20 354 名青岛地区人群K 抗原血清学筛选结果

范方志 刘文超 隋佳 周泽华 程聪(青岛市市立医院，山东 青岛 266071)

血液是非常珍贵的、不可再生的医疗资源，也是国家战略资源的重要组成部分[1]。 截至2023 年3 月31 日，国际输血协会(ISBT)正式命名的人类红细胞血型系统已有44 个，包括384 个可遗传的人类血型抗原[2]。 Kell 血型系统被ISBT 命名编号为006，是众多血型系统中第1 个通过抗人球蛋白试验发现的血型系统，其相应的抗体是在1 位姓Kell 的产妇血清中发现的，故被称为抗-Kell[3]。 Kell 血型抗原在胎儿出生时已经形成，其中K 抗原的抗原性和免疫原性较强，能引起严重的新生儿溶血病和严重的溶血性输血反应，在临床输血中具有非常重要的意义[4]。

Kell 血型系统在不同种族、不同民族、不同地区存在较大差异，在欧美国家中ABO、Rh 和Kell 血型系统被认为是3个最为重要的血型系统，而在中国ABO 和Rh 血型系统被视为最为重要的血型系统，这是因为在中国以黄种人(汉族)最多，K 抗原阳性频率极低，而在欧美国家以白种人(高加索人)较多，K 抗原阳性频率为9.0%，因此欧美国家将K 抗原鉴定作为献血者和患者血型检查的常规项目[5]。 在我国，由于Kell 血型系统的K 抗原频率较低，所以在国内临床输血和妊娠过程中未做常规检测，但近年来不断有报道中国人中有K 抗原存在，但限于标本量较少，代表性较差，因此我们以降低样本选择偏倚和样本量偏倚为原则，扩大检测样本范围和样本量，对青岛地区人群进行K 抗原血清学筛查，现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2023 年3—6 月在本院就诊并申请血型鉴定的患者标本16 201 份，及同期输血科发往临床的献血者标本4 153 份。

1.2 试剂与仪器 Rh/K 血型检测试剂卡(柱凝集法，Ortho-Clinical Diagnostics 公司:青岛益信医学科技有限公司，批号:RHP117J)、Vison Max 全自动血型分析仪(Ortho-Clinical Diagnostics 公司:青岛益信医学科技有限公司)、TDL-400C 医用离心机(山东百欧医疗科技有限公司)、生理盐水(华仁药业)。

1.3 方法 采用微柱凝集法:全血标本以900 ～1 000×g 离心5 min，即可得到浓度约80%的浓缩红细胞，这种离心方式可避免过度浓缩红细胞，否则会导致假阳性结果；将离心后的标本上机检测，全自动血型仪会自动将红细胞用生理盐水配成3.5%的红细胞盐水悬液；将Rh/K 血型检测试剂卡平衡至室温，装载入全自动血型分析仪，全自动血型分析仪使用自带打孔器根据指令打孔，并将10 μL 稀释后的3.5%红细胞盐水悬液加入到相应的反应孔中，将试剂卡离心后，全自动血型分析仪判读系统从微柱的正反两面判读凝集结果并拍照记录。

1.4 统计学分析 使用SPSS17.0 软件进行数据处理，采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 K 抗原检测结果 16 201 份患者标本中共检出K 抗原阳性18 份，同期输血科发往临床的4 153 份献血者标本中共检出K 抗原阳性8 份，结果如图1 所示。 26 名K 抗原阳性者中除1 名为外国人，其余25 人均为中国汉族人，具体信息见表1。

图1 微柱凝集卡K 抗原阳性结

2.2 青岛地区人群K 抗原频率 20 354 名青岛地区汉族人群K 抗原频率为0.127 7%(26/20 354)，与此前报道的部分地区汉族人群K 抗原频率略有出入(P＞0.05)，与国内报道的回族、维吾尔族及哈萨克族等少数民族有明显的差异(P＜0.05)，见表2。

