饲料中n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾幼虾生长性能和抗氧化能力的影响

吕红雨，周 越，舒 皝，王伟隆,2,3，黄旭雄,2,3*

(1.上海海洋大学，农业农村部淡水水产种质资源重点实验室，上海 201306；2.上海海洋大学，上海市水产养殖工程技术研究中心，上海 201306；3.上海海洋大学，水产科学国家级实验教学示范中心，上海 201306)

多不饱和脂肪酸(PUFA)是含有两个或多个双键的脂肪酸，其中n-3 PUFA 和n-6 PUFA 是重要的PUFA。虾体自身合成n-3 PUFA 和n-6 PUFA的能力有限，需从食物中获取来满足机体正常需求，因此，n-3 PUFA 中的主要脂肪酸(C18:3n-3、C20:5n-3、C22:6n-3)和n-6 PUFA 中的主要脂肪酸(C18:2n-6、C20:4n-6)被认为是虾类重要的必需脂肪酸[1-3]。n-3 PUFA 和n-6 PUFA 具有高度的生物活性，参与机体多种生理生化反应，如信号转导、脂质代谢、炎症反应以及细胞分裂的调节等[4-8]。研究发现，n-3 PUFA 和n-6 PUFA 的合成与分解共用相同的酶系统，n-3 PUFA 的增加将导致n-6 PUFA 的合成减少[9]。然而，n-3 PUFA 和n-6 PUFA 在生物病理炎症和受体信号调控中有着不同的作用[10-13]。因此饲料中合适的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比例对于养殖动物保持正常生长和生理状态尤为重要。在以混合油脂为脂肪源时，饲料中花生四烯酸水平(C20:4n-6)影响凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的生长性能和免疫相关基因表达，但作用效果受饲料中EPA 和DHA 水平的影响[14]。日本沼虾(Macrobrachium nipponense)生长性能在饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为1.04时有最佳表现[15]。类似的生长结果在大菱鲆(Scophthalmus maximus)[16]、许氏平鲉(Sebastes schlegelii)[17]和黄河鲤(Cyprinus carpio haematopterus)[18]中均有发现。研究还发现，饲料中较高的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值会降低虹鳟(Oncorhynchus mykiss)抗SAV-1 病毒的能力[19]。

罗氏沼虾(M.rosenbergii)由于其生长迅速，个体大、肉质好、味道鲜美，是世界上热门的养殖水产品。研究表明，当罗氏沼虾饲料中脂肪含量为5%～9%，可显著提高增重率和特定生长率[20-21]。鱼油(FO)和大豆油(SO)是水产上常用的脂肪源，随着环境保护和可持续发展的理念不断被接受，以植物油全部或部分替代鱼油是饲料研发的重要内容。然而鱼油和大豆油分别富含n-3 PUFA(如C20:5n-3 和C22:6n-3)和n-6 PUFA (如C18:2n-6)[22-23]。饲料中不同n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值是否影响及对罗氏沼虾生长性能的影响程度尚待进一步验证。本实验在保持油脂总量的基础上调整配方中豆油和鱼油的比例，配制5 组实验饲料，以探究饲料中n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾生长性能、肌肉组分、血清生化等影响，为罗氏沼虾饲料中合理使用脂肪源提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验设计与饲料制作

实验饲料配方及营养组成如表1 所示，通过改变配方中豆油和鱼油的比例调节饲料的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值，共配制5 组等氮等脂饲料。饲料原料购自浙江粤海饲料有限公司。所有原料经破碎后，过80 目筛网，按照饲料配方比例混匀后加水调成团块状，采用绞肉机挤压成面条状，于阴凉通风处晾干并制成不同规格的颗粒，抽真空密封于-20 °C 冰箱保存待用。为降低饲料制作过程中PUFA 的氧化，油脂中添加抗氧化剂(2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚，BHT)，同时以α-淀粉为糖源，以保证未经后熟化处理的实验饲料在水中有良好的稳定性。各组实验饲料的脂肪酸组成见表2。D1～D5 组饲料的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值分别为0.37、0.59、0.93、1.51 和4.38。

表1 实验饲料组成及营养水平(干物质)Tab.1 Ingredients and nutrient levels of the experimental diets (dry matter) %

表2 实验饲料脂肪酸组成(干物质)Tab.2 Fatty acid compositions of the experimental diets (dry matter) mg/g

