内服益生菌对南美白对虾生长及体成分营养指标的影响

谢全森　栗建军　王晓宁　李岁艳　郭少华　孙彩娟　梁合文　周栋

摘 要：为研究饲料中添加不同浓度益生菌制剂后对南美白对虾（Penaeus vannamei）生长、体成分及营养指标的影响，采用单因子变量法设计4个组，益生菌制剂（主要成分为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌复合物、乳酸菌以2∶1∶1的比例的混合发酵液）占饲料的重量分别为100、200、300、0 g/t，对南美白对虾（平均初始质量均为5.50 g）进行饲喂试验。结果显示，8周后，添加益生菌的试验组对虾体质量、成活率及虾体粗蛋白、粗灰分、粗脂肪含量均显著高于对照组，并且在益生菌浓度梯度处于200 g/t饲料时，对虾体各项指标的增长最为显著。结果表明内服益生菌对于南美白对虾体成分营养指标具有显著影响。

关键词：益生菌；南美白对虾（Penaeus vannamei）；营养指标

益生菌通过定殖于水产动物宿主的肠道，加快宿主对其体内的营养物质的吸收利用，提高宿主机体免疫力和肠道菌群结构平衡[1-3]。相关研究显示，使用益生菌复合产品对南美白对虾进行饲喂，可提高酶活、非特异性免疫指标提高以及生长性能[4-6]。

南美白对虾（Penaeus Vannamei）肉质肥美、养殖成活率高、生长周期较短，倍受人们喜爱。养殖过程使用抗生素类药可用于防治病害，但对食物链带来极大风险[7]。以益生菌产品对对虾进行饲喂的方法，不仅可以提高产量，而且对水产养殖水体水质具有一定的净化作用，并且不会产生抗药性。目前，国内外对使用益生菌制品在鱼类、虾类等水产养殖方面均有研究，显示其可促进生长和降低病害[8]。

基于此，本研究拟通过对南美白对虾进行不同浓度梯度的益生菌（益生菌为100、200、300、0 g/t饲料）饲喂后，对南美白对虾的虾体成分以及营养指标进行初步研究，以期为益生菌对生物的影响研究提供参考依据，也为对虾养殖饲喂益生菌提高养殖效益的技术应用前景提供基础。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验研究材料 试验所用南美白对虾均来自邯郸水产养殖场。益生菌为商品制剂（生产厂家：云南陆良生物科技有限公司），通过使用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌复合物、乳酸菌三种菌按一定配比制备而成的混合发酵液。

1.1.2 试验仪器 快速水分含量测定仪、索氏抽提器、凯氏定氮仪、瓷坩埚、电炉、干燥器、马福炉、分析天平、滴定管、脱脂滤纸。

1.1.3 试验药品 盐酸、硼酸、氢氧化钠、无水乙醇、石油醚、硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸。

1.2 试验设计

采用单因子变量法设置试验，对照组使用基础饲料饲喂对虾，试验组在基础饲料中添加益生菌对南美白对虾进行饲喂，对照组和试验组内的对虾均在生态缸中进行培养，经过8周生长试验之后，检测对照组及三个浓度益生菌下试验组内南美白对虾的生长状况及营养成分变化。

1.3 益生菌的选用及制备

选用的益生菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌复合物、乳酸菌三类菌通过2∶1∶1的比例混合发酵制成的益生菌商品制剂。综合益生菌商品制剂的功效可得，将枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌复合物添加入饲料内，能够增加水生动物的肠道蛋白消化酶活性及酶的数量，在一定程度上可以起到降低对虾对于饲料需求量的作用，可以节约资金；并且可以降低有害细菌的繁殖速度，从而减少疾病发生率。另一方面，芽孢杆菌具有较为稳定的特性，加入饲料中可以对饲料作用，分解多余物质，从而净化养殖水体水质[7，9]。将乳酸菌添加进入饲料内，可以提高生物体的消化作用，从而提高对于饲料的利用率[10]。另一方面，乳酸菌可改善生物体肠道内环境，增加生物体系统免疫能力。

1.4 南美白对虾的养殖及饲喂

1.4.1 分组及南美白对虾放养 在实验室的生态养殖缸中进行的。生态养殖缸所用水源为邯郸本地的自来水，经曝气处理后使用。共20个生态缸。每周进行一次养殖水体的更换，换水量为生态养殖缸水体的1/4。养殖过程中，通过加热装置使温度保持在 25 ℃左右。试验选用健康强壮的南美白对虾300尾，试验前进行7 d的暂养。虾的放养量为15尾/箱，按照单因素试验，设4组，每组5个重复，每个重复15尾虾，共计300尾。

