血清SCC M-CSF Chemerin水平对宫颈上皮内瘤变患者诊断评估价值

孙 莉, 宋玉荣, 胡 频, 傅柳陶

(安徽医科大学第二附属医院, 安徽 合肥 230001)

宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)是宫颈癌的癌前病变,高危型HPV感染是引起本病的重要因素之一。多数CIN患者无特异表现,部分患者可出现白带异常、宫颈糜烂等症状和体征[1]。阴道镜、病理学检查是临床诊断CIN的主要方法,但阴道镜检查受到操作人员的主观因素影响较大,可能出现误诊或漏诊。病理检查客观性强,但获取标本时属于有创操作,患者的依从性较差。而血清实验室检查具有标本获取简便、创伤小、结果较客观等优点,在CIN的诊断中具有重要价值,但目前对于最佳血清学诊断指标尚无统一认识[2]。鳞状细胞癌抗原(Squamous cell carcinoma antigen,SCC)是鳞状上皮细胞膜产生的特异性肿瘤抗原,在宫颈癌前病变期即出现异常表达[3]。巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony stimulating factor,M-CSF)具有多种生物学功能,参与多种恶性肿瘤的发生、发展[4]。趋化素(Chemokinin; diagnosis,Chemrin)是一种脂肪因子,可促进肿瘤细胞生长、增殖[5]。本研究探讨CIN患者血清SCC、M-CSF、Chemrin的变化及其对CIN的诊断价值,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料:选取我院2019年4月至2022年4月经病理学检查确诊的101例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者作为CIN组、同期经病理学检查证实为早期宫颈癌患者50例作为宫颈癌组,两组患者的基线资料比较,差异无统计学意义,具有较好的均衡性和可比性,详见表1。纳入标准:①本研究诊断的早期宫颈癌患者、CIN患者诊断标准参考《宫颈癌及癌前病变规范化诊疗指南(试行)》[6]中的标准;②年龄19～59岁;③CIN患者及早期宫颈癌患者均经过取宫颈组织进行病理学活检证实,宫颈癌均为原位癌,病理学类型为鳞癌或腺癌;④本研究相关检查实施前获得研究对象的知情同意并签署相关协议书,保护研究对象的隐私。排除标准:①近3个月使用免疫抑制剂;②放化疗病史;③宫颈环切手术病史;④合并其他类型恶性肿瘤患者;⑤伴有生殖系统及泌尿系统其他病毒感染;⑥HIV感染。

表1 两组研究对象的基线资料情况

1.2血清指标检测:在手术前、手术后3个月时抽取患者空腹状态下静脉血标本3mL,室温静置0.5h后离心处理。离心机参数:转速4000r/min,离心半径6cm,离心时长10min。取血清采用酶联免疫吸附法检测血清SCC、M-CSF、Chemerin水平,试剂盒为美国雅培公司产品。检测仪器:罗氏E170全自动电化学发光免疫分析仪。

1.3HR-HPV病毒载量检测:于患者入院时采用专用细胞采集器采样,将配套刷子置于宫颈口,均匀用力旋转5周,取样后置于试管中,采用第二代杂交捕获技术定量检测HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型等13种HPV-DNA病毒载量。检测仪器:美国Digene公司DML2000基因杂交信号扩大仪。标准阳性对照临界值(CO)的比值(RLU/CO)表示样本中HPV-DNA含量,检测值≥1为阳性。

1.4手术方法:CIN患者于月经干净后3～7d后接受利普刀手术治疗,术前至少7d禁止性生活,嘱患者术前排空膀胱,向宫颈周围注射2%利多卡因行宫颈周围局部麻醉。患者取膀胱截石位,常规消毒铺巾,置入阴道镜至宫颈,镜下观察病灶。采用碘染宫颈,宫颈部位涂抹碘伏,棕色为正常区域,芥末黄色或不着色为病变区域。置入利普刀,设置功率30～40W。对病变部位外缘3～5mm由内向外行逆时针椎切,椎切深度为15～20mm,创面电凝止血。切除组织送病理检查。

2 结 果

2.1CIN组和宫颈癌组患者的SCC、M-CSF、Chemerin测定值比较:宫颈癌组患者的血清SCC、M-CSF、Chemerin测定值显著高于CIN组患者,差异具有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 CIN组和宫颈癌组患者的SCC M-CSF Chemerin测定值比较

2.2SCC、M-CSF、Chemerin鉴别诊断CIN的价值:以病理学结果作为诊断金标准,以患者病理学结果是否CIN作为状态变量(否=0、是=1)血清SCC、M-CSF、Chemerin测定值绘制ROC曲线,SCC、M-CSF、Chemerin鉴别诊断CIN的ROC曲线下面积分别为0.906、0.846、0.791,见图1、表3。

图1 SCC、M-CSF、Chemerin鉴别诊断CIN的ROC曲线

表3 SCC M-CSF Chemerin鉴别诊断CIN的诊断价值

2.3不同分期的CIN患者SCC、M-CSF、Chemerin测定值比较:经病理学检查,101例CIN患者中有Ⅰ期患者21例、Ⅱ期患者46例、Ⅲ期患者34例,随着CIN分期的增高,患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平逐渐增高,各组之间差异具有统计学意义(P<0.05);表4。

