复方中草药对许氏平鲉幼鱼生长和非特异性免疫酶活性的影响

玄一凡　宁可源　魏凌俊　王伟　王茂林　张艺川

摘 要：为探究复方中草药对许氏平鲉（Sebastes schlegelii）幼鱼生长与免疫酶活性的影响，选取144尾重量相近的许氏平鲉幼鱼分为4组，每组设3个平行，每个平行12尾鱼。将黄芪、当归、红枣、干姜、甘草、白术六种中草药等比例混合后超微粉碎，分别按质量百分数0（对照组）、1%、2%、3%加入到许氏平鲉基础饲料中进行投喂，试验为期42 d。结果表明：与对照组相比，各试验组许氏平鲉的过氧化氢酶（CAT）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性显著提高（P＜0.05），1%组的增重率、特定生长率和摄食率显著高于其他组（P＜0.05），总抗氧化能力（T-AOC）无明显差异（P＞0.05），而饲料系数低于对照组及3%组（P＜0.05）。综上所述，在饲料中添加复方中草药对许氏平鲉生长和免疫功能有显著提升作用，建议的最适添加量为1%。

关键词：许氏平鲉（Sebastes schlegelii）；复方中草药；生长；免疫

许氏平鲉（Sebastes schlegelii）又称黑鮶、黑鱼、刺毛、黑寨、黑头鱼，属鲉形目，平鲉科，平鲉属。许氏平鲉是岩礁性鱼，为冷温性近海底层经济鱼类，其形态特征为体延长，侧扁，头大，头上有明显低弱的骨棱和棘；口大，下颌稍长于上颌，口内有绒毛状齿；眼间隔较宽，约等于眼径；体被栉鳞，体背部黑褐色，有不规则深黑色斑块，腹部灰白色；体长一般在20～30 cm，大者可达50 cm。许氏平鲉的生殖期在冬春季，卵胎生。仔鱼表层性，常在海藻等漂浮物下聚集。许氏平鲉分布于我国渤海、黄海、东海，是我国北方沿海养殖的重要经济鱼类[1-2]。许氏平鲉主要养殖模式为沿海网箱养殖[3]。随着养殖规模的不断扩大，网箱中养殖密度不断提升，导致病害频发[4]，造成不少的经济损失。

中草药具有毒性小、不良反应少、不容易产生耐药性等优点，性价比高。一些草药的成分不仅有抗菌、抗病毒的作用，还具有免疫调节的作用，可以显著增强水产动物的抗病能力，提高其免疫力[5]；可以显著增强鱼类的抗氧化能力和免疫力还能提高摄食率，改善肠道消化从而促进鱼类的生长。复方中草药相较单一中草药，其中的活性成分更加丰富，可以更好地发挥鱼类的免疫作用方式。目前，关于复方中草药在水产养殖中的应用，已有了许多研究。尚书凤等[6]研究表明在饲料中添加复方中药超微粉对草鱼的生长有明显的促进作用。付廷斌等[7]研究表明复方中药对杂交鲟抗氧化能力、非特异性免疫和肝功能均有促进作用。本试验将黄芪、当归、红枣、生姜、甘草、白术六种中草药制成的复方中药加入到饲料中，探究其对许氏平鲉幼鱼生长和免疫酶活性的影响。试验设置不同含量的复方中草药处理组，通过对比不同处理组之间的免疫和生长性能，确定最佳的复方中草药添加浓度，以实现最佳的免疫增强和生长促进效果。通过本试验的研究，我们期望能够为许氏平鲉的養殖业提供一种潜在的天然免疫增强剂，并为饲料添加剂的开发和应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验用鱼

试验选用大小相近，平均重量为（71.08±0.36）g健康的许氏平鲉幼鱼144尾，暂养7 d适应养殖条件，养殖期间投喂基础饲料。

1.2 试验所用饲料

试验分为T1（对照组）、T2（1%）、T3（2%）、T4（3%）四组，其中T1组喂基础饲料，基础饲料主要成分见表1。黄芪、当归、红枣、干姜、甘草、白术六种中草药超微粉碎后等比例混合成复方中草药粉。将复方中草药粉分别按1%、2%、3%的比例添加进基础饲料作为试验组饲料。

