西藏不同海拔地区藏族人群同型半胱氨酸水平

李鹏昌，邹雨桐，刘治娟，刘小星，泽吉普赤，田丽萍，吴 洁*，邱 玲*

1.中国医学科学院 北京协和医学院 北京协和医院 检验科 疑难重症及罕见病国家重点实验室，北京 100730；2.西藏自治区人民医院 检验科，西藏 拉萨 850000；3.西藏阿里地区人民医院 检验科，西藏 阿里 859000；4.西藏日喀则市桑珠孜区人民医院 检验科，西藏 日喀则 847000；5.西藏林芝地区妇幼医院 检验科，西藏 林芝 860000

同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)是一种含硫氨基酸,为腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)依赖的甲基转移途径的中间代谢产物。SAM是多条甲基转移途径的甲基供体,参与蛋白质、核酸、脂质以及氨基酸等小分子底物的甲基化过程。SAM依赖的甲基转移反应产生腺苷同型半胱氨酸随后水解为Hcy和肌苷[1]。目前关于高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)的影响因素尚没有统一定论,基于以往研究发现,年龄、性别是HHcy的重要影响因素[2]。一项中国HHcy患病情况的荟萃分析,发现北部高于中部和南部,内陆高于沿海地区,乡村高于城镇[3]。这提示高原地区藏族居民的Hcy水平以及HHcy的患病率可能在不同海拔地区存在差异。因此,本次研究主要针对藏族不同海拔地区人群进行研究分析,目前对于藏族Hcy相关研究较少,针对其血清Hcy开展进一步的研究是很有必要的。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 对象:2016年9月至2018年8月,采用整群抽样法随机抽取西藏不同海拔地区常住人群为研究对象,对其进行问卷调查。依据>500 m的海拔差,选择西藏阿里地区(海拔Ⅰ,海拔4 298～4 352 m)、拉萨市和日喀则市(海拔Ⅱ,海拔3 670～3 835 m)以及林芝市(海拔Ⅲ,海拔约2 900 m),3个海拔地区进行受试者招募,招募的受试者应覆盖城郊居民。纳入标准:年龄≥19岁,西藏本地居住>1年藏族居民,自觉身体健康,无主要器官系统严重疾病[4]。排除标准:1) 年龄、性别信息不完整或年龄<19 岁者;2) 非藏族居民。按上述排除标准排除后,共纳入受试者1 428名,年龄19～86岁,其中男性585名,女性843名。将所有入选者按年龄段分组:19～29岁(n=310)、30～39岁(n=398)、40～49岁(n=359)、≥50岁(n=362)。其中非高龄组<50岁1 066名,高龄组≥50岁362名。本研究已经获得西藏自治区人民医院伦理委员会(审批号:ME-TBHP-2017～020,021)和北京协和医院伦理委员会(审批号:S-K530)批准,所有入组志愿者均已经签署知情同意书。

1.1.2 试剂:Hcy检测试剂和校准品(利德曼公司)。

1.2 方法

1.2.1 样本检测和质量控制:采用5 mL含有分离胶的真空采血管收集志愿者空腹静脉血,静置30 min,3 500 r/min离心15 min后分离血清,于-80 ℃冻存。志愿者招募结束后,采用冷链运输方式,运送到北京协和医院检验科进行统一检测。Hcy检测原理:酶法。参照厂家说明书进行参数设置和校准。使用试剂配套室内质控品进行室内质量控制,检测项目均定期参加国家卫生健康委员会临床检验中心室间质量评价,结果均良好。

1.2.2 诊断标准:高血压诊断按照《中国高血压防治指南》推荐标准[5],收缩压(systolic blood pressure,SBP)≥140 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)和(或)舒张压(diastolic blood pressure,DBP)≥90 mmHg或既往有明确原发性高血压病史,或现在正在服用降压药物者。HHcy值界定:本研究采用Hcy≥15 μmol/L为HHcy标准。

1.3 统计学分析

采用Excel 2010建立数据库,SAS 9.4软件进行统计学分析。计量资料符合正态分布用均数±标准差表示,不符合正态分布用中位数(四分位数间距)表示,计数资料采用n(%)表示。采用Kruskal Wallis检验比较不同海拔地区、性别和年龄组间Hcy水平,使用Pearson卡方检验HHcy患病率的差异,采用方差分析不同检验指标在非HHcy与HHcy人群中的差异。

2 结果

2.1 研究对象一般资料

共1 428例符合纳入标准的藏族人群入选本研究(图1),其一般资料(表1)中1 428例藏族受试者体质指数、血糖、收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油在不同海拔地区、性别间均显示出统计学差异(P<0.05)。海拔Ⅱ地区血压、胆固醇和三酰甘油均显著高于海拔Ⅰ和海拔Ⅲ地区,血糖显著低于海拔Ⅰ和海拔Ⅲ地区。除海拔Ⅲ总胆固醇外,其余指标均呈现男性大于女性。

