血清Beclin1、SIRT6水平与ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后缺血再灌注损伤的关系

陈作强，李洲剑，衣帕尔古力·阿布拉，巩丽华，张慧敏

1 巴州人民医院心血管内科，新疆 库尔勒 841000；2 巴州人民医院高血压病科

近年来随着人均寿命的延长和生活饮食习惯的改变，ST 段抬高型心肌梗死（STEMI）发病率和病死率逐年增加［1］。经皮冠脉介入治疗（PCI）术是有效的梗死罪犯血管开通方法，但仍有部分STEMI 患者因PCI术后心肌血液重新灌注导致缺血再灌注损伤（IRI），严重影响患者预后［2-3］。准确预测STEMI 患者术后IRI对促进预后改善尤其重要。研究表明，心肌细胞自噬、炎症反应和氧化应激参与心肌IRI发生发展［4］。苄氯素1（BECN1）是一种自噬相关蛋白，能与多种因子相互作用促进自噬进程，其浓度与自噬强度密切相关［5］。沉默信息调节因子6（SIRT6）是一种去乙酰化酶，具有抗炎、抗氧化和促进自噬等多种作用［6］。既往实验报道，BECN1、SIRT6在心肌IRI组织中低表达［7-8］。2021年6月—2023年3月，我们探讨了血清BECN1、SIRT6 水平与STEMI 患者PCI 术后IRI的关系，以期为改善STEMI患者预后提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2021 年6 月—2023 年3 月巴州人民医院收治的150 例STEMI 患者为STEMI 组，男117 例、女33 例，年龄37～78（60.52 ± 8.45）岁；体质量指数18.84～29.27（23.30 ± 1.91）kg/m2。STEMI 组纳入标准：①符合《急性ST 段抬高型心肌梗死诊断和治疗指南（2019）》［9］标准；②临床资料完整；③患者家属知情并签署同意书；④接受PCI 治疗［10］。排除标准：①PCI 术中或术后2 h 死亡；②年龄＜18 岁；③合并其他心脏病；④既往冠心病史；⑤近3 个月内抗凝、抗炎治疗；⑥合并免疫系统损害；⑦恶性肿瘤；⑧合并神经系统疾病。另选取同期68例健康体检无STEMI志愿者为对照组，男52例、女16 例，年龄19～77（58.31 ± 10.86）岁；体质量指数18.96～27.06（22.84 ± 1.93）kg/m2；两组性别、年龄和体质量指数比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。本研究经医院伦理委员会批准（2023-01-32）。

1.2 血清BECN1、SIRT6水平检测 采集对照组体检时和STEMI患者PCI术前静脉血（3 mL），3 000 r/min离心15 min（离心半径10 cm），留取上层血清，酶联免疫吸附法检测BECN1（试剂盒购自北京伊塔生物科技有限公司，货号：YK-04628）、SIRT6（试剂盒购自武汉华尔纳生物科技有限公司，货号：WN-12037）水平。

1.3 PCI 术后IRI 判定 STEMI 患者均接受PCI 治疗，根据PCI 术后是否发生心肌IRI 分为IRI 和非IRI。参考“第三版心肌梗死通用定义”［11］标准诊断心肌IRI：①开通闭塞血管后出现心动过缓、严重低血压或频发室性期前收缩；②经药物和（或）电复律、电除颤后，仍然存在严重的室性心律失常；③冠状动脉造影显示心肌梗死溶栓治疗（TIMI）血流分级≤2 级。

1.4 统计学方法 采用SPSS28.0 统计软件。计量资料符合正态分布以±s表示，比较采用t检验；不符合正态分布以M（P25，P75）表示，比较采用U检验。计数资料比较采用χ2检验。STEMI 患者术后IRI 的影响因素采用多因素Logistic 回归分析；采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清BECN1、SIRT6 水平对STEMI 患者术后IRI 的预测价值，DeLong 检验比较曲线下面积（AUC）。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清BECN1、SIRT6 水平比较 STEMI 组与对照组血清BECN1分别为25.22（18.10，33.57）、42.20（35.75，46.43）pg/mL，SIRT6 分别为2.71（1.73，3.88）、4.96（4.28，6.11）pg/mL，与对照组比较，STEMI 组血清BECN1、SIRT6 水平降低（P均＜0.05）。

