红曲地龙蛋白压片糖果降脂保肝作用探析

◎ 邸玉青，李 静

（1.北京核工业医院心血管内科，北京 102413；2.烟台南山学院，山东 烟台 265700）

高血脂是临床常见的疾病，多由长期高糖、高脂、高油饮食引起。高血脂会导致脂肪在肝脏累积，形成脂肪肝，极易引发心脑血管疾病。据不完全统计[1-2]，我国成人血脂异常总体患病率达到40.40%，且呈大幅度上升趋势，而30%～50%高血脂人群会合并脂肪肝。科学降脂、保肝护肝成为社会性的自我保健课题，利用药食同源以及新资源食品资源，探索开发出具有防治疾病功能的新型食品成为一种新趋势。

红曲，又称红曲米，古时称为丹曲，被广泛用于食物加工烹饪中。红曲应用历史悠久，《本草纲目》中记载“红曲：消食、活血、健脾燥胃”等。研究表明[3-4]，红曲米中的活性成分洛伐他汀和人体胆固醇合成中的羟甲基戊二酰辅酶A（HMG-CoA）还原酶结构相似，是HMG-CoA还原酶的竞争性抑制剂，能有效减少或阻断内源性胆固醇的合成，从而达到降脂的作用。

《神农本草经》《黄帝内经》中多有记载地龙“活血化瘀”的特性。地龙蛋白是采用现代生物技术从地龙体内提取的复合营养物，含有胶原酶、纤溶酶、纤溶激活蛋白（FA蛋白）、核酸、微量元素等多种成分，已于2009年被原卫生部认定为“新资源食品”。地龙中地龙蛋白含量高达55%～68%，富含纤溶酶、纤溶酶原激活物和胶原酶等活性成分，能溶解微血管内的血栓，让硬化的微血管恢复弹性，从而解除微血管的堵塞、扭曲变形情况，改善微循环，对机体心血管系统、血液系统、中枢神经系统等有较好的预防作用[5-6]。压片糖果作为糖果制品类的一种新型食品形态发展迅速，除了工艺先进之外，服用也更为方便，深受年轻消费者的喜爱。通过现代化萃取工艺将红曲米和地龙蛋白包埋添加到压片糖果中，制成的红曲地龙蛋白压片糖果成分天然，咀嚼服用更利于吸收。本实验旨在探讨新型食品红曲地龙蛋白压片糖果的降脂保肝作用，为后续开发新型食品提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

红曲地龙蛋白压片糖果（国内某食品厂研发，由红曲和地龙蛋白组合，其余为辅料，0.45 g/片，推荐食用量为红曲0.12 g·d-1、地龙蛋白0.6 g·d-1）；辛伐他汀片（杭州默沙东制药有限公司）；生理盐水（北京化学试剂公司）；普通饲料（北京华阜康生物科技股份有限公司）；肝组织生化指标试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）。

高脂饲料配比：普通饲料中添加1%胆固醇、10%猪油、0.5%脱氧胆酸钠（进一步诱发小鼠高脂血症）及适量胆酸盐（增加外源性胆固醇的吸收）。

1.2 仪器与设备

微量移液器，赛默飞世尔科技（中国）有限公司；全自动生化仪、低速冷冻离心机，科大创新股份有限公司；恒温水浴锅，南京太仓医用设备仪器厂；MS-TS电子天平，梅特勒-托利多国际有限公司；AH-20全自动均质器，睿科集团股份有限公司。

1.3 试验动物

昆明种清洁级健康雄性小鼠60只，体重21～26 g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，试验前适应性喂养一周。

1.4 试验方法

1.4.1 动物造模分组

雄性昆明种小鼠60只适应性喂养结束后，取血检测，取10只血脂正常小鼠为正常对照组，饲以普通饲料，其余50小鼠饲以高脂饲料，持续45 d后，禁食不禁水12 h，尾静脉取血测血脂，总胆固醇（Total Cholesterol，TC）、三酰甘油（Triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）升高、高密度脂蛋白胆固醇（High Density Lipoprotein Cholesterol，HDL-C）降低则为造模成功。取造模成功小鼠40只，按血脂水平将其随机均分为模型对照组、辛伐他汀组、压片糖果低（0.15 g·kg-1，即红曲0.02 g·kg-1、地龙蛋白0.1 g·kg-1）、高剂量组（0.30 g·kg-1，即红曲0.04 g·kg-1、地龙蛋白0.2 g·kg-1），每组10只。辛伐他汀组每日灌胃10 mL·kg-1辛伐他汀溶液，压片糖果组给予不同浓度溶液（临用前用1%羧甲基纤维素钠溶液配制成相应浓度）。正常对照组、模型对照组每日给予等量生理盐水。5组小鼠的灌胃体积均为10 mL·kg-1，每天1次，持续6周，饲喂饲料同前。

