血清MMP-9、HIF-1α水平与肝癌患者TACE治疗疗效和预后的关系研究

刘光辉 张其润 邱福轩

肝细胞癌(HCC)是1种发生在肝脏部位的恶性肿瘤,其致病因素多种多样,主要与酗酒、病毒性肝炎诱导、经常食用霉变食物以及遗传因素有关[1]。经肝动脉插管化疗栓塞(TACE)治疗是临床常用的恶性肿瘤治疗方法,可以在一定程度控制肿瘤进展,疗效确切,但仍有部分患者的治疗效果并不理想[2]。有研究指出[3-4],HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平与预后有一定联系,基质金属蛋白酶-9(MMP-9)可以参与调节HCC的侵袭转移;低氧诱导因子(HIF-1α)的表达与HCC患者微血管浸润有关。并且MMP-9和HIF-1α之间存在着一定的转录调控关系,在缺氧条件下,HIF-1α可以直接调控包括MMP-9在内的多种下游基因。基于此,本研究选取于2017年1月至2020年1月在本院就诊并接受治疗的HCC患者74例作为研究对象,探讨血清MMP-9、HIF-1α水平与肝癌患者TACE治疗疗效和预后的关系研究。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取于2017年1月至2020年1月在本院就诊并接受治疗的HCC患者74例,纳入的HCC患者均接受TACE治疗,按照mRECIST标准[5],根据患者接受TACE治疗后的效果将其分为有效组(肿瘤缩小或保持稳定状态)(n=49)和无效组(肿瘤未缩小甚至加重)(n=25)。有效组男性26例,女性23例,年龄42～71岁,平均(56.72±7.22)岁,病程1～4年,平均(2.95±0.69)年,肿瘤大小2～12cm,平均(7.42±2.41)cm;肝功能Child-Pugh分级:A级33例,B级16例。无效组男性14例,女性11例,年龄44～73岁,平均(58.14±7.34)岁,病程2～5年,平均(3.31±0.74)年,肿瘤大小4～14 cm,平均(9.21±2.59)cm;肝功能Child等级:A级7例,B级18例。

纳入标准:①符合HCC的相关诊断标准[6];②纳入的病例均未接受其他抗癌治疗。排除标准:①合并心、肾等重要功能器官障碍者;②肝功能Child-Pugh分级为C级;③存在明显TACE禁忌证,无法接受治疗者。本研究符合《赫尔辛基宣言》相关伦理准则。

1.2 治疗方法

纳入的HCC患者均接受TACE治疗,具体治疗方法为:(1)术前准备:术前给予患者盐酸昂丹司琼片(北大医药股份有限公司,H10970155,4 mg/片)8 mg,以起到止吐的作用;(2)术中操作:采用改良Seldinger穿刺法经患者的皮-股动脉进行穿刺,穿刺成功后,插入导管进行肝动脉造影,通过影像学图像明确患者肝肿瘤的情况,结合患者自身情况对栓塞剂的剂量进行调整,导管置入患者肿瘤的供血血管中后,根据患者的病情需要注入适量的氟尿嘧啶注射液(天津金耀氨基酸有限公司H12020959,10 mL/支)、注射用盐酸多柔比星(山西普德药业有限公司H14023143,10 mg/支)和碘油(上海运佳黄浦制药有限公司H31021302,20 mL/瓶),碘油起到栓塞剂和药物载体的功能,需与化疗药物充分混合后一起推注到患者体内,之后根据患者的具体反馈情况选择栓塞微球加以辅助;(3)术后给药:术后给予患者保肝药,对于部分疼痛感过于强烈的患者给予镇痛剂止痛处理,监测患者体内电解质酸碱水平,维持其平衡。

1.3 评价指标

(1)血清MMP-9、HIF-1α:治疗前、治疗1个月后,采集患者的清晨空腹静脉血3 mL,经离心操作后,置于含促凝剂的真空采血管中,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清MMP-9、HIF-1α水平,研究所应用的ELISA检测试剂盒均由上海莼试生物技术有限公司提供,且均为同一生产批号。

(2)治疗效果:HCC患者接受TACE治疗1个月后,采用mRECIST实体瘤疗效评价标准[5],根据患者的症状改善及病情进展情况将患者的治疗效果分为有效[非典型肝内靶病灶及非靶病灶最大直径之和(SLD)减小>30%]和无效(非典型肝内靶病灶及非靶病灶SLD未减小甚至有所增加)。

(3)生存资料:以患者接受TACE治疗第1天作为患者生存时间的起点,随访所有患者的生存资料,随访截止2022年2月,共计随访2年。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 HCC患者治疗前后血清MMP-9、HIF-1α水平比较

TACE治疗1个月后,HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平降低(P<0.05),见表1。

表1 HCC患者治疗前后血清MMP-9、HIF-1α水平比较

表2 不同治疗效果患者治疗前后血清MMP-9、HIF-1α水平比较

2.2 不同治疗效果患者治疗前后血清MMP-9、HIF-1α水平比较

治疗前有效组HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水经过ROC分析显示,血清MMP-9、HIF-1α以及联合评估HCC患者疗效的曲线下面积(AUC)分别是0.753、0.763和0.804。联合评估HCC患者疗效的价值最大。见图1和表3。

