H-FABP在早期心肌梗死中的诊断价值的临床观察

单 霞，余剑波，苑 姗，吴 燕

（1.北京大学人民医院青岛医院急诊内科，山东 青岛 266111；2.北京大学人民医院急诊内科，北京 100044；3.青岛市第三人民医院心内科，山东 青岛 266000）

H-FABP具有15KD的低分子量，是广泛存在于心肌细胞的细胞质中的脂肪酸携带蛋白。研究表明，它能够调节心脏细胞中的线粒体β-氧化系统，约为心肌细胞胞质蛋白的10%，并可以在心脏损伤时被迅速释放出来。H-FABP通常被认为是AMI早期诊断，急性心肌损伤和不良临床事件的一个有前途的预测因子[1]。与其他心脏标志物例如cTnI或者CK-MB比较，H-FABP指标可以在心脏损伤后一个小时后被检测出表达水平，这为用作最早的血浆生物标志物提供了很大的潜力。此外，H-FABP被研究发现具有较高的免疫特异性，其在心肌中的表达显著多于在其他组织中[2]。有研究[3]表明，对于患者的ACS的诊断，H-FABP是比MYO和cTn更可靠的生物标志物，使得这一块的研究不再空白，然而，由于高灵敏度的肌钙蛋白（high sensitive troponin，hs TnT）检测是可行的，因此H-FABP作为心肌梗死的诊断工具是否仍有价值是值得怀疑的[4]。本研究探究H-FABP水平与常见心肌受损指标MYO，CK-MB，cTnI相关性，及其作为诊断早期AMI中的临床应用价值，旨在为AMI患者的早期诊断与治疗及预后能够提供一个良好参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取由于突然发作且持续胸闷、胸痛大于20 min未得到缓解并诊断为心肌梗死的患者合计70例为心肌梗死组，其中男39例，女31例，年龄42～83岁，平均（58.16±6.95）岁；另外选择同期体检者的健康63例纳入为健康对照组，其中男31例，女32例，年龄45～79岁，平均（58.98± 6.40）岁。1）纳入标准：所有患者均符合急性心肌梗死的诊断标准[5]；年龄＜85岁。2）排除标准：存在免疫系统疾病；伴随重度心律失常或心功能不全患者；并发其他恶性肿瘤患者；存在严重感染者以及收集的临床资料不全面患者。2组的性别、年龄、心率、血压、饮酒史、吸烟史及基础疾病（包括高血压、代谢病、高血脂）等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。具有可比性。医院医学伦理委员会已对本研究进行审核且本研究已获得批准（伦理批号：QFELL-YJ-2023-171）。所有患者家属均自愿参与配合本研究所有数据统计，并签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 样本采集 采集患者入院即刻的静脉血，每次采集分别为凝血管与生化管2管血液，待其凝固后，使用提前预冷4 ℃的离心机，以每分钟3 000转的转速离心5～10 min，使得血清分离，小心吸取上层血清并保存于-80℃冰箱且严格控温避免反复冻融，待检。

1.2.2 H-FABP、MYO、CK-MB、cTnI表达水平检测 1）对于血清H-FABP，采用南京岚煜生物科技有限公司的LS-2100型干式荧光免疫分析仪，检测方法为免疫荧光双抗体夹心法定量检测 H-FABP 的含量。以 2株高特异性、高敏感性的单克隆抗体，其中H-FABP鼠单抗1为捕获抗体，包被于硝酸纤维膜上测试区，H-FABP鼠单抗2标记成荧光微球，固定于结合垫。样本中的抗原与结合垫中的H-FABP鼠单抗2标记的荧光微球结合，复合物随后被固定在测试区上的H-FABP鼠单抗1捕获，形成荧光微球三明治结构；结合垫中鸡IgY标记的荧光颗粒复合物与固定在硝酸纤维素膜质控区上的羊抗鸡IgY结合，形成质控区。通过配套仪器对该复合物进行测量和分析，可定量检测人血中H-FABP的含量；对于血清MYO水平，使用山东济南童鑫生物科技有限公司的全自动生化分析仪，采用免疫散射比浊法的原理进行测定；对于血清CK-MB水平，使用南京贝登医疗股份有限公司的半自动生化仪，采用肌酸显色法的原理进行检测；对于血清cTnl检测，则采用微粒化学发光免疫测定法检测原理检测，其线性范围是0.01～100 ng·mL-1，临界值是0.04 ng·mL-1。以上试剂盒均购于上海斐凡信息技术有限公司，所有操作均按照各个试剂盒说明书严格在对应温度要求下执行。

1.3 统计学方法

使用美国SPSS公司的IBM SPSS.19软件进行数据结果处理，而统计图绘制则通过美国GraphPad Software公司的GraphPad Prism 8.0软件进行。所有符合正态分布存在正态性的数据以均数±标准差（±s）表示，2组间比较采用t检验。当数据单位以例、率（%）表示时，数据采用χ2进行检验。采用皮尔逊相关分析（Pearson correlation analysis）心肌梗死患者H-FABP的表达与MYO、CK-MB、cTnI表达的相关性。采用工作特征曲线（ROC）工具[6]解析所有纳入患者的血清中的H-FABP水平对AMI患者早期诊断的预测价值，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组血清MYO、CK-MB、cTnI水平比较