1.4.2 南美白对虾的饲喂 设3个试验组（分别标号为A、B、C）和1個对照组（标号为D），对3个试验组中的南美白对虾投喂益生菌，益生菌添加浓度梯度分别为添加水平100、200、300 g/t饲料；日投喂量为在池虾体总体重的3%范围内。每日进行2次饲喂。对照组饲喂基础饲料，其他条件均一致。试验持续8周，采用人工少量多次的方法进行饲喂，使得缸内对虾能够较大程度利用饲料。每2周进行1次虾体称重，调整日投喂量。为保证对虾体质量无较大偏差，因此称重前1 d禁食。

1.5 相关指标测定方法

8周生长试验结束后，对于试验所用的南美白对虾进行24 h的空腹处理后，每组从每个鱼缸中随机取样3尾合并测定，计算平均数。称重计数各虾体的重量及长度，虾体内基本营养成分测定：水分含量使用快速水分含量测定仪测定，粗脂肪含量使用索氏抽提法测定[11]，粗蛋白含量按照凯式定氮法测定[11-12]，粗灰分使用干式灰化法[11-12]，虾体的前处理采用盐酸水解法。

测定粗脂肪计算公式：

式中：X为试样所含粗脂肪的量，％；m1为脂肪和脂肪烧瓶的总单位质量，g；m2为脂肪烧瓶的总单位质量，g；m为样品的质量，g。

蛋白质含量计算公式：

式中：X为试样中蛋白质的平均含量，g/100g；V1为样品滴定耗费盐酸国际标准水溶液体积，mL；V2为真空滴定耗费盐酸标准水溶液容积，mL；c为盐酸的滴定溶剂含量大小，mol/L；m为样品的质量，g；F为将氮原子转化为蛋白质的过程系数。

1.6 数据统计方法

计算试验前后南美白对虾平均体质量及试验末存活率，使用Excel进行统计和分析内服益生菌前后南美白对虾体内水分含量、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪含量等指标的变化规律。用SPSS26.0统计软件使用单因子方差分析（One-way ANOVA）的方法，分析内服益生菌前后南美白对虾体内水分含量、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪含量等指标的显著性变化，并对不同试验组的组间差异进行多重比较分析，且在P＜0.05时认为差异显著。

2 结果和分析

2.1 南美白对虾体质量及存活率分析

南美白对虾的体质量情况可以初步反映出对虾的生长发育、健康情况，在进行试验前对照组及益生菌浓度梯度为100、200、300 g/t饲料的试验组内南美白对虾的初始体质量各组之间并无显著性差异（P＞0.05），见表1。对比分析各组间终末体质量及增重量可得出，在益生菌浓度梯度为200 g/t饲料的试验组中南美白对虾的体质量增长最快；对照组与浓度梯度为100 g/t益生菌饲料试验组无显著性差异（P＞0.05），而与益生菌浓度梯度为200、300 g/t饲料的试验组有显著性差异；且益生菌浓度梯度为200 g/t饲料的试验组终末体质量和增重量均高于300 g/t饲料的试验组。因此在益生菌浓度大于200 g/t饲料时对于南美白对虾体质量增长有影响，并且在益生菌浓度为200 g/t饲料时，效果最为显著。分析比较各组间存活率的关系可以发现，饲喂益生菌对于虾体存活率有一定提高，并且在益生菌浓度为200 g/t饲料时南美白对虾的存活率最高。

2.2 饲喂益生菌对虾体粗灰分含量影响分析

粗灰分主要是南美白对虾虾体饲料、虾体组织、虾体排泄物等样品经高温焚烧过后剩余的氧化残渣[13]。根据表2对比分析对照组及益生菌浓度梯度为100、200、300 g/t饲料的试验组可得，对照组与三个试验组间均存在显著性差异，因此饲喂益生菌可以增加南美白对虾虾体粗灰分含量，并且益生菌浓度为200 g/t饲料的试验组显著高于100 g/t试验组和对照组（P＜0.05），而在益生菌浓度为200 g/t饲料和300 g/t饲料时无显著性差异（P＞0.05），因此，在益生菌浓度达到200 g/t饲料时，南美白对虾体内粗灰分含量达到最大值。

2.3 饲喂益生菌对虾体粗脂肪含量影响分析

脂肪是一种重要营养指标，可以很好地表示动物体的营养状况[14]。根据表2对比分析可得，对照组与三个浓度梯度的试验组之间均存在显著性差异（P＜0.05），因此可得出，饲喂益生菌对于南美白对虾体的粗脂肪含量具有显著效果，而益生菌浓度为100 g/t饲料和300 g/t饲料的试验组之间无显著性差异（P＞0.05），因此，对于虾体粗脂肪含量的增长而言，饲喂益生菌浓度达到200 g/t饲料时具有更优的效果。

2.4 饲喂益生菌对虾体粗蛋白含量影响分析

据表2对比分析，益生菌浓度为200 g/t饲料时虾体粗蛋白的增长量最高，益生菌浓度为200 g/t饲料时虾体粗蛋白的增长量次之。因此，饲喂益生菌制剂能够增加虾体粗蛋白含量。