1.3 试验设计

试验开始前停止喂食24 h，将144尾试验用鱼随机分为4组，每组3个平行，每个平行12尾。放于12个50 L的养殖水槽中，用气泵24 h充气增氧，水温13～16 ℃，溶解氧＞6 mg/L，pH值8.2。养殖周期为42 d，每天8：30和17：30投喂饲料，每日投喂饲料为体重的1%。每天19：30清理剩余饲料以及粪便，同时换水，换水量约为1/3。

1.4 样品采集

试验结束后，停食24 h，每组随机选取３尾，取肝脏组织置于离心管中，标记后于-80 ℃冰箱保存。

1.5 生长指标及酶活指标测定

取样前称重，用于计算终末均重、特定生长率。免疫酶的测定包括过氧化氢酶（CAT）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、总抗氧化能力（T-AOC），上述指标试剂盒均采购于南京建成生物工程研究所有限公司，按说明书操作测定。

1.6 数据处理

试验数据以“平均值±标准误（Mean±SE）”表示。使用SPSS 26.0软件对数据进行单因素方差分析，采用Duncan’s 法进行组间差异分析，设差异显著为P＜0.05。

2 结果与分析

2.1 复方中草药对许氏平鲉存活率指标的影响

由表2可知，T2、T3和T4组的存活率明显高于T1组（对照组）（P＜0.05），其中T3组与T4组无明显差异（P＞0.05）。而之后随着复方中草药含量的增加，反而使T2组许氏平鲉存活率有所下降。T2组的存活率显著高于其他组（P＜0.05）

2.2 复方中草药对许氏平鲉生长指标的影响

由表3可知，饲料中添加复方中草药对许氏平鲉幼鱼生长的影响较为显著（P＜0.05），T2、T3和T4三个试验组除饲料系数外各项指标均高于T1组（对照组）。其中T2组的终末均重、摄食率、特定生长率、增重率等方面显著高于其他组，而T2组的饲料系数显著低于T1和T4组（P＜0.05），而与T3组无明显差异（P＞0.05）。T3和T4组在特定生长率、饲料系数、增重率上无明显差异（P＞0.05）。

2.3 复方中草药对许氏平鲉免疫指标的影响

由图1可知， T2组肝脏组织中的CAT（过氧化氢酶）显著高于其他三组（P＜0.05）。由图2可知，T1与T2组肝脏组织中的T-SOD（总超氧化物歧化酶）活性有明显差异（P＜0.05），与其他组间无明显差异（P＞0.05）。由图3可知各组肝脏组织中T-AOC（总抗氧化能力）的活性无显著差异（P＞0.05）。

柱状图标有不同小写字母表示组间有显著性差异（P＜0.05），含有相同小写字母者表示组间无显著性差异（P＞0.05），下同。

3 讨论

3.1 复方中草药对许氏平鲉幼鱼生长的影响

由黄芪、当归、红枣、干姜、甘草、白术制成的复方中草药对许氏平鲉幼鱼的生长有促进作用。其中黄芪具有补气养血，益气固表，脱毒、生肌等作用，麻艳群等[8]研究发现在斑点叉尾鮰饲料中添加2%的黄芪粉能有效地提高生长性能，改善鱼体肌肉品质。向枭等[9]研究发现黄芪多糖能够清除脂类氢过氧化物（LPO）和抑制LPO 的形成，降低多不饱和脂肪酸的分解，从而增加肌肉脂肪的沉积。白术中含有的白术多糖可能通过改变肠道形态和功能从而影响其生长性能。卓微伟等[10]研究证明了饲料中添加白术多糖能显著提升黄颡鱼的生长性能。甘草具有补脾益气，清热解毒的作用，陈文彬等[11]研究发现，饲料中添加600 mg/kg的甘草多糖可以显著促进肉鸡的生长性能。本试验中饲料添加复方中草药对许氏平鲉的生长性能起到了促进作用，在添加量为1%时的效果最显著。但添加量为2%～3%时，对生长的促进有所降低。可能是复方中草药的含量过多对鱼的肠道造成了过多的刺激，导致许氏平鲉幼鱼的进食欲望下降。

