适用于设施化栽培榆黄蘑菌株品种的筛选

李馨颖，孟子寻，于德威，姜婉竹，徐济责，唐玉琴

（吉林农业科技学院农学院，吉林 132101）

榆黄蘑（Pleurotus citrinopileatusSing）属担子菌亚门（Basidiomycotina），蘑菇纲（Hymenomycetes），蘑菇目（Agaricales），侧耳科（Pleurotaceae），侧耳属（Pleurotus），又称为金顶侧耳或黄金菇[1]。榆黄蘑广泛分布于我国吉林、辽宁、黑龙江等地区及国外东南亚、欧洲、北美洲等地[2]。榆黄蘑夏秋季生长在阔叶倒木或者枯立木上，是中高温型菌类[3]。榆黄蘑具有丰富的遗传多样性，同时具有抗氧化、抗肿瘤、降血糖、降血脂等功效，具有很高的营养价值[4-6]。

榆黄蘑生长力旺盛，对环境适应性强，栽培周期短，栽培范围广泛，产出比投入高，适合生产和栽培，可进行大规模的设施化栽培，具有广阔的发展前景[7]。但榆黄蘑设施化栽培技术以及适于设施化栽培菌株筛选不够成熟。我国榆黄蘑人工栽培始于20世纪70年代，根据环境条件不同，采用的栽培方式有所不同[8]。吉林省已选育“旗金1号”“旗金2号”“旗金3号”“蕈谷2号”“吉金1号”“旌旗1号”等榆黄蘑品种，但生产中所使用的菌种仍以野生菌株驯化为主。由于技术水平不足、生产方式落后等，导致产量与品质无法得到保证[9]。课题组近年在榆黄蘑的种质资源采集、鉴定、栽培等方面进行了大量研究，本研究在此基础上，筛选出8株榆黄蘑菌株。在设施化栽培的条件下，参照DUS测试指南，以层架式栽培方法进行出菇试验[10]。通过比较每丛子实体数目、菌盖大小、菌盖厚度、菌盖凹陷程度和菌柄直径、菌柄长度、原基出现时间、第一潮菇采收时间、产量等农艺性状，筛选出商品性好、整齐度高、生长周期短、产量高适用于设施化生产的榆黄蘑菌株。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株 供试榆黄蘑菌株分别为22PC-1、22PC-2、22PC-4、22PC-8、22PC-11、32PC-13、52PC-14、22PC-20，供试菌株均来源于吉林农业科技学院菌物资源开发与利用实验室。

1.1.2 供试仪器 BJ-CD SERIEC型超净工作台（重庆捷伦科技公司），IN55型恒温培养箱（昆明倍捷科技有限公司），MLS-3781L型高压蒸汽灭菌锅（上海五相仪器仪表有限公司），DW-FL270型冰箱（重庆捷伦科技公司），DHG-9920A型电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）。

1.1.3 供试培养基 PDA培养基：马铃薯200 g、琼脂20 g、葡萄糖20 g、水1 000 mL、pH自然。麦粒培养基：麦粒加水煮至麦粒膨胀未破损且无白心后，捞出沥干水分，即可装瓶、灭菌。栽培种培养基：78%木屑、20%麸皮、1%石灰、1%葡萄糖。

1.2 试验方法

1.2.1 菌袋制备及接种 按照栽培种培养基配方制作菌袋，栽培袋规格长28 cm、宽14 cm，高压灭菌后进行冷却接种，每个菌株10袋，重复3次，具体操作方法参照学者杨琳发表的《榆黄蘑高产栽培技术》[11]。

1.2.2 发菌管理 将完成接种的栽培袋移入发菌室，层架排放，注意通风，及时查看有无杂菌污染并进行处理[8]。

1.2.3 出菇管理 菌丝长至满袋后移入出菇室，随机排列并给予适当的散射光，出菇室温度保持在20 ℃，空气相对湿度保持在95%，每1 h洒水一次，适时通风，采用单侧开口的出菇方式[12]。

