儿童与成人急性B淋巴细胞白血病免疫表型的差异分析

李 祎 吴奕飞 王朝林

急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)病情急重,若临床未能采取有效治疗措施,随着疾病进展,将会威胁患者生命[1-2]。临床主要依据细胞形态学、免疫分型、遗传特征诊断B-ALL。流式细胞术免疫表型检查是对细胞成熟期间的表层抗原和细胞质抗原表达水平进行分析,以此对白血病展开规范化的免疫学划分,从而明确细胞分化情况,判断病情严重程度[3]。但B-ALL可发生在细胞代谢的不同阶段,且不同阶段患者的临床特征和预后皆不相同,临床需分析其免疫表型的差异方能采取针对性治疗措施[4-5]。然而对于儿童和成人免疫表型的差异仍缺乏有效探究。鉴于此,本研究选择2018年1月至2021年12月于我院行白血病免疫分型检测的B-ALL患儿98例和成人B-ALL患者92例作为研究对象,分析儿童和成人免疫表型的差异,为临床采取合适的治疗措施提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年1月至2021年12月于我院行白血病免疫分型检测的B-ALL患儿98例和成人B-ALL患者92例作为研究对象。其中98例B-ALL患儿中男性52例,女性46例;年龄1～14岁,平均年龄(8.21±1.45)岁。92例成人B-ALL患者中男性49例,女性43例;年龄18～72岁,平均年龄(46.71±6.93)岁。

1.2 检测方法

收集初诊儿童和成人患者骨髓2 ml,应用肝素抗凝;在每个检测管中放入(1×107/mL)100 μL的标本,并应用四色免疫荧光法(四种荧光素为FITC、PE、PE-Cy5、PE-Cy7)标记抗体。所用单克隆抗体包括异硫氰酸荧光素(FITC)、别藻青蛋白(APC)标记CD19、CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、CD10、cTdT、CD34、HLA-DR、CD38、CD13、CD15、CD33、CD117及同型对照IgG等。所有单克隆体抗原及阴性对照均来自美国Becton Dickison公司。标记抗体后,应用流式细胞仪(美国碧迪公司,型号BD FACSCanto II,批准文号:20152221424)和CellQuest软件检测细胞表面标志,每个检测管获取5000个细胞并展开相关分析,再通过CD45/侧散射(SSC)双参数散点图设门法识别幼稚细胞,计算幼稚细胞的百分比,并分析该幼稚细胞群中各白血病相关抗原的阳性率。阳性标准为:胞质或胞核抗原cyIgM、CyCD79a、cTdT≥10%为阳性,其他抗原表达阳性率≥20%为阳性。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 儿童与成人B-ALL患者免疫分型分类

在98例B-ALL儿童和92例B-ALL成人患者中,依据抗原表达的差异可分为三个阶段:早前B-ALL(Pro-B-ALL)、普通B-ALL(Com-B-ALL)、前B-ALL(Pre-B-ALL);在B-ALL分类中,Com-B-ALL和Pre-B-ALL类型儿童与成人患者所占比例相比,差异无统计学意义(P>0.05);Pro-B-ALL类型患者中儿童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%),差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 儿童与成人B-ALL患者免疫分型分类(例,%)

2.2 儿童与成人B-ALL患者B系抗原表达情况

在全部的B-ALL患者中,共190例,B系抗原CD19阳性表达率最高,儿童与成人均为100.00%,其次为CD22(儿童100.00%、成人98.91%)、cyCD79a(儿童100.00%、成人96.74%);儿童与成人B-ALL患者CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、cTdT阳性率相当,差异无统计学意义(P>0.05);儿童B-ALL的CD10阳性率(97.96%)高于成人患者(88.04%),差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 儿童与成人B-ALL患者B系抗原表达情况(例,%)

2.3 儿童与成人B-ALL患者干/祖细胞抗原表达情况

B-ALL儿童的HLA-DR、CD38阳性率与成人B-ALL患者相当,差异无统计学意义(P>0.05);B-ALL儿童的CD34阳性率(70.41%)低于成人患者(84.78%),差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 儿童与成人B-ALL患者干/祖细胞抗原表达情况(例,%)

2.4 儿童与成人B-ALL患者伴髓系抗原表达情况

儿童与成人B-ALL患者CD13、CD117阳性率相当,差异无统计学意义(P>0.05);B-ALL儿童的CD33、CD15阳性率低于成人患者,差异有统计学意义(P<0.05),见表4。

表4 儿童与成人B-ALL患者伴髓系抗原表达情况(例,%)

3 讨论

B-ALL是临床常见的恶性血液疾病,依据骨髓中正常B细胞抗原分化特点可将其分为Com-B-ALL、Pre-B-ALL、Pro-B-ALL三种类型[6-7]。B-ALL可发于各个年龄阶段,以儿童最为常见,成人患者随着发病年龄的增长,生存质量随之下降[8-9]。同时,儿童和成人患者在细胞遗传学异常和对治疗的反应等多项指标中均有所差异,故分析儿童和成人B-ALL患者中的免疫表型差异可为疾病的诊断和治疗提供参考依据。

本研究结果显示,在B-ALL免疫分型分类中,Com-B-ALL和Pre-B-ALL类型儿童与成人患者所占比例相比(P>0.05);Pro-B-ALL类型患者中儿童所占比例(2.04%)低于成人(9.78%)(P<0.05);在全部的B-ALL患者中,B系抗原CD19阳性率最高,儿童与成人均为100.00%,其次为CD22、cyCD79a;儿童与成人B-ALL患者CD20、CD22、cyIgM、cyCD79a、cTdT、HLA-DR、CD38、CD13、CD117阳性率相当(P>0.05);儿童B-ALL的CD10阳性率高于成人患者,CD34、CD33、CD15阳性率低于成人患者(P<0.05)。提示监测儿童与成人B-ALL的免疫表型在诊断、判断预后、明确治疗方案中意义重大。CD34是造血干细胞的特异性标记,在细胞分化程度低的B-ALL中表达更为明确[10-11]。本研究发现儿童B-ALL的CD34低于成人患者,由此可见成人患者细胞分化较差,肿瘤恶性程度高,临床治疗难度大。CD20的表达与患者预后密切相关,其阳性率越高则复发率越高、生存时间越短,本研究发现儿童与成人患者的CD20阳性率相当。而CD19作为血液恶性肿瘤的一个重要靶点,其在多种B细胞淋巴瘤和白血病中具有表达,本研究发现在全部的B-ALL患者中,CD19阳性率较高,故临床针对不表达的CD20的早期B系肿瘤可选用抗CD19抗体治疗。同时,白血病细胞存在异质性和非同步性,故B-ALL细胞可不同程度的表达髓系抗原。儿童和成人B-ALL患者中以CD13和CD33髓系抗原最为常见,而CD117和CD15由于其异常表达的频率较低,故临床常忽略对其的深入研究。CD117表达于髓系原始细胞中,是髓系特异的标志,其阳性率越高则复发率越高,生存率越低[12]。CD33、CD15在成人B-ALL患者中高表达,表明是B-ALL敏感性和特异性均较高的标志。针对此,临床需依据不同年龄阶段患者白细胞的免疫表型实施针对性的治疗措施,以此延长患者生存周期。

综上所述,儿童与成人B-ALL的免疫表型具有特异性,通过评估抗原的表达水平可更精准地描述患者独立特征,为临床评估预后及采取有效治疗措施提供指导。