图1 治疗前血清MMP-9、HIF-1α对HCC患者疗效评估的ROC曲线

表3 治疗前血清MMP-9、HIF-1α对HCC患者疗效的评估价值

平均低于无效组(P<0.05);治疗后两组HCC患者血清MMP-9水平低于治疗前(P<0.05),有效组HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平均低于无效组(P<0.05),见表2。

2.3 治疗前血清MMP-9、HIF-1α对HCC患者疗效的评估价值

2.4 不同血清MMP-9、HIF-1α水平患者治疗后生存期分析

采用中位数法,根据治疗后MMP-9、HIF-1α水平,将患者分为MMP-9低水平和MMP-9高水平;HIF-1α低水平和HIF-1α高水平。生存分析显示,血清MMP-9低水平患者2年生存率为69.39%,高于高水平患者的44.00%(Log Rank χ2=5.761,P<0.05);HIF-1α低水平患者2年生存率为71.43%,高于高水平患者的40.00%(Log Rank χ2=8.819,P<0.05)。见图2和图3。

图2 不同血清MMP-9水平HCC患者生存情况的Kaplan-Meier曲线

图3 不同血清HIF-1α水平HCC患者生存情况的Kaplan-Meier曲线

3 讨论

近年来,我国患HCC的人数呈逐年上升的趋势,严重威胁着人们的生命健康,由于HCC多于中晚期才被诊断出来,其致死率较高[7]。TACE治疗是以阻塞肝脏恶性肿瘤血管的方法,阻断其血液供应,致使肿瘤缺血坏死的一种治疗手段,通过TACE治疗可以抑制肝脏肿瘤生长、增殖,以此稳定HCC患者的病情[8]。

本次研究结果显示,治疗TACE治疗1个月后,HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平降低(P<0.05)。表明TACE治疗后,HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平出现明显变化。有研究指出[9],血清MMP-9、HIF-1α等指标与HCC患者的治疗效果有一定的联系,血清MMP-9是1种基质金属蛋白酶,可影响癌细胞的转移;HIF-1α具有调节肿瘤细胞氧含量的作用,在缺氧环境中,HIF-1α具有较强的稳定性。分析原因可能是由于TACE治疗通过阻断肝脏部位恶性肿瘤血液供应,导致肿瘤细胞缺氧坏死,血清MMP-9、HIF-1α水平降低。

本次研究结果显示,治疗后,有效组HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平均低于无效组(P<0.05)。分析原因可能是由于TACE治疗后无法彻底清除肿瘤细胞,部分患者血清MMP-9、HIF-1α水平未出现降低,MMP-9是HCC肿瘤浸润转移过程中的主要蛋白水解酶,在侵袭转移中起到关键作用;HIF-1α在缺氧条件下对HCC肿瘤细胞起到调节作用,导致其体内残余的肿瘤细胞可能会出现暴发性增殖,从而出现患者病情未得到改善甚至加重的情况。

另外,经过ROC分析显示,血清MMP-9、HIF-1α以及联合评估HCC患者疗效的曲线下面积(AUC)分别是0.753、0.763和0.804。联合评估HCC患者疗效的价值最大。表明HCC患者血清MMP-9、HIF-1α水平与患者接受TACE治疗后疗效情况具有一定的关系。分析原因可能是由于血清MMP-9可以对肿瘤表面的细胞外基质造成破坏,对于肿瘤浸润转移的过程具有一定的影响;HIF-1α是具有转录活性的核蛋白,其与缺氧适应、炎症发展及肿瘤生长等活动密切相关。由于血清MMP-9、HIF-1α对于恶性肿瘤的状态变化均具有一定的敏感度,因此可以用于预测HCC患者在接受TACE治疗后效果的预测。

Kaplan-Meier曲线显示,治疗后血清MMP-9低水平患者2年生存率为69.39%,高于高水平患者44.00%(Log Rank χ2=5.761,P<0.05);HIF-1α低水平患者生存率为71.43%,高于高水平患者40.00%(Log Rank χ2=8.819,P<0.05)。表明血清MMP-9、HIF-1α低水平患者的生存率高。分析原因可能是由于血清MMP-9在肿瘤细胞介导的细胞外降解中起到重要作用; HIF-1α是简介促进癌症进展的核蛋白。上述两种因子处于高水平时均对肿瘤的浸润转移起到一定的作用,因此经TACE治疗后,血清MMP-9、HIF-1α低水平患者体内HCC的侵袭转移受到抑制,存活时间延长。

综上所述,采用TACE治疗HCC患者,对于调节患者血清MMP-9、HIF-1α水平具有一定的作用,通过检测血清MMP-9、HIF-1α水平可以对TACE治疗HCC患者的疗效进行预测,具有一定的临床应用价值。