表4 不同CIN分期的CIN患者SCC M-CSF Chemerin测定值比较

2.4不同HR-HPV DNA的CIN患者SCC、M-CSF、Chemerin测定值比较:HR-HPV DNA阳性CIN患者的SCC、M-CSF测定值高于阴性组患者,各组之间差异具有统计学意义(P<0.05);HR-HPV DNA阳性与阴性患者的Chemerin水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表5。

表5 不同HR-HPV DNA的CIN患者SCC M-CSF Chemerin测定值比较

2.5CIN患者手术前后的SCC、M-CSF、Chemerin测定值比较:在手术后3个月,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin测定值均降低,差异具有统计学意义(P<0.05),见表6。

表6 CIN患者手术前后的SCC M-CSF Chemerin测定值比较

3 讨 论

宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一,世界卫生组织的调查发现,每年约有宫颈癌新增病例53万,中国的新发病例数约占全球总数的29%[7]。HPV感染是引起宫颈上皮内瘤变的危险因素,其中以HPV16、18最为常见,被称之为高危型HPV感染。HPV感染后首先累及复层鱗状上皮中的基底细胞,逐渐累及上层细胞而致感染到达基底层,引起复层鳞状上皮细胞异常分化而致恶变[8]。基础研究发现,宫颈癌的发生历经癌前病变、早期浸润、浸润癌等三个阶段。在癌前病变阶段早期诊断和治疗可有效控制或逆转病情,避免进展至宫颈浸润癌[9]。目前临床仍在不断探索CIN的早期诊断方法。

血清学检查取样方便,结果相对客观,还能避免因视野局限或取样位置不准确等造成的漏诊或误诊。因此血清学检测已成为临床诊断CIN的新的研究热点[10]。SCC是存在于子宫、肺、头颈部等部位鳞状上皮细胞的一种糖蛋白,在上述部位的鳞状上皮细胞发生恶变后,SCC大量释放至血中,因此血清SCC水平可作为鳞状细胞癌的特异性诊断指标之一[11]。M-CSF具有多种生理功能,低水平时能抑制肿瘤细胞生长,高水平时可促进肿瘤细胞侵袭和转移[12]。Chemerin可活化G蛋白耦联受体,诱导免疫细胞向肿瘤区域迁移,参与肿瘤细胞免疫反应以及肿瘤细胞增殖过程,可反映肿瘤细胞增殖情况。

本研究发现,宫颈癌组患者的血清SCC、M-CSF、Chemerin测定值显著高于CIN组患者。SCC、M-CSF、Chemerin鉴别诊断CIN的ROC曲线下面积分别为0.906、0.846、0.791。上述结果提示,与宫颈癌患者相比,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin测定值更低,可将上述指标作为CIN的鉴别诊断指标。这是由于宫颈癌患者鳞状上皮细胞的破坏程度大于CIN,因此宫颈癌患者血中SCC水平相对更高。HPV除了会直接引起宫颈癌细胞增生外,还会激活体内M-CSF,共建一个自分泌环,促使CIN向宫颈癌进展,因此M-CSF高表达与宫颈癌的发生密切相关。宫颈癌患者病灶局部应激性免疫反应增强,Chemerin被异常激活而在局部组织和血中高表达。

根据细胞非典型增生程度可将CIN分为3级,Ⅰ期患者病情相对较轻,并可能自愈。Ⅱ期-Ⅲ期患者病情相对较严重[13]。本研究发现,101例CIN患者中有Ⅰ期患者21例、Ⅱ期患者46例、Ⅲ期患者34例,随着CIN分期的增高,患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平逐渐增高。HR-HPV DNA阳性CIN患者的SCC、M-CSF测定值高于阴性组患者。该结果提示,CIN分级较高者血清SCC、M-CSF、Chemerin水平更高;HR-HPV DNA阳性CIN患者的SCC、M-CSF水平更高。这是由于CIN分期较高者异型细胞所占比例较大,核分裂相增多。HR-HPV DNA阳性者属于高危感染,以HPV-16、18最常见,鳞状上皮细胞恶变程度以及局部肿瘤细胞免疫反应更加严重。

利普刀手术是临床处理CIN的常用方法,本研究发现,在手术后3个月,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin测定值均降低。该结果提示,利普刀对CIN具有良好的治疗效果。手术后鳞状上皮细胞恶变的组织被切除,局部病毒载量下降,肿瘤细胞免疫反应减轻,因此SCC、M-CSF、Chemerin水平会显著降低。

综上所述,与宫颈癌患者相比,CIN患者的SCC、M-CSF、Chemerin测定值更低,但是随着CIN分级增高、HR-HPV DNA阳性表达患者的SCC、M-CSF、Chemerin水平更高,检查SCC、M-CSF、Chemerin水平能鉴别诊断CIN与宫颈癌。