2.5 饲喂益生菌对虾体水分含量影响分析

据表2对比分析可得，对照组及各益生菌浓度梯度的试验组之间虾体水分含量均无显著性差异（P＞0.05），因此对于南美白对虾而言，饲喂益生菌对于南美白对虾体内水分含量变化不显著。

3 讨论

3.1 益生菌对对虾体质量增长的影响

本试验研究发现，在饲喂益生菌后对于南美白对虾的体质量有显著增长趋势，并且，当益生菌浓度为200 g/t饲料时体质量增长状况最为显著，300 g/t饲料次之；对比以往[15-17]的研究可得，饲喂益生菌商品制剂对于对虾体质量增长影响较显著，与前人研究结果均吻合，无较大差异。因此，饲喂益生菌相关产品可以促进南美白对虾体质量增长。

3.2 益生菌对于虾体营养指标影响

本试验研究发现，在饲喂益生菌后对于南美白对虾的营养指标具有显著提升，对于有机质、蛋白质等虾体成分也有明显增长，除水分含量之外，粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、体质量、存活率等指标含量均有显著增长。并且，对于虾体的粗脂肪含量而言，益生菌浓度200 g/t饲料最好，300 g/t饲料次之；而对于虾体粗蛋白含量而言，益生菌浓度200 g/t飼料最好，100 g/t饲料次之。根据本研究结果显示，在益生菌浓度为200 g/t饲料时对于虾体各营养指标效果最显著，基于本试验仅参考相关文献做出设置，效果更显著的益生菌浓度区间可能会更具体。本研究结果与以往研究结果基本一致，饲喂益生菌产品可以显著促进南美白对虾体内各营养指标的变化[18-20]。

3.3 益生菌浓度及种类对虾体的影响

本研究使用的益生菌菌种为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌复合物、乳酸菌三类，可能使用不同的菌种对于南美白对虾体营养指标含量的增加会有不同。并且不同的益生菌浓度对于饲喂南美白对虾之后产生的影响会有不同[12，20]。本研究通过参考文献及相关研究，仅设置100、200、300 g/t饲料这三个益生菌浓度梯度，对于不同营养指标的最适益生菌浓度区间还有待进一步研究。

4 结论

本研究表明，在饲喂益生菌浓度梯度为100、200、300 g/t饲料后对虾体质量具有显著增长，并且在益生菌浓度为200 g/t饲料时体质量增长最为显著；虾体粗蛋白含量也具有显著的增长，在益生菌浓度为200 g/t饲料时虾体粗蛋白含量增长最为显著；同样，虾体粗灰分、粗脂肪含量也同样在饲喂益生菌之后具有显著的增长，并且在益生菌浓度为200 g/t饲料时增长最为显著。因此，可得出结论，饲喂益生菌后南美白对虾的营养指标具有显著性的增长，有待商榷的是，不同益生菌浓度对于南美白对虾营养指标具有的影响不同，本研究表明最适于南美白对虾体营养指标增长的浓度为200 g/t饲料。

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The effect of dietary probiotics on growth and nutritional indexes of body composition of Penaeus vannamei

XIE Quansen1， LI Jianjun2， WANG Xiaoning2， LI Suiyan2， GUO Shaohua2， SUN Caijuan2， LIANG Hewen2， ZHOU Dong2

（1.College of Life Science and Engineering，Handan University，Handan 056005，China;2.Handan Fisheries Technology Promotion Station，Handan 056005，China）

Abstract：In order to understand the effects of probiotics in feed with different concentrations on growth， body composition and nutritional indexes of the shrimp Penaeus vannamei，four groups were designed by single factor variable method. The probiotics （mainly composed of Bacillus subtilis，B. licheniformis complex and lactic acid bacteria in the proportion of 2：1：1） accounted for 100，200，300 g/t and 0 g/t of the feed. The feeding experiment was conducted on the shrimp （with the average initial mass of 5.50 g/ind.）. After 8 weeks of growth，the results showed that the body weight，survival rate，crude protein，crude ash and crude fat content of shrimp in the experimental group with probiotics were significantly higher than those in the control group，and the growth indexes of shrimp was the most significant when the concentration gradient of probiotics was 200 g/t in feed. The results indicated that probiotics had a significant effect on the body composition and nutritional indexes of Penaeus vannamei.

Key words：probiotics; Penaeus vannamei; nutritional indicator

（收稿日期：2023-05-17）

作者简介：谢全森（1983-），男，博士，副教授，研究方向：水产动物营养生理生态学。E-mail：xiequansen@163.com。

通讯作者：栗建军（1963-），男，本科，研究员，研究方向：水产养殖。E-mail：china.ljj@163.com。