外周血CC家族趋化因子配体21、CXC趋化因子受体7与阵发性房颤射频消融术后早期复发的相关性分析

朱小山，周汉云，杨峰，张红申，马可忠

作者单位：湖北文理学院附属医院、襄阳市中心医院心血管内科，湖北 襄阳441021

心房颤动（房颤）是临床常见的心律失常，会造成病人血管栓塞、心功能不全等，增加病人死亡率［1］。尽管射频消融术是一种可有效减少房颤发生的治疗方法，但临床数据［2-3］显示，射频消融术后1～5年复发率为11%～29%，我国射频消融术后总复发率约为22.9%。因此，寻找影响房颤射频消融术后早期复发的因素有助于病人长期获益。近年来研究［4］显示，炎性因子不仅促进房颤的发生、发展，还影响房颤结构重构过程。CC家族趋化因子配体21（C-C chemokine ligand 21，CCL21）是CC类趋化因子，能够趋化免疫细胞定向移动到炎症部位。Caidahl等［5］研究显示，CCL21在急性冠状动脉综合征病人血清中水平上调，高水平CCL21急性冠状动脉综合征病人主要不良心血管事件风险较高。CXC趋化因子受体7（CXC chemokine receptor type 7，CXCR7）可参与免疫反应。Zhang等［6］报道，CXCR7激活通过促进血管生成和减少心肌细胞凋亡来缓解心肌梗死后的心功能不全。基于此，现探讨CCL21、CXCR7对阵发性房颤射频消融术后早期复发评估价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 前瞻性分析2018年6月至2021年1月襄阳市中心医院收治的122例接受射频消融术治疗阵发性房颤病人，房颤持续时间≤7 d。其中男82例，女40例，年龄范围为35～64岁，年龄（50.74±8.19）岁。纳入标准：（1）符合指南中射频消融术适应证的阵发性房颤［7-8］；（2）首次行射频消融术；（3）左心房无血栓；（4）病人或其近亲属知情同意。排除标准：（1）合并严重心脏瓣膜病；（2）肝肾功能严重不全、心功能分级Ⅲ～Ⅵ；（3）有心肌梗死史；（4）左心室射血分数（left ventricular ejection fraction，LVEF）＜40%，左心房直径（left atrial diameter，LAD）＞50 mm。本研究经襄阳市中心医院伦理委员会批准同意（批号2018-0419）。

1.2 方法

1.2.1 样品采集 阵发性房颤组病人术后取静脉血5 mL，然后4 ℃，3 000 r/min条件下，离心25 min，结束后收集上层血清，保存于-80 ℃条件下，待测。

1.2.2 检测血清CCL21、CXCR7水平 采用酶联免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法检测血清中CCL21、CXCR7水平，操作步骤严格依据CCL21 ELISA试剂盒（货号7338-50，临沂艾泽拉斯生物科技有限公司）、CXCR7 ELISA试剂盒（货号XG-E990018，上海西格生物科技有限公司）进行。

1.3 收集病人一般资料 入院后，收集房颤病人基线水平临床资料，包括性别、年龄、病程、冠心病史、糖尿病史、高血压病史及超敏C反应蛋白（hs-CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、血红蛋白（Hb）、血小板计数（PLT）、白细胞计数（WBC）、胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平。用超声心动图测量病人左心室射血分数（LVEF）、左心房直径（LAD）。

1.4 射频消融术后随访 所有病人术后均服用抗心律失常药（包括美托洛尔、索他洛尔、盐酸普罗帕酮及胺碘酮），房性心动过速（房速）复发则停用抗心律失常药。在房颤病人出院后，对其随访3个月，术后2～3个月均进行心电图检查以评价房颤是否复发，判断病人是否存在术后早期复发，将病人分为早期复发组（19例）和未早期复发组（103例）。早期复发定义：12导联心电图或动态心电图捕捉到出现≥30 s的房颤或心房扑动、房性心动过速表现。

1.5 统计学方法 采用软件SPSS 25.0对数据进行分析，计数资料用例（%）表示，采用χ2检验。符合正态分布的计量资料以表示，采用t检验。ROC法分析血清hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7及二者联合检测对阵发性房颤射频消融术后早期复发的预测价值。logistic回归分析影响阵发性房颤射频消融术后早期复发的危险因素。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阵发性房颤病人临床基本资料 早期复发组、未早期复发组性别、年龄、病程、冠心病、糖尿病、高血压比较，差异无统计学意义（P＞0.05），与未早期复发组相比，早期复发组病人LAD及血清CCL21、hs-CRP、TNF-α水平较高（P＜0.05），LVEF及血清CXCR7水平较低（P＜0.05）。见表1。

表1 射频消融术治疗的阵发性房颤122例一般资料比较

2.2 血清hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7对阵发性房颤术后早期复发的预测价值分析 ROC结果显示，血清hs-CRP、TNF-α水平预测术后早期复发的曲线下面积（area under the curve，AUC）分别为0.81、0.82，血清CCL21、CXCR7水平预测术后早期复发的AUC分别为0.88、0.87，二者联合预测术后早期复发的AUC为0.94，其中二者联合预测的AUC值高于hs-CRP、TNF-α、单独预测的AUC值（Z=2.20，P＜0.05；Z=1.70，P＜0.05），二者联合预测的AUC值CCL21、CXCR7单独预测的AUC值相比，（Z=1.06，P=0.143；Z=1.31，P=0.095），见表2。