见表1。

表1 2组血清MYO、CK-MB、cTnI水平比较（±s）ng·mL-1

表1 2组血清MYO、CK-MB、cTnI水平比较（±s）ng·mL-1

注：与健康对照组比较，# P＜0.05

组别例数MYO水平CK-MB水平cTnI水平心肌梗死组7068.46±6.84#14.93±4.64#6.27±1.55#健康对照组6324.19±7.31 5.38±1.871.42±0.97

2.2 2组血清H-FABP表达水平比较

见表2。

表2 2组血清H-FABP表达水平比较（±s ） ng·mL-1

表2 2组血清H-FABP表达水平比较（±s ） ng·mL-1

注：与健康对照组比较，### P＜0.001

组别例数H-FABP水平心肌梗死组70 54.13±5.61###健康对照组63 2.23±0.63

表3 心肌梗死组血清H-FABP表达水平与MYO、CK-MB、cTnI的相关性

2.3 心肌梗死组血清H-FABP表达水平与MYO、CK-MB、cTnI的相关性

通过Shapiro-Wilk法进行各标记物表达水平的正态检验后得到所有标记物表达均符合正态性，通过Pearson分析来统计血液中H-FABP表达水平与MYO、CK-MB、cTnI的相关性。皮尔逊的分析的数据结果如表4显示，AMI患者血清H-FABP表达水平与MYO、CK-MB、cTnI水平之间显现出正相关性（P＜0.05）。

2.4 血清H-FABP在早期心肌梗死中的诊断价值

临床诊断结果绘制ROC曲线结果如图1所示，分析得出血清H-FABP、cTnI、MYO、CK-MB诊断的曲线下面积（Area Under Curve，AUC）分别为0.904（95%CI：0.844-0.964）、0.839（95%CI：0.763-0.916）、0.842（95%CI：0.766-0.919）、0.728（95%CI：0.631-0.826），其中H-FABP相较下利用它的水平在早期AMI诊断中，其灵敏度、特异度均高于其他任意单个生物标志物。

图1 H-FABP、MYO、CK-MB以及cTnI在早期心肌梗死中的诊断价值ROC曲线

3 讨论

根据医学技术水平以及医疗装置配备的不断快速变迁发展，不同的血液生物标记被认为是方便经济客观的结果预测工具[7]。心肌肌钙蛋白的主要亚型之一的cTnI的半寿期大约为2 h，并且损伤发生时，cTnI在血液中的水平能够保持较长时间的处于升高状态，因此以其具有诊断窗口期长的优势作为AMI的诊断标志物之一[8]。在心肌组织和亚细胞中有大量的CK-MB，近似于占血清中肌酸磷酸激酶（creatine kinase，CK）总量的5%以下，通常在cTnI升高后升高，特异度相对较高[9]。仅存在于心肌/横纹肌/骨骼肌内的MYO正常人含量很少，其具有储备和运转肌细胞的作用，而当心肌存在障碍时，细胞中的MYO会弥漫出来进入血液循环，因此当患者发生AMI时，血清中便会检测出MYO指标变化[10]。基于以上背景，本研究检测了患者的这几大特征性重要指标，发现以上几种主要标志物的表达在心肌梗死患者血液中显著上升（P＜0.05），但近年来研究发现，这些指标在其他疾病患者中也会增高。因此，寻找更加具体的标志物来联合评估AMI病人的预后具有重要意义。

目前，H-FABP的表达是检测早期和/或亚临床心脏缺血以及炎症水平的一个可能应用。血清H-FABP水平与ST段抬高AMI患者的梗死面积密切相关，由于这个原因它已潜在被视为心肌损伤加重的早期诊断生物标志物[11]。H-FABP的测量可以使血运重建手术及时进行，由于H-FABP和cTnI显示不同的释放动力学[12]，使得急诊科对H-FABP的应用补充了cTnI在排除早期胸痛患者的ACS中的使用[13]。H-FABP的表达由微小RNA miR-1调节[14]。在健康个体中，H-FABP的血清水平在个位数（ng·mL-1）的范围内[15]。在发生心肌损伤时，肌细胞里小分子量的H-FABP能够精准定位游离的细胞质，并且利用最快的速度将自己释放到体循环中，引起短暂的肌膜通透性增加，并发挥其关键作用，具备显著的特异性。H-FABP在肾脏进行消化代谢以至最终彻底清除，这解释了肾功能正常的患者的诊断窗较短[16]，正如KLEINE等[17]报道，在AMI患者出现症状后20 h内，H-FABP血浆水平恢复到基线水平，因此从长远来看，其表达甚至可以对患有其他疾病（如心力衰竭和急性肺栓塞）的患者进行风险分层。本研究检测结果显示，H-FABP水平与MYO，CK-MB，cTnI呈现正相关性（P＜0.05），能够作为一个可行的标志物为临床早期诊断与治疗提供切实有效的支持依据。