血清Cys-C、KIM-1 联合尿NAG 检测在急性肾损伤诊断及预后评估中的作用

上官绪锋 钱鹏 赵维维

（河南省职工医院检验科，河南 郑州 450002）

急性肾损伤（AKⅠ）是严重创伤、地震挤压综合征及临床上各种疾病所致的急危重症[1]。在过去数十年里，尽管血液净化技术、危重医学有了很大进步，但败血症、休克及严重创伤所致的AKⅠ死亡率仍高达50%以上[2]。其死亡率高的主要原因之一是缺乏系统的病情评估及预后判断的指标，导致在诊断、治疗及预后评估方面存在难度。

血清胱抑素C（Cys-Ctatin c，Cys-C）是一种半胱氨酸蛋白酶抑制物，其表达不受患者年龄、性别、肝脏疾病等因素影响[3]。肾损伤分子-1（Kidney injury molecule-1， KⅠM-1）属于一种脂质运载蛋白，在正常肾脏中无表达，但当肾脏受到药物毒性或缺血性损伤时，其表达会明显增高，在患有急性肾小管损伤患者血液及尿液中均可检测到KⅠM-1[4]。尿N-乙酰β-D 氨基葡萄糖昔酶（urinary N-acetyl β- D-glucosaminidase，uNAG）是一种水解酶，主要存在于近曲肾小管上皮细胞，尿中的NAG 可直接反应肾小球损伤情况[5]。因此，Cys-C、KⅠM-1 及uNAG 等在在一定程度上可诊断AKⅠ，并预测患者预后情况[6]。

但目前有关上述因子联合检测在AKⅠ诊断、预后评估中作用的研究较少。基于此，本研究通过分析AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 变化情况，探讨其在AKⅠ诊断、预后评估中的价值与意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集本院2018 年7 月至2020 年7 月收治的104 例AKⅠ患者的临床资料。纳入标准：患者均符合AKⅠ临床诊断标准[7]；肾功能48 h 内迅速减退；临床资料齐全，无缺损或丢失；无既往手术史。排除标准：合并慢性肾功能不全、慢性肝病、甲状腺功能异常者；近期内存在肾毒性药物使用史；妊娠期或哺乳期孕妇；合并泌尿系统感染者；心律失常者。

将104 例AKⅠ患者纳入研究组，男性67 例，女性 37 例，年龄 34～81 岁，平均年龄为61.36±6.85 岁；临床分期：1 期51 例，2 期33 例，3 期20 例；慢性疾病史：糖尿病36 例，高血压28 例。另同期选取在本院接受健康体检的62 例受检者纳入对照组，男性37 例，女性25 例，年龄35～81 岁，平均年龄65.52±7.46 岁；慢性疾病史：糖尿病25 例，高血压14 例。两组资料比较无差异（P＞0.05）。本研究经医院伦理委员会同意，患者及家属知晓且签署《知情同意书》。

1.2 方法

1.2.1 标本采集

清晨空腹抽取所有受检者3 mL 外周静脉血及5-15 mL 中段尿；血清标本以4000 r·min-1离心10 min，分离血清，置于-70℃低温保存。

1.2.2 血清Cys-C、KIM-1、uNAG 的检测方法

采用全自动生化分析仪测定uNAG；采用酶联吸附免疫法检测血清Cys-C、KⅠM-1 水平。试剂盒均由上海江莱生物科技有限公司提供，具体实验方法严格按照说明书执行。

1.3 观察指标

（1）比较对照组、研究组血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平；（2）分析不同分期AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平；（3）根据预后存活情况分为死亡组与存活组，对比两组血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平；（4）绘制受试者工作特征曲线（ROC），分析上述因子水平联合诊断AKⅠ的价值。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平比较

两组血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平比较，研究组血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平均明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。表1。

表1 两组血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比较（±SD）

表1 两组血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比较（±SD）

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2.2 对照组与研究组不同分期AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平

对照组血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平均明显低于1 期、2 期及3 期组（P＜0.05）；不同分期AKⅠ患者中，3 期组上述因子水平均显著高于1期、2 期组，以1 期组最低（P＜0.05）。见表2。

