA患者的饮食建议为:患者可每月服用1 mg维生素B12,并在饮食中添加丰富的叶酸,贫血状况以及最终的生活质量均能够得到显著改善。基于维生素B12和叶酸在提高身体和心理生活质量方面的潜在作用,建议增加食物的摄入量,以提供足够数量的这两种维生素,并对这些患者进行适当的饮食干预。

综上所述,血清叶酸、维生素B12水平以及骨髓细胞形态学与疾病严重程度之间存在一定的相关性,三者可作为疾病严重程度的预测因子。