3.2 复方中草药对许氏平鲉非特异性免疫造成的影响

鱼类的免疫也分为特异性免疫和非特异性免疫。一般来说非特异性免疫在大多数温度下都可以被激活，而特异性免疫需要较高的温度，所以鱼类更依赖非特异性免疫[12]。T-SOD、T-AOC和CAT是重要的非特异性免疫指标。SOD是一种内源性抗氧化金属酶，可以通过清除超氧阴离子自由基的毒性来保护细胞或组织免受伤害，在抗氧化、延缓机体衰老、改善机体免疫力等方面起着至关重要的作用[13]。T-AOC是反应机体总抗氧化酶和抗氧化物质水平的重要指标[14]。CAT被认为是一种催化过氧化氢形成水和氧的酶，在水生动物免疫调节网络中发挥着重要作用[15]。复方中草药中的黄芪、当归、甘草、白术在一定程度上有提高免疫力的作用，而干姜也会起到抗氧化以及杀菌的作用。杨政高等[16]研究发现SOD的酶活力在一定范围内随着黄芪多糖的添加量增加而加强，并显著增强了罗非鱼抗菌、抗氧化能力。本试验中T2组SOD酶活性最好，随后复方中草药含量增加，SOD酶活性反而降低，可能是当归含量造成的影响。李晓萌[17]在研究用当归多糖喂食点带石斑鱼中发现，当归多糖添加量为3 000 mg/kg组的SOD酶活性显著高于添加量更多的其他组。CAT活性各组之间并无显著差异（P＞0.05）。王一福等[18]研究表明在饲料中添加1%～3%甘草粉有助于提高尖吻鲈肝脏中T-AOC的活性。在本试验中由于有其他草药成分，发挥的藥效有所不同，结果显示添加量为1%的组T-AOC活性最好。

4 结论

本试验在饲料中适量添加黄芪、当归、红枣、生姜、甘草、白术制成的复方中草药喂养42 d后，可以显著提高许氏平鲉的生长，降低饲料系数，提高免疫力及抗氧化能力。但过量的复方中草药也会对鱼体产生不利影响，适宜的添加量为1%。

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Effect of compound Chinese herbs on growth and non-specific immunoenzymatic activity of Sebastes schlegelii larvae

XUAN Yifan1，2， NING Keyuan1，2， WEI Lingjun1，2， WANG Wei1，2，WANG Maolin1，2， ZHANG Yichuan1，2

（1．Key Laboratory of North Mariculture， Ministry of Agriculture， Dalian Ocean University， Dalian 116023，China; 2.Key Laboratory of Applied Biology and Aquaculture of Fish in Northern Liaoning Province， Dalian  116023，China）

Abstract：To investigate the effects of compound Chinese herbs on the growth and immunoenzymatic activities of Sebastes schlegelii juveniles. 144 S. schlegelii juveniles of similar weight were selected and divided into four groups， with three parallels in each group and 12 fish in each parallel. Six kinds of Chinese herbs， namely Astragalus， Angelica sinensis， red dates， dried ginger， licorice， Atractylodes macrocephala， were mixed in equal proportions and then ultramicrocrushed， and then added into the basal diet of S. schlegelii at mass percentages of 0 （control group）， 1%， 2%， and 3%， respectively， to feed the S. schlegelii. The experiments lasted for 42 d. The results showed that the catalase （CAT） activity of S. schlegelii in the experimental groups was significantly reduced in the control group. The activities of catalase （CAT） and total superoxide dismutase （T-SOD） of S. schlegelii in each experimental group were significantly higher （P<0.05） than the control group， and the weight gain rate， specific growth rate， and total antioxidant capacity （T-AOC） were significantly higher （P<0.05） than those of the other groups in the 1% group， whereas feed coefficients and feed intake rates were lower （P<0.05） than those of the other groups. In conclusion， the addition of compound herbs to the feed had significant enhancement on growth and immune function of S. schlegelii， and the recommended optimum level of addition is 1%.

Key words：Sebastes schlegelii; compound herbs; growth; immunity

（收稿日期：2023-06-20）

基金項目：2021年辽宁省海洋经济发展项目资助;辽宁重要海水鱼类高效绿色生产模式研发与示范（2020JH1/10200002）。

作者简介：玄一凡（1997.9-），男，硕士，研究方向：水产养殖。E-mail：xyf1478963252010@163.com。

通讯作者：王茂林（1980.4-），男，副教授，研究方向：水产养殖。E-mail：wangmaolin@dlou.edu.cn。