表2 对照组与不同分期AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比较（±SD）

表2 对照组与不同分期AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比较（±SD）

注：与对照组比较，aP＜0.05；与1 期组比较，bP＜0.05；与2 期组比较，cP＜0.05。

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2.3 不同预后AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG水平比较

104例AKⅠ患者中，预后存活77例（74.04%），预后死亡27 例（25.96%）。存活组Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平均明显低于死亡组（P＜0.05）。见表3。

表3 不同预后AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比较（±SD）

表3 不同预后AKI 患者血清Cys-C、KIM-1、uNAG 水平比较（±SD）

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2.4 Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平对AKⅠ的诊断价值

ROC 曲线分析结果显示，Cys-C、KⅠM-1、uNAG 诊断AKⅠ的ROC 下曲线面积（AUC）分别为0.785、0.778、0.736；但三者联合检查的AUC更高，为0.819。见表4 与图1。

图1 Cys-C、KIM-1、uNAG 水平诊断AKI 的ROC 曲线

表4 Cys-C、KIM-1、uNAG 水平对AKI 的诊断价值

3 讨论

AKⅠ是一种常见病、多发病，多数可进展为严重肾损伤，具有较高的病死率，且该病的发生与住院病死率具有一定关系，其高死亡的风险归结于尚缺乏早期诊断、评估预后的特异性生物标志物[1-3]。Cys-C 是一种半胱氨酸蛋白酶抑制物，其表达不受患者年龄、性别、肝脏疾病等因素影响[3]。当肾脏出现轻微损伤时，在肌酐升高2d 前，Cys-C 水平已开始上升，且其水平会随患者病情严重程度增加而上升。且肾小管不分泌 Cys-C，只经过肾小球自由滤过，因此肾脏是唯一清除循环中 Cys-C 的器官。KⅠM-1 属于一种脂质运载蛋白，在正常肾脏中无表达，但当肾脏受到药物毒性或缺血性损伤时，其表达会明显增高，在患有急性肾小管损伤患者血液及尿液中均可检测到KⅠM-1[2,3]。该因子作为AKⅠ标志物的优势在于正常肾脏组织中无表达，在损伤的肾小管上皮细胞中持续表达存在[2,3]。

Sun[9]等研究发现，KⅠM-1 在重症感染合并肾损伤中的阳性表达率可高达95%。NAG 是一种水解酶，主要存在于近曲肾小管上皮细胞，血液中的NAG 无法通过肾小球膜，因此尿中的NAG 可直接反应肾小球损伤情况[5]。国内外多项研究显示，uNAG 是评估早期肾损伤的有效指标之一[5,10]。

近几年来，对AKⅠ研究较多的生物标志物有近十种，这些单个标志物敏感性、特异性有限，通过联合检测可很好的弥补单一检测的不足，提高诊断价值。陈国新[10]等人通过联合检测5 项指标诊断AKⅠ发现，其AUC 可高达0.925，敏感性、特异性可高达80%以上，较单项检测均有所提高。赵海霞[11]等通过高龄老年AKⅠ患者尿NGAL、NAG 及KⅠM-1 水平发现，联合检测上述因子使AKⅠ的早期敏感性显著提高。本研究检测AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平发现，三者联合检测诊断AKⅠ的敏感性、特异性及AUC 均高于单个标志物，大大提高了诊断价值。

研究发现，Cys-C、KⅠM-1 不仅可早期判断AKⅠ的发生，并与患者死亡率有关[12]。本研究通过进一步分析不同分期、预后AKⅠ患者血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平发现，随着患者分期增高，血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平亦逐渐上升；且与存活组相比，死亡组上述因子水平均更高，提示血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平与AKⅠ患者病情严重程度密切相关。提示血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平联合检测不仅可有效诊断AKⅠ，还可更为准确的评估患者预后。

综上所述，血清Cys-C、KⅠM-1、uNAG 水平在AKⅠ患者中呈异常高表达，可能与AKⅠ患者病情、预后密切相关，检测上述因子水平有助于评估患者预后。