1.2 实验虾及养殖管理

养殖实验在上海海洋大学滨海养殖基地进行，虾苗经30 d 暂养后，挑选规格整齐、健康的罗氏沼虾幼虾[平均体重(0.44±0.02) g] 800 尾，随机分配到20 个网箱(1.0 m×1.0 m×1.0 m)内，每网箱内投放40 尾幼虾。分别投喂5 组饲料，每组设4个平行。每天分别于7:00、12:00 和18:00 投喂，日投喂量约占虾体重的5%～8%，并根据摄食情况及生长阶段进行微调。养殖实验持续8 周，养殖期间每周换水2 次，每次换水量1/4。连续充气保持水体溶解氧含量＞6 mg/L，pH 为7.8～8.5，氨氮含量＜0.2 mg/L，水温为(30±2) °C，水体盐度为0。实验过程中操作人员严格遵守实验动物伦理规范，并按照上海海洋大学动物伦理委员会制定的规章制度执行 。

1.3 样品采集

养殖实验结束后，饥饿24 h，称重并统计存活数，计算增重率(WGR)、存活率(SR)、特定生长率(SGR)以及饵料系数(FCR)。每网箱随机取8尾虾，用一次性注射器从围心腔抽取血淋巴置于1.5 mL 离心管中，用消毒的镊子取肝胰腺于10 mL 离心管，将抽过血和取过肝胰腺的虾剥壳取肌肉，分别置于液氮罐和冰块中带回实验室，血淋巴解冻后低温离心(4 °C，3 500 r/min，10 min)制备血清，用于后续测定分析。各类生长指标计算方法：

式中，Wf为实验结束后网箱中罗氏沼虾的总重量(g)；Wi为实验开始时网箱中罗氏沼虾的总重量(g)；Nf为实验结束后网箱中罗氏沼虾存活的尾数；Ni为实验开始时网箱中罗氏沼虾的尾数；Wd为实验开始到实验结束网箱中所投喂饲料的干重(g)；t为养殖周期(d)。

1.4 样品检测分析

饲料和肌肉中的水分含量采用105 °C 烘箱干燥恒重法检测(GB/T 6435—2014)；总脂肪采用氯仿-甲醇法检测(GB/T 6433—2006)；灰分采用550 °C马弗炉灼烧法检测(GB/T 6438—2007)；粗蛋白质采用凯氏定氮法检测(GB/T 6432—2018)。

虾体肌肉及饲料脂肪酸组成测定采用三氟化硼甲酯化法。将虾肌肉及饲料样品冷冻干燥后，采用氯仿-甲醇(V∶V=2∶1)抽提总脂肪，加入1 mL正己烷将所得总脂溶解，加入1 mL 未甲酯化的C19作为内标，真空干燥4 h；加入2 mL 14 %三氟化硼甲醇溶液，100 °C 水浴25 min；然后加入2 mL 甲醇和2 mL 苯，100 °C 水浴25 min；再加入1 mL 蒸馏水和1 mL 正己烷，振荡混匀后3 500 r/min 离心5～10 min，取上清液，使用气相-质谱联用仪分析。以脂肪酸标准品(Sigma)的保留时间和分析图谱对样品脂肪酸进行定性分析，按内标法计算各脂肪酸的绝对含量：

式中，Cx表示某脂肪酸在样品中的含量(mg/g)；C19为内标物浓度(mg/mL)；V19为内标物加入的体积(mL)；M19为内标物甲酯分子量；S19为内标物的峰面积；Mx为某脂肪酸甲酯的分子量；Sx为某脂肪酸的峰面积；m为样品重量(g)。

血清及肝胰腺生化指标采用试剂盒测定(南京建成生物工程研究所)。将肝胰腺在冰水浴中用生理盐水按1∶9 (重量比)匀浆，匀浆液于3 500 r/min、4 °C 离心10 min，取上清液。并按照试剂盒的说明书测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、血清铜蓝蛋白、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(T-CHO)、总蛋白(TP)、葡萄糖(GLU)、蛋白酶、脂肪酶、α-淀粉酶等生理指标。

1.5 数据分析

实验结果用平均值±标准差(mean±SD)的方式表示，使用SPSS 25.0 软件中的单因素方差分析(One-Way ANOVA)分析数据的差异，当差异显著时进一步用Duncan 氏方法比较各处理之间的差异，P＜0.05 表示差异显著。脂肪酸的相关性分析采用双变量相关分析(Bivariate Correlations)。

