肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌患者中的辅助诊断效果及预后指导价值研究

付毓 邢彦彦 贾小超

1 复旦大学附属金山医院妇产科 （上海 201508）

2 复旦大学附属金山医院超声医学科 （上海 201508）

内容提要： 目的：探讨肾母细胞瘤基因（WT1）联合二维超声在卵巢癌患者中的辅助诊断效果及预后指导价值。方法：回顾性收集2017年4月～2020年12月术前疑似卵巢癌患者87例，收集患者已有二维超声的阻力指数（RI）和搏动指数（PI），边界、包膜、内部回声、盆腔积液及彩色血流情况。收集标本库血液标本行PCR检测WT1表达情况，以病理组织检查结果作为“金标准”，分析WT1联合二维超声在卵巢癌中的辅助诊断效果；并完成24个月门诊随访，绘制生存曲线，分析WT1不同表达下患者生存期差异。结果：87例患者经“金标准”检查确诊52例，确诊率为59.77%；二维超声检查阳性41例，血液WT1检查44例阳性，二者联合检查50例阳性；WT1联合二维超声在卵巢癌患者中检查准确度、灵敏度、特异度、阳性与阴性预测值均高于二维超声和WT1（P＜0.05）；WT1联合二维超声检查阳性患者生存期为（23.29±4.67）月短于WT1基因联合二维超声检查阴性患者（P＜0.05）。结论：肾母细胞瘤基因（WT1）和二维超声用于卵巢癌患者中具有较高检出率，且二者联合检查能提高诊断效能，可为临床诊疗提供指导依据。

卵巢癌是指发生在卵巢的恶性肿瘤性疾病，能发生在不同年龄段人群中，其组织学类型多样，主要为上皮来源[1]。王冠结果表明[2]：卵巢癌好发于30～40岁女性人群中，居妇科恶性肿瘤第3位，患者发病多与遗传、激素、妇科疾病及环境等因素有关。由于卵巢癌发病早期临床症状缺乏典型性，晚期患者可表现为腹胀、下腹部不适及食欲下降等，导致临床诊疗难度较大[3]。病理组织检查是卵巢癌诊断“金标准”，虽然能帮助患者确诊，但是该方法具有较高风险性，部分患者可出现感染、针道肿瘤定植等，患者诊断耐受性及依从性较差[4]。超声检查是卵巢癌重要的筛查手段，具有操作简单、价格低廉、无创伤等优点，且借助超声不仅能对中晚期卵巢癌的诊断、分期和转移具有作用，亦可发现早期无症状的微小病灶。肾母细胞瘤基因是肾母细胞瘤家族成员之一，能直接参与、调节细胞的增殖、分化、血管形成等病理和生理过程，在肿瘤生长、炎性作用中发挥了重要的作用[5]。本研究以疑似卵巢癌患者为对象，探讨肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌患者中的辅助诊断效果及治疗指导价值，报道如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

回顾性收集2017年4月～2020年12月术前疑似卵巢癌患者87例为对象，年龄24～67岁，平均（43.63±6.39）岁；体重指数（BMI）18.5～29.8kg/m2，平均（21.63±3.29）kg/m2；临床表现：腹胀25例，下腹部不适19例，食欲下降28例。其中术后病理诊断为卵巢癌患者为52例，术后病理诊断为卵巢良性肿瘤为35例。

纳入标准：①本院2017年4月～2020年12月术前B超提示卵巢肿物＞8cm伴混合型回声或CA125数值＞500U/mL的患者。参考《妇科学》[6]中卵巢癌诊断标准，具有完整的病理检查结果；②病情尚稳定，能进行沟通与交流。

排除标准：①认知障碍、其他部位恶性肿瘤者；②中途家属要求放弃诊疗；③检查前行放化疗、生物免疫治疗者。

1.2 方法

二维超声检查：收集本院2017年7月～2021年2月疑似卵巢癌患者术前B超影像。入组患者均使用了二维超声检查，仪器型号：SIEMENS ACUSON Sequoia，中文名西门子红衫系列，探头频率为3.5MHz，常规完成腹部超声扫描，对于腹部超声图像质量不佳者，调取患者阴道超声检查报告，探头频率为6.5MHz。调取超声血流动力学特征，包括阻力指数（RI）和搏动指数（PI）等二维超声参数，并了解肿瘤边界、包膜、内部回声、盆腔积液、彩色血流角度等情况[7]。

肾母细胞瘤基因检测：收集本院标本库所有符合该项目患者空腹静脉血清（贮存温度为-80°C），本研究经复旦大学附属金山医院伦理委员会获审批免除知情同意。采用实时荧光PCR法测定入组患者血液中WT1，按照TRIzol试剂操作说明书完成总RNA的提取，并利用紫外分光光度计检测并记录总RNA的浓度和纯度。参考反转录试剂盒操作说明书完成cDNA的合成。根据qRT-PCT试剂盒说明书，精确吸取RNA 1μL提取液反转录，并将获得大的cDNA建立反应体系20μL，完成qRT-PCT检测。设定qRT-PCT反应条件：95°C下2min，1个循环；95°C下5s、60°C下30s（连续完成40个循环）、95°C下15s、60°C下1min、95°C下30s、60°C下15s，并以2-△△Ct表示目的mRNA与对照mRNA表达倍数[8]。