表2 hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7对阵发性房颤术后早期复发的预测价值

2.3 logistic回归分析阵发性房颤射频消融术后早期复发的影响因素 以阵发性房颤射频消融术后是否发生早期复发为因变量（未早期复发=0，早期复发=1），以LAD、LVEF、hs-CRP、TNF-α、CCL21、CXCR7为自变量（LAD、LVEF、hs-CRP、TNF-α为连续变量，CCL21＜138.36 ng/L=0，CCL21≥138.36 ng/L=1；CXCR7＞2 113.83 μg/L=0，CXCR7≤2 113.83 μg/L=1），进行logistic回归分析，结果显示，高LAD值、CCL21≥138.36 ng/L、CXCR7≤2 113.83μg/L是阵发性房颤射频消融术后早期复发的危险因素（P＜0.05），高LVEF值是阵发性房颤射频消融术后早期复发的保护因素（P＜0.05）。LAD每增加1 mm，病人术后早期复发风险增加1.675倍，LVEF每升高1%，病人术后早期复发风险降低0.622倍，CCL21≥138.36 ng/L病人术后早期复发风险是CCL21＜138.36 ng/L病人1.764倍，CXCR7≤2 113.83 μg/L病人术后早期复发风险是CXCR7＞2 113.83 μg/L病人1.655倍（表3）。

表3 logistic回归分析阵发性房颤射频消融术后早期复发的影响因素

3 讨论

房颤的发生机制比较复杂，其病理基础是心房基质的纤维化，左心房结构重构，进而引起心房扩大、心肌间质纤维化，这一过程涉及多种炎症反应、氧化应激反应［9-10］。临床研究［11］显示，炎性因子是心房纤维化的启动因子，炎症可刺激心房纤维化的多种成分，促进成纤维细胞增殖、迁移并向肌成纤维细胞转化。因此寻找炎性因子与房颤射频消融术后早期复发的相关性，降低房颤射频消融术后早期复发率，对提高房颤病人术后生活质量具有重要意义。

CCL21属于CC型趋化因子家族，主要表达于淋巴管、内皮小静脉及淋巴结的T细胞区域及基质细胞内，位于染色体9q13上，其序列与其他CC型趋化因子有21%～32%的相似性。在体内，CCL21需要结合趋化因子受体7（CCR7）才能发挥趋化作用；CCL21/CCR7广泛表达于内皮细胞、平滑肌细胞及纤维细胞等非淋巴细胞组织，并参与炎症调节、平滑肌细胞增殖等生物学效应［12］。成熟的树突状细胞具有分泌CCR7功能，CCL21与成熟的树突状细胞可相互作用，诱导炎性反应形成，参与体液免疫应答［13］。CCL21可通过调控炎症反应而造成冠状动脉粥样硬化斑块不稳定，诱导急性心肌梗死发生［14］。本研究发现早期复发组病人血清CCL21水平明显高于未早期复发组，且ROC结果显示，血清CCL21水平预测阵发性房颤病人术后早期复发的AUC为0.88，灵敏度为89.50%，特异度为90.30%，提示CCL21可能对阵发性房颤病人术后早期复发有预测价值。

CXCR7位于染色体2q37上，广泛表达于内皮细胞、T细胞、B细胞、树突状细胞及肿瘤细胞中，在调节机体免疫、血管生成及肿瘤的器官特异性转移中扮演关键角色［15］。近年来新发现CXCR7是CXC型趋化因子配体12（CXCL12）的新受体，CXCR7与CXCL12特异性结合，在机体肺、心、肝脏等中广泛存在，可调控许多重要的生物过程，例如细胞增殖，侵袭，迁移及黏附［16］。Shen等［17］研究显示，过表达的CXCR7可通过调控Wnt/β-Catenin通路抑制人脐静脉内皮细胞纤维化。Zhang等［18］研究报道，CXCR7高表达可抑制心肌梗死小鼠体内炎症反应及巨噬细胞迁移至损伤部位，并改善心肌梗死后心肌损伤。本研究发现，早期复发组病人血清CXCR7水平较未早期复发组低，且ROC曲线显示，血清CXCR7水平预测阵发性房颤病人术后早期复发的AUC为0.87，提示CXCR7可能对阵发性房颤病人术后早期复发有一定预测价值，猜测CXCR7可能通过调控阵发性房颤病人术后心肌纤维化或心肌损伤而影响房颤早期复发。TNF-α参与机体炎症及免疫反应，心房细胞传导阻滞与离散度增加与房颤的发生息息相关，而过程是通过TNF-α介导炎症应激反应，影响心房传导［19］。CCL21联合CXCR7预测阵发性房颤病人术后早期复发的AUC为0.94，灵敏度为84.20%，特异度为95.10%，高于hs-CRP、TNF-α单独预测阵发性房颤病人术后早期复发的AUC，提示CCL21联合CXCR7可提高预测阵发性房颤病人术后早期复发的价值。临床上接受射频消融术治疗的房颤病人出院后，复诊时，应检测病人血清CCL21、CXCR7水平，早期评估病人射频消融术治疗后临床结局。以往研究［20］报道，年龄、房颤病程、LAD、LVEF等因素影响心房颤动病人射频消融术后复发。本研究logistic回归分析，LAD、CCL21≥138.36 ng/L、CXCR7≤2 113.83 μg/L是阵发性房颤病人术后早期复发的危险因素，高LVEF值是阵发性房颤射频消融术后早期复发的保护因素，表明除LAD、LVEF外，CCL21、CXCR7也影响阵发性房颤病人术后早期复发，提示CCL21水平越高、CXCR7水平越低，阵发性房颤病人射频消融术后早期复发的风险越高。