2 结果

2.1 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾生长性能的影响

随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的升高，罗氏沼虾FW、WGR 和SGR 均先升后降，其中D3 组最高，且显著高于D1、D2 和D5 组(P＜0.05)。D3 组的FCR 显著低于D2 (P＜0.05)，但与其他组没有显著差异(P＞0.05)。饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA比值对罗氏沼虾存活率无显著影响(P＞0.05) (表3)。采用折线模型回归分析，罗氏沼虾幼虾WGR 在饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.94 时最大，而罗氏沼虾幼虾SGR 在饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.86 时最大(图1)。

图1 饲料中n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值与罗氏沼虾幼虾增重率(a)和特定生长率(b)的回归分析Fig.1 Regression analysis of n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio and the WGR (a)/ SGR (b) of juvenile M.rosenbergii

表3 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾幼虾生长性能的影响Tab.3 Effect of dietary n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio on the growth performance of juvenile M.rosenbergii

2.2 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾肌肉组分的影响

饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对虾体肌肉水分、粗蛋白质和灰分含量均无显著影响(P＞0.05)；肌肉总脂肪含量随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的增加先升后降，在D3 组达到最高，且显著高于其他组(P＜0.05) (表4)。

表4 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾幼虾肌肉常规组分的影响Tab.4 Effect of n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio on the muscular composition of juvenile M.rosenbergii %

饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾肌肉脂肪酸含量有显著影响(P＜0.05) (表5)。D5 组SFA 含量最高，并显著高于其他组(P＜0.05)；D4组MUFA 含量最高，并显著高于D1 和D2 组(P＜0.05)；随饲料 n-3 PUFA/n-6 PUFA比值的增加，罗氏沼虾肌肉n-3 PUFA 含量上升，在D5 组达到最高，并显著高于其他组(P＜0.05)；而n-6 PUFA含量显著下降(P＜0.05)，在D5 组降到最低；肌肉n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的升高而上升，在D5 组达到最高，并显著高于其他组(P＜0.05)。

表5 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾幼虾肌肉脂肪酸组成的影响(干物质)Tab.5 Effect of dietary n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio on muscular fatty acid profiles of juvenile M.rosenbergii (dry matter) mg/g

随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的上升，虾体肌肉中脂肪酸与饲料中对应脂肪酸多数呈正相关，只有C16:1n7 和ΣPUFA 呈负相关。在正相关中的相关程度也有不同，其中ΣSFA、C18:3n3 和C20:5n3呈显著相关(P＜0.05)，C18:2n6、C22:5n3、Σn-6PUFA 和n-3/n-6 呈极显著相关(P＜0.01) (表6)。

表6 饲料脂肪酸与肌肉脂肪酸的相关性分析结果Tab.6 Correlation analysis results of fatty acids in feed and corresponding fatty acids in muscle

2.3 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾抗氧化能力的影响

随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的上升，罗氏沼虾血清T-SOD 活性、T-AOC 和血清CP 含量均先升后降，其中T-SOD 活性和T-AOC 在D3 组达到最大，血清CP 含量在D4 组达到最大，与D3 组没有显著差异(P＞0.05)，但显著高于D1、D2 和D5 组 (P＜0.05)。血清MDA 含量随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值上升而增加，在D5 组达到最大，并显著高于D1、D2 和D3 组(P＜0.05)。对罗氏沼虾肝胰腺抗氧化能力的分析表明，T-SOD活性和T-AOC 分别在D4 和D3 组达到最大。MDA含量在D5 组达到最大(表7)。

表7 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾抗氧化能力的影响Tab.7 Effect of n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio on antioxidant capacities of juvenile M.rosenbergii

2.4 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾血清生化指标的影响

饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾血清TP 和GLU 含量无显著影响(P＞0.05)；罗氏沼虾血清AST 和ALT 活性均在D3 组降到最低，与D4 组无显著差异(P＞0.05)，但显著低于其他组(P＜0.05)；罗氏沼虾血清TG 和T-CHO 含量在D1组达到最大，并显著高于其他组(P＜0.05) (表8)。

表8 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾幼虾血清生化参数的影响Tab.8 Effect of n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio on serum biochemical indicators of juvenile M.rosenbergii