以病理组织检查结果作为“金标准”，分析肾母细胞瘤基因联合二维超声（两种检查方法中任意一项阳性即为阳性）在卵巢癌中的辅助诊断效果（检查准确度、灵敏度、特异度、阳性与阴性预测值）。

肾母细胞瘤基因和二维超声预后指导价值：根据肾母细胞瘤基因联合二维超声诊断结果完成24个月门诊随访，绘制生存曲线，分析肾母细胞瘤基因不同表达下患者生存期差异。

1.3 统计分析

采用SPSS26.0软件处理，计数资料行χ2检验，采用[n(%)]表示，计量资料行t检验，采用±s表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌中检出率

87例疑似卵巢癌患者经“金标准”检查确诊52例，确诊率为59.77%；二维超声检查阳性41例，肾母细胞瘤基因检测44例阳性，二者联合检查50例阳性，见表1。

表1.肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌中检出率

2.2 不同检查方法在卵巢癌中的诊断效能比较

肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌患者中检查准确度、灵敏度、特异度、阳性与阴性预测值均高于二维超声和肾母细胞瘤基因（P＜0.05），见表2。

表2.不同检查方法在卵巢癌中的诊断效能比较

2.3 肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌中的预后指导价值

对肾母细胞瘤基因联合二维超声阳性患者为阳性者，随访患者生存期。结果表明：肾母细胞瘤基因联合二维超声检查阳性患者生存期为（23.29±4.67）月短于肾母细胞瘤基因联合二维超声检查阴性患者（P＜0.05），见图1。

图1.肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌中的治疗指导价值

3.讨论

卵巢癌是一种恶性程度较高的肿瘤，其发病率居生殖道恶性肿瘤首位。从人体解剖学角度看，卵巢位于盆腔深部，多数患者发病早期缺乏典型症状，发病隐匿，多数患者确诊时已经是中晚期，导致患者生存率低、预后较差。既往研究表明：加强卵巢癌患者早期准确诊断，有助于提高患者生存期，改善患者治疗预后[9]。二维超声检查是卵巢癌患者中常用的方法，该方法操作相对简单、价格低廉及无创等优点，能帮助患者早期确诊[10]。同时，借助二维超声图像特点，能判定肿瘤的形态、内部结构，从而实现卵巢肿瘤的区分和鉴别[11]。本研究中，87例患者经“金标准”检查确诊52例，确诊率为59.77%；二维超声检查阳性41例，肾母细胞瘤基因检测44例阳性，二者联合检查50例阳性，从本研究结果看出，肾母细胞瘤基因和二维超声用于卵巢癌患者中具有较高检出率，能指导临床诊疗。分析原因：二维超声用于卵巢癌患者诊断中，由于肿瘤细胞生长速度相对较快，并出现新生血管；肿瘤的侵蚀作用能形成动静脉痰，肿瘤实质内可见广泛的血流信号，从而实现疾病的诊断。但是，二维超声用于卵巢癌患者中特异度较低，导致单一使用二维超声诊断效果不佳。

肾母细胞瘤基因包括半胱氨酸富集蛋白61、结缔组织生长因子、肾母细胞瘤过度表达蛋白等。尽管肾母细胞瘤基因临床上已经发现十多年，但是其生物化学活性和生物功能研究仍相对较少[12]。本研究中，肾母细胞瘤基因联合二维超声在卵巢癌患者中检查准确度、灵敏度、特异度、阳性与阴性预测值均高于二维超声和肾母细胞瘤基因（P＜0.05），从本研究结果看出，肾母细胞瘤基因和二维超声能提高卵巢癌诊断效能。从大的角度来说，肾母细胞瘤基因属于整合素受体的配体，与细胞外基质存在紧密的联系，能介导细胞的增殖和黏附功能。既往研究表明：卵巢癌患者肾母细胞瘤基因表达异常，能促进肿瘤细胞的增殖、抑制细胞凋亡，参与滋养层细胞的生长[13]。本研究中，肾母细胞瘤基因联合二维超声检查阳性患者生存期为（23.29±4.67）月短于肾母细胞瘤基因联合二维超声检查阴性患者（P＜0.05），从本研究结果看出，肾母细胞瘤基因联合二维超声能指导卵巢癌患者诊疗。因此，临床上对于疑似卵巢癌患者，应加强患者二维超声检查，必要时可联合肾母细胞瘤基因测定，发挥不同检测指标优势，帮助患者早期确诊，并指导临床诊疗[14,15]。

综上所述，肾母细胞瘤基因和二维超声用于卵巢癌患者中具有较高检出率，且二者联合检查能提高诊断效能，可为临床诊疗提供指导依据。