图1 研究对象入选流程图Fig 1 Flow chart of subjects inclusion

2.2 不同性别、年龄、地区血清Hcy分布

西藏地区不同海拔地区、性别、年龄血清Hcy分布(表2)。在不同海拔地区、性别之间血清Hcy水平有显著差异。海拔Ⅱ显著高于海拔Ⅰ和海拔Ⅲ地区、男性显著高于女性(除外海拔Ⅰ地区≥50岁组)。年龄组间海拔Ⅱ和海拔Ⅰ地区的女性组、海拔Ⅲ地区的男性组存在年龄组间差异。

表2 西藏不同海拔地区、年龄、性别血清Hcy水平Table 2 Serum Hcy levels at different altitudes, ages and genders in Tibet[μmol/L, M(P25,P75)]

2.3 不同人群高同型半胱氨酸血症患病率比较

西藏不同海拔地区、性别、血清HHcy患病率(表3)。在不同海拔地区、性别组之间血清HHcy患病率有差异。海拔Ⅱ地区显著高于海拔Ⅰ和海拔Ⅲ地区、男性显著高于女性。

表3 西藏不同地区人群HHcy患病率Table 3 Prevalence of HHcy in different regions of Tibet

2.4 各种检验指标在HHcy与非HHcy人群中的差异

受试者人群中总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、载脂蛋白B(apolipoproteinB,ApoB)、肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(urea nitrogen,Urea)、胱抑素C(cystatin C,CysC)、凝血Ⅴ因子(factor Ⅴ,FⅤ)、蛋白C(protein C,PC)、免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LD)指标HHcy组高于非HHcy组,血清叶酸(serumfolic acid,SFA)、维生素B12(vitamin B12,VB12)指标HHcy组低于非HHcy组(表4)。

表4 各种检验指标在非HHcy与HHcy人群中的差异Table 4 Differences of test indexes in non-HHcy and HHcy populations

3 讨论

HHcy与心脑血管疾病、神经系统退行性疾病、慢性肾脏疾病、不良妊娠结局、骨质疏松症、肿瘤等多种疾病的关联研究日益受到重视。本研究中,西藏藏族人群不同海拔地区、性别之间的血清Hcy水平及HHcy患病率存在差异。首先,女性的再甲基化率显著高于男性, 女性有更高的转甲基化倾向[6],因此女性HHcy患病率低于男性。同时也可能与男女性身体状况、日常生活习惯、吸烟等因素相关。其次,海拔Ⅱ地区高于海拔Ⅲ及海拔Ⅰ地区,引起这一现象的原因可能包括生活方式、饮食习惯、遗传背景等。随着旅游经济发展,海拔Ⅱ地区经济水平优于其他地区,可能导致其生活方式及饮食习惯改变,饮食结构中以肉类、奶制品、油类等为主,鱼类、蔬菜、水果等偏少,从而引起Hcy水平升高。关于遗传背景方面,亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因与Hcy水平存在相关性,地区间差异尚无报道,在今后的研究中将进行完善。中国HHcy患病率的整体估计为27.5%[7],该研究缺乏西藏地区数据。本次研究分析西藏地区整体HHcy患病率为64.0%,远高于全国平均水平,可能与地区差异相关。

研究发现在HHcy与非HHcy组间存在一些检验指标的差异。SFA和VB12参与同型半胱氨酸代谢途径中再甲基化及超硫化[8],SFA和VB12缺乏会导致Hcy代谢受阻从而蓄积,因此HHcy组SFA和VB12含量低于非HHcy组。有报道血清Hcy浓度与血清TC、LDL-C浓度相关[9],高同型半胱氨酸血症会增加固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)的表达,该蛋白是胆固醇合成的重要组成部分,导致脂质升高[10]。因此,HHcy组TC、LDL、ApoB高于非HHcy组可能与之相关。肾脏是Hcy的主要代谢场所,当肾脏的肾小球滤过率下降时易导致Hcy在体内蓄积[11],HHcy组Cr、Urea、CysC、高于非HHcy组可能与之相关。遗传性血栓形成最常见的病因是V Leiden因子和凝血酶原基因突变G20210A,抗凝血酶、蛋白C和蛋白S的缺陷发生率较低但较为严重,也是遗传性血栓形成症的原因。高浓度的同型半胱氨酸对血管壁、血小板功能和凝血因子的影响促进了促凝状态的发展[12]。HHcy组凝血V因子、蛋白C高于非HHcy组可能与之相关。本研究存在一定的局限性:西藏地区具有人群稀少、分散和流动性强等特点,标准化随机整群抽样难以展开。本研究整群选取3个海拔地区的人群进行研究,代表性如何需进一步验证。