2.5 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾肝胰腺消化酶活性的影响

随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的增大，罗氏沼虾肝胰腺蛋白酶活性和脂肪酸合成酶活性均先升后降，在D3 组达到最大，并显著高于其他组(P＜0.05)；脂肪酶活性在D5 组达到最大，并显著高于D1、D2 和D3 组(P＜0.05)，但与D4 组没有显著差异(P＞0.05)；淀粉酶活性先降后升，在D3 组降到最低，且显著低于D1、D4 和D5 组(P＜0.05) (表9)。

表9 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾幼虾肝胰腺消化酶活性的影响Tab.9 Effect of n-3 PUFA/n-6 PUFA ratio on hepatopancreas digestive enzyme activities of juvenile M.rosenbergii

3 讨论

3.1 饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾生长性能的影响

在本研究中，饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾存活率无显著影响，但摄食D3 组饲料(n-3 PUFA/n-6 PUFA=0.93)的罗氏沼虾表现出最大的增重率和最小的饲料系数。折线回归分析表明，饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.94或0.86 时罗氏沼虾表现出最大的增重率或特定生长率，表明饲料中适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值有利于罗氏沼虾的生长。Teshima 等[24]发现饲料中C18：3n-3 与C18：2n-6 比值为0.083 时能显著提高罗氏沼虾增重率。对日本沼虾[15]和黄河鲤[18]的研究也表明，饲料中保持适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值(1.04 和1.09)也可促进其生长，提高增重率。适宜饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的实验组虾体生长性能的提高可能与脂质代谢运转的改善有关。摄食n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.93(D3 组)饲料的罗氏沼虾肝胰腺中蛋白酶和脂肪酸合成酶表现出最大的活性，表明饲料中适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值会促进罗氏沼虾对食物中蛋白质的消化和脂肪的有效沉积，而过高或过低均会使虾体消化能力和脂肪沉积能力变弱。谭青等[16]证实大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼饲料中保持适宜n-3/n-6 LC-PUFA 比例也可显著提高蛋白酶和脂肪酸合成酶活性。大量研究表明，饲料中适宜的必需脂肪酸(C18:3n-3、C20:5n-3、C22:6n-3、C18:2n-6 和C20:4n-6)可促进水产动物对营养物质的吸收利用，从而达到促生长作用[1-2,14]。而在本研究中，饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的变化实际上是由饲料中所有脂肪酸的变化所产生的。因此，推测在适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 添加量下，实验组虾体脂质代谢运转的改善可能与该组饲料满足了虾体对必需脂肪酸(C18:3n-3、C20:5n-3、C22:6n-3、C18:2n-6 和C20:4n-6)的需要量有关。低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值组的罗氏沼虾生长较差，一方面与这些实验组虾体消化能力和脂肪沉积能力变弱有关，另一方面，推测与低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的饲料处理组虾体没有摄入足够的C≥20PUFA 有关。低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值饲料组(D1 和D2)中含有高量C18 PUFA (18.6 和11.47 mg/g)和较少的C20-PUFA，高n-3 PUFA/n-6 PUFA (D5)比值饲料组中含有高量C20-PUFA (13.85 mg/g)和较少的C18-PUFA，而淡水虾由C18-PUFA向C20-PUFA 的转化能力较弱。C20-PUFA 是细胞膜重要的组成部分，饲料C20-PUFA 的缺乏影响虾体达到最大生长速率[25]。过高n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值组罗氏沼虾生长下降，除了高n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值组罗氏沼虾对食物中蛋白质消化和脂肪沉积变弱有关外，推测还与食物中的n-3 PUFA 与n-6 PUFA 竞争酶系统有关。在生物体内缺乏Δ3 脱氢酶，n-3 和n-6不饱和脂肪酸不能相互转化，且代谢是相互竞争的[9,26]，而高水平的n-3 或n-6 会抑制对方的正常代谢，影响生长性能。

饲料 n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为 0.93 时(D3 组)可促进罗氏沼虾肌肉粗脂肪有效沉积，比值过高或过低均会对罗氏沼虾肌肉粗脂肪有效沉积有明显的抑制作用，这一现象在其他养殖动物上也得到了验证[6,15-16,18,27]。本研究中D3 组罗氏沼虾肝胰腺脂肪酸合成酶活性显著高于其他组，也进一步证实饲料中适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值可促进罗氏沼虾肌肉粗脂肪有效沉积。同时，不同组罗氏沼虾肌肉中绝大多数脂肪酸的变化与其摄食饲料对应脂肪酸变化呈正相关，其中n-3 PUFA、EPA、DHA、C18:2n6 和n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值呈显著正相关，说明虾体肌肉脂肪酸组成受饲料中脂肪酸组成的影响，这在凡纳滨对虾[28]、虹鳟[29]和大西洋鲑(Salmo salar)[30]等养殖品种中都得到了证实。