表2 青岛地区人群K 抗原频率与国内其他地区人群K 抗原频率的对比

3 讨论

Kell 血型系统具有复杂的多态性，共有36 种抗原，其中5 组具有等位基因关系，分别是:K 和k；Kpa、Kpb和Kpc；Jsa和Jsb；K11 和K17；K14 和K24，Kell 血型系统中K 抗原具有较强的抗原性和免疫原性，其抗原性是RhD 抗原的1/10[10]。由于人种、地域和民族的不同，血型抗原的多态性分布也不尽相同[17]，英国人K 抗原阳性频率为9.02%、法国巴黎人为8.55%、芬兰人为4.10%、非洲裔美洲人为1.5%、日本人为0.02%[18]，在印度北部献血者中K 抗原阳性频率为5.56%[19]，最近有报道沙特阿拉伯利雅得地区献血者中K 抗原阳性频率高达14%[20]。 国内部分地区K 抗原阳性频率报道见表2，除少部分少数民族K 分布明显较汉族更高之外，陈妍等[9]报告中国南京地区汉族献血者人群K 抗原阳性频率为0.04%；包于勤等[10]报告10 057 例上海地区献血者K抗原阳性频率0.06%；与本研究青岛地区总人群阳性率(0.127 7%)略有出入(P＞0.05)。

在欧美国家，Kell 血型系统是仅次于ABO 和Rh 血型系统的第3 大血型系统[13]，在国外输血和妊娠管理中具有非常重要的意义，英国孕产妇出血管理指南中提到由这3 个血型系统抗原产生的抗体可引起胎儿新生儿溶血病和溶血性输血反应[21]。 在欧洲国家，对输血患者血型的选择有明确的分级标准，分为Ⅰ～Ⅳ4 级，大多数国家采用的Ⅱ级标准是ABO、Rh 和Kell 红细胞血型系统相合性输注，Ⅲ级和Ⅳ级标准检测血型系统更多，抗原符合率也比较高，因此产生抗体的概率也较低[22]。 抗-K 是仅次于抗-D 的人类红细胞抗体，可由妊娠和输血引起，并引发严重的新生儿溶血病和严重的溶血性输血反应，在欧美国家仅允许K 抗原阴性的血液输注给K 抗原阴性的患者，且不能单独使用对检测Kell 抗体敏感性低的手工凝聚胺法。 白种人中抗-K 是除ABO 和Rh系统以外最常见的红细胞抗体，而在中国人群中仅有几例抗-K 的报道[23-24]。 我们检出的8 名K 抗原阳性的献血者，不能排除给患者输注后产生抗-K 的可能，同时，我们检出的18 例住院患者不能排除患者痊愈后，在青岛地区乃至全国范围内成为献血者的可能。 在青岛地区同种异体输血和妊娠的过程中，可能产生抗-K 导致免疫性反应的发生，但未发现本地区有案例报道，很有可能是K 抗原检测试剂使用不足及不规则抗体筛检细胞谱缺少K 抗原而造成漏检。

K 抗原在所有人群中相对频率较低，但相对来说，白种人K 抗原频率最高，其次是黑人，最低是黄种人。 中国人以黄种人居多，K 抗原频率低，因此输血前不进行K 抗原鉴定。但随着我国稀有血型库的发展以及K 抗原检测试剂的局部使用，已经证实K 抗原在中国人群中确实存在，中国地域辽阔，民族众多，且各民族间血型差异较大，随着人口流动，人群迁徙，各民族间的通婚等都会导致Kell 血型系统K 抗原阳性率的变化。 因此我们在交叉配血或者不规则抗体筛检工作中，不能仅用可能漏检Kell 血型系统抗体的手工凝聚胺法，必须加做抗人球蛋白试验，并且配备K 抗原阳性的筛检谱细胞，通过检测避免抗-K 引起的输血反应或新生儿溶血病。

微柱凝集法检测K 抗原标准化程度高，而且奥森多公司生产的K 抗原检测试剂卡与Rh 表型检测相结合，临床输血时可选择Rh/K 最大相容性输注，可有效避免红细胞不规则抗体的产生，为临床输血安全保驾护航。 k 抗原在所有人群中都有较高的存在率，因此我们仅对K 抗原进行了血清学筛查。 本研究成果对于了解青岛地区稀有血型情况以及稀有血型库的建设、临床用血的指导，新生儿溶血病的预防等提供了数据资料，奠定了研究基础。 本次研究标本检测量高达20 354 份，是目前国内研究K 抗原检测标本量最多的，后续我们将进一步扩大样本检测量及检测范围，研究国内不同地区K 抗原阳性率，探讨在血型检测中增加Kell 血型系统的必要性，丰富青岛地区乃至全国各地Kell 血型系统群体遗传学资料。

利益冲突:所有作者均声明不存在利益冲突。