1.2.4 采收管理 榆黄蘑菌盖即将展开并且菌盖边缘微微内卷时即可采收。可使用剪刀采收，或用手握住子实体菌柄基部轻轻旋下，采收后的子实体需进行料面清理。

1.3 数据分析

采用Excel软件统计试验数据，采用SPSS 26.0软件进行相关性分析和显著性分析。

2 结果与分析

2.1 菌株真实性鉴定

采用对峙培养法鉴定菌株的真实性，具体表现为拮抗反应，当菌株之间产生拮抗线时，表明供试菌株之间存在生理特性的差异，即真实菌株。8株供试菌株两两对峙培养，共获得28个组合（见表1）。由图1可知，菌株22PC-2和32PC-13在培养基中产生拮抗线的正反面，表明2株供试菌株之存在差异。除菌株22PC-2和32PC-13，其余组合能够产生拮抗线，表明8株供试菌株之间均存在差异，可用于后续的品种比较试验。

图1 22PC-2与32PC-13菌株间拮抗反应

表1 供试菌株的拮抗反应

注：“+”表示发生拮抗反应。

2.2 生育期调查

设施化生产过程中，生产周期是影响企业收益的重要因素之一。由图2可知，供试8株菌株，菌株22PC-2出菇周期最短，为14 d，其次为菌株22PC-1、32PC-13、52PC-14、22PC-20，出菇周期均为17 d；菌株22PC-4、22PC-8、22PC-11出菇周期最长，均为18 d。

图2 供试菌株的生育期调查

2.3 表型性状统计分析

8株供试菌株性状统计分析如表2所示，供试菌株的变异系数在22%～47%，其中菌盖厚度的变异范围最小，为22%；菌盖凹陷的变异范围最大，为47%。

表2 供试菌株的表型性状统计分析

2.4 相关性分析

由表3可知，对供试菌株的8个农艺性状进行相关性分析，结果表明每丛子实体数目与菌盖直径、菌盖厚度、菌盖凹陷、菌柄直径呈负相关，与菌盖颜色、菌柄长度、产量呈正相关。菌盖直径与菌柄长度、产量呈负相关，与菌盖厚度、菌盖凹陷、菌盖颜色、菌柄直径呈正相关。菌盖厚度与菌盖颜色、菌柄长度呈负相关，与菌盖凹陷、菌柄直径、产量呈正相关。菌盖凹陷与菌柄长度、产量呈负相关，与菌盖颜色、菌柄直径呈正相关。菌柄长度与菌柄直径、产量呈正相关。菌柄直径与产量呈正相关。菌柄长度与产量呈显著正相关，即菌柄越长产量越高。增加榆黄蘑菌柄长度，能够提高其产量，可为榆黄蘑育种工作提供参考价值。

表3 供试菌株的相关性分析

2.5 优良菌株筛选

由表4可知，每丛子实体数目方面，菌株22PC-1、22PC-2、22PC-8、22PC-20每丛子实体数目较多，为25～27。菌盖直径方面，菌株22PC-4和22PC-20菌盖直径较大，达到5.19 cm，其次为菌株22PC-2，为4.53 cm，菌株52PC-14菌盖直径最小，为3.51 cm。菌盖厚度方面，菌株22PC-20菌盖厚度较大，达到0.52cm，其次为菌株22PC-4和32PC-13，为0.51 cm，菌株22PC-8菌盖厚度最小，为0.45cm。菌盖凹陷方面，菌株22PC-4凹陷程度最大，达到4.03 cm，菌株32PC-13凹陷程度最小，为1.49 cm。菌盖边缘波状方面，菌株22PC-1、22PC-4、22PC-11、32PC-13、22PC-20菌盖边缘有波状，其余菌株菌盖边缘无波状。菌盖颜色方面，菌株22PC-8颜色浅黄（赋值为1），菌株22PC-1、22PC-2、22PC-4颜色黄（赋值为2）。菌株22PC-11、32PC-13、52PC-14、22PC-20颜色深黄（赋值为3）。菌柄长度方面，菌株22PC-1菌柄最长，达到4.55 cm，其次为22PC-2，达到4.10 cm，菌株22PC-20菌柄长度最短，为3.11 cm。菌柄直径方面，菌株22PC-1和22PC-20菌柄直径最大，达到0.69 cm，菌株52PC-14菌柄直径最小，为0.55 cm。产量方面，菌株22PC-1产量最高，达到121.30 g，菌株22PC-4产量最低，为80.80 g。综上，菌株22PC-1在每丛子实体数目、菌柄长度、产量方面存在优势，菌株22PC-20在菌盖直径、菌盖颜色方面存在优势。

表4 供试菌株的显著性分析

由图3可知，菌盖颜色分为浅黄、黄和深黄。菌盖边缘状态