1.4.2 小鼠血清生化指标的测定

末次灌胃后，各组小鼠禁食不禁水12 h，腹部主动脉取血，置于3 200 r·min-1离心机中离心10 min，全自动生化仪测定血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C和谷草转氨酶（Aspartate Aminotransferase，AST）、谷丙转氨酶（Alanine Transaminase，ALT）含量，记录试验数据。

1.4.3 小鼠肝指数的测定

处死小鼠，经滤纸处理后，称量肝脏重量，并根据公式（1）计算出肝指数。

1.4.4 小鼠肝脏生化指标及氧化指标的测定

TC测定：取5 g小鼠肝组织，置于预冷后的生理盐水中，制成10%匀浆液，4 ℃下静置抽提24 h，于3 000 r·min-1离心机中离心15 min，取上清液测定TC含量。

TG、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）、丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量测定：取1 g小鼠肝组织置于生理盐水中，制成10%匀浆液，4 ℃下静置抽提48 h，于3 000 r·min-1离心机中离心15 min，取上清液测定各指标。

1.5 统计学分析

所有试验数据使用Excel建立数据库，使用SPSS 17.0软件进行数据统计分析，组间差异采取方差检验，P＜0.05表明数据具有显著性差异，P＜0.01表明数据具有极显著差异。

2 结果与分析

2.1 红曲地龙蛋白压片糖果对血清生化指标的影响

表1试验结果显示，模型对照组小鼠TC、TG、LDL-C含量显著高于正常对照组，HDL-C含量低于正常对照组（P＜0.05或P＜0.01）。与模型对照组相比，辛伐他汀组与压片糖果低、高各剂量组TC、TG、LDL-C含量显著降低，HDL-C含量显著增加（P＜0.05或P＜0.01）。

表1 红曲地龙蛋白压片糖果对血清生化指标的影响表

2.2 红曲地龙蛋白压片糖果对肝指数及肝脏功能的影响

表2试验结果显示，与模型对照组相比，辛伐他汀组和压片糖果低、高剂量组的小鼠肝指数明显下降，ALT和AST活性明显降低，各指标均有显著差异（P＜0.05或P＜0.01）。

表2 红曲地龙蛋白压片糖果对肝指数及肝脏功能的影响表

2.3 红曲地龙蛋白压片糖果对肝脏生化指标及氧化指标的影响

表3试验结果显示，与模型对照组相比，辛伐他汀组、压片糖果各剂量组TC、TG、MDA含量减少，SOD含量增加，各指标均有差异显著（P＜0.05或P＜0.01）。

表3 红曲地龙蛋白压片糖果对肝脏生化指标及氧化指标的影响表

3 结论与讨论

本实验采用高脂饲料诱导高脂血症小鼠模型，模型对照组小鼠血清TC、TG、LDL-C含量升高，HDL-C含量降低，表明小鼠造模成功。AST、ALT是临床上常用于检测肝功能的指标，一般主要存在于肝脏中，当肝脏受损，这两种转氨酶则会被释放到血清中，使血清中AST、ALT增高[7]。本实验中，模型组小鼠的AST、ALT活性增高，且肝脏系数增加，说明小鼠肝脏脂肪颗粒堆积，且出现了一定的肝损伤。试验结果显示，与模型对照组相比，压片糖果低、高各剂量组TC、TG、LDL-C含量显著降低，HDL-C含量显著增加，（P＜0.05或P＜0.01），说明压片糖果可以调节血清中各生化指标，调理血液脂质代谢；与此同时，低、高剂量组的小鼠肝指数明显下降，血清ALT和AST活性明显降低，表明压片糖果可以减轻其脂肪肝，降低肝损伤程度，对肝脏有一定的保护作用。另外，高脂饲料喂养后，模型对照组小鼠肝脏TC、TG含量增加，体内过氧化反应增加、肝脏抗氧化能力降低，二者相互作用导致小鼠脂质代谢异常。试验结果显示，与模型对照组相比，压片糖果各剂量组TC、TG、MDA含量减少，SOD含量增加，各指标均有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。提示红曲地龙蛋白压片糖果可以辅助降低小鼠肝脏脂质水平，改善肝脏氧化应激的状态。

综上所述，红曲地龙蛋白压片糖果可调节血脂水平和脂质代谢紊乱，减少肝脏氧化应激损伤，具有降脂保肝作用，是一款健康的新型食品。