3.2 饲料中不同 n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾抗氧化能力的影响

过量的氧自由基诱导产生的MDA 是判断细胞氧化损伤程度的指标。Jin 等[5]发现黑棘鲷(Acanthopagrus schlegelii)摄食高水平的n-3 PUFA 饲料会显著提高其肝脏中MDA 的浓度。相比高水平的n-6 PUFA，高水平的n-3 PUFA 更容易使细胞膜脂质过氧化的敏感性提高[31]。本研究中，高水平的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值饲料组(D5)含有高水平的n-3 PUFA (14.62 mg/g)，低水平的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值饲料组(D1)含有高水平的n-6 PUFA (16.20 mg/g)，罗氏沼虾血清和肝胰腺中MDA 含量随饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的增加而上升，表明摄食高n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值的饲料加深了虾体内氧化损伤。SOD 是内源性抗氧化防御系统的关键酶，可以保护细胞和组织免受氧化损伤[32]。T-AOC 是指机体可以清除体内产生各种氧自由基的能力[33]。血清铜蓝蛋白也具有清除体内过氧化自由基的作用[34]。在本研究中，饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.93～1.51 时肝胰腺和血清SOD 活性、T-AOC 以及血清CP 含量均达到最大。表明饲料中适宜n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值会提升罗氏沼虾抗氧化能力，过高或过低都会产生不利的影响。摄食高水平(D5)和低水平(D1和D2) n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值饲料组的罗氏沼虾抗氧化能力下降，推测可能与高水平的n-3 PUFA 或n-6 PUFA 及其比例不平衡导致的氧化应激引起的炎症反应有关。有研究表明，长期摄入过量的n-3 PUFA 或n-6 PUFA 会使虾体出现过度的炎症反应[16]，引起机体氧化应激，使细胞过氧化物酶和体脂肪氧化相关基因表达量升高，并伴随炎症水平的升高，而炎症会危害机体包括免疫和抗氧化机能的正常发挥[35]。

3.3 饲料中不同 n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值对罗氏沼虾血清生化指标的影响

AST 和ALT 是机体内重要的转氨酶，参与机体内氨基转运，肝脏中较多，但当肝脏组织发生病变造成细胞膜通透性增强时会进入到血液中[36-37]。在本研究中，饲料n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.93 时，罗氏沼虾血清中AST 和ALT 酶含量最低，表明饲料不适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA比值会增加肝胰腺细胞的损伤。Jin 等[38]在黑棘鲷中也发现，饲料中适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值会明显降低血清中AST 和ALT 的含量。摄食过高或过低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值饲料的罗氏沼虾肝胰腺细胞损伤与脂代谢运转有关。饲料中适宜的脂肪酸比例会促进脂质代谢的运转[16]，减少肝胰腺中脂肪的过度沉积，进而减少罗氏沼虾肝胰腺中细胞的损伤。

此外，当肝脏受外界因素影响发生病理或生理变化时，血清T-CHO 和TG 浓度会迅速增加[38]，因此血清中T-CHO 和TG 浓度可反映出肝脏的健康状况。在大西洋鲑[39]和大菱鲆[40]饲料中保持低水平的n-3 LC-PUFA 时，其血清中极低密度脂蛋白和甘油三酯含量显著升高。本研究也得到类似结果，低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值组(D1)的沼虾血清T-CHO 和TG 含量显著高于其他组，说明饲料低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值会影响罗氏沼虾肝胰腺的健康。摄食低n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值饲料的罗氏沼虾血清T-CHO 和TG 升高的原因可能是虾体没有摄入足够的n-3 PUFA。高含量的n-3 LC-PUFA 摄入可减少肝脏中极低密度脂蛋白和甘油三酯的分泌，促进血浆中极低密度脂蛋白和甘油三酯的清除，进而降低血清中甘油三酯和极低密度脂蛋白浓度[41]。

饲料适宜的n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值可显著提升罗氏沼虾生长性能和抗氧化能力，对增重率和特定生长率进行折线回归，建议罗氏沼虾幼虾饲料中最适n-3 PUFA/n-6 PUFA 比值为0.86～0.94。

（作者声明本文无实际或潜在的利益冲突）