2.2 IRI 与非IRI 患者血浆CHOP、Neu5Ac 水平比较 150例STEMI患者PCI术后57例发生IRI，IRI发生率为38.00%（57/150）。不同临床资料IRI 与非IRI患者血浆CHOP、Neu5Ac水平比较见表1。以表1差异有统计学意义的项目为自变量，是否发生IRI（是/否=1/0）为因变量。多因素Logistic 回归分析显示，年龄增加（OR=1.094，95%CI：1.019～1.174）与白蛋白（OR=0.826，95%CI：0.723～0.943）、BECN1（OR=0.880，95%CI：0.830～0.933）和SIRT6（OR=0.338，95%CI：0.204～0.558）升高为STEMI 患者术后IRI的独立危险因素（P均＜0.05）。见表2。

表1 不同临床资料IRI与非IRI患者血浆CHOP、Neu5Ac水平比较

表2 影响STEMI患者术后发生IRI的多因素Logistic回归分析

2.3 血清BECN1、SIRT6 水平对STEMI 患者术后IRI 的预测价值 ROC 曲线分析显示，血清BECN1、SIRT6 水平联合（AUC=0.872，95%CI：0.808～0.921）预测STEMI 患者术后发生IRI 的AUC大于BECN1（AUC=0.782，95%CI：0.707～0.845）、SIRT6（AUC=0.783，95%CI：0.708～0.846）单独预测（Z分别为3.065、3.045，P均＜0.05）。见表3。

表3 血清BECN1、SIRT6水平对STEMI患者术后发生IRI的预测价值

3 讨论

STEMI是冠状动脉易破裂或糜烂所致急性血栓形成和/或冠状动脉严重狭窄导致的心肌缺血、坏死，并伴有心电图ST 段弓背向上的抬高，尽早进行PCI 是STEMI 患者首选梗死相关血管血运重建的方法，但有部分患者在缺血心肌重新获得血流灌注时诱发心肌损伤，即IRI，IRI 可引起微血管阻塞、慢血流/无复流等冠状动脉微循环功能障碍，加重心肌损伤，并增加心力衰竭和死亡风险［12-13］。本研究中150例STEMI 患者PCI 术后IRI 发生率为38.00%，这与国内学者报道的41.03%～62.50%相近［14-15］。分析STEMI 患者PCI 术后IRI 相关因素，对降低PCI 术后IRI发生和改善预后意义重大。

IRI病理机制复杂，涉及炎症反应、氧化应激、细胞自噬、钙离子超载、线粒体损伤等多种机制［4，16］。自噬是真核细胞在自噬相关基因调控下，利用溶酶体降解自身受损细胞器的过程，能防止细胞损伤以促进其在不利条件下存活，对维持细胞内环境稳态至关重要［17］。心肌缺血阶段，心肌细胞能激活自噬以清除死亡细胞的坏死线粒体、错误折叠蛋白等物质以发挥心肌保护作用，当自噬功能受损则会影响上述物质清除，引起过量废弃物质堆积导致心肌细胞大量死亡［18］。BECN1是酵母自噬相关基因6的一种同源物，介导自噬蛋白定位于前体结构以发挥自噬作用，因此BECN1 在自噬过程中发挥关键作用［5］。LIU 等［19］通过建立大鼠IRI 模型研究发现，BECN1 蛋白在IRI 心肌中呈低表达状态，与心肌细胞凋亡密切相关，上调BECN1 蛋白后能激活自噬，减少大鼠IRI。SUN 等［20］研究报道，上调心肌组织BECN1 表达，能促进心肌细胞自噬，进而抑制心肌炎症反应和心肌细胞凋亡，缩小IRI 后心肌梗死面积。上述研究表明，BECN1 对维持心肌细胞自噬功能、改善IRI 具有重要作用。但关于血清BECN1 水平与STEMI 患者术后IRI 的关系鲜见报道。本研究结果显示，与对照组比较，STEMI 组血清BECN1 水平降低，其升高为STEMI 患者术后IRI 的独立保护因素，说明血清BECN1 水平升高与IRI 风险降低有关。分析原因可能是BECN1 升高能促进心肌细胞自噬功能发挥，在心肌缺血再灌注阶段清除诱发心肌细胞损伤和凋亡的坏死线粒体、错误折叠蛋白等物质，维持心肌细胞功能，降低IRI发生风险［21］。

心肌缺血再灌注期间因部分细胞功能代谢和结构破坏，可激活炎症反应和氧化应激导致心肌损伤［4］。SIRT6是一种组蛋白去乙酰化转移酶，具有高度保守的NAD+结合催化结构域，不仅具备乙酰化酶活性，还在炎症反应、氧化应激、细胞自噬、能量代谢、DNA修复、衰老等多种病理生理过程中发挥重要作用［6］。YU等［22］研究报道，上调SIRT6能激活腺苷酸激活蛋白激酶/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α/蛋白激酶B信号通路，增强心肌自噬，进而减轻心肌IRI。WANG等［23］研究报道，上调SIRT6能激活内皮型一氧合酶/一氧化氮信号通路，抑制心肌氧化应激，进而减轻心肌IRI。MONTECUCCO 等［24］研究报道，上调SIRT6 能减少心肌梗死后再灌注期间中性粒细胞炎症和氧化应激，减少心肌IRI。上述研究表明，SIRT6 有助于维持心肌细胞功能，减轻IRI。但关于血清SIRT6 水平与STEMI 患者术后IRI 的关系尚不清楚。本研究结果显示，与对照组比较，STEMI 组血清SIRT6 水平降低，其升高为STEMI 患者术后IRI的独立保护因素，说明血清SIRT6水平升高与IRI 风险降低有关。分析原因可能是SIRT6 升高能通过抗炎、抗氧化和促进自噬等作用保护心肌细胞结构和功能，使其在再灌注期间不受到炎症、氧化应激等机制损伤，进而降低IRI发生风险［25］。

本研究结果还显示，年龄和白蛋白能独立影响STEMI 患者术后IRI，分析原因可能是年龄越大的STEMI 患者身体机能更差，心肌应对血流再灌注应激能力不足，因此IRI 风险更高；白蛋白作为一种抗炎、抗氧化蛋白，可能通过抗炎、抗氧化作用发挥心肌保护作用，进而降低IRI 风险［15］。目前临床尚缺乏能准确预测STEMI 患者术后IRI 的方法或指标。本研究ROC 曲线分析显示，血清BECN1 水平为19.01 pg/mL，预测STEMI 患者术后IRI 的AUC为0.782；血清BECN1水平为2.94 ng/mL，预测AUC为0.783；血清BECN1、SIRT6 水平联合预测AUC为0.872，联合预测的AUC高于BECN1、SIRT6 单独预测。说明血清BECN1、SIRT6 水平可能成为STEMI患者术后IRI 的辅助预测指标，且联合检测血清BECN1、SIRT6 水平能提升其预测价值，有利于更好地指导临床预防和降低心肌IRI，促进STEMI 患者PCI术后康复。

综上所述，STEMI 患者血清BECN1、SIRT6 水平降低，其降低与患者PCI 术后IRI 发生独立相关，血清BECN1、SIRT6水平对STEMI患者术后IRI具有一定预测价值，且二者联合的预测价值更高。但本研究结果还需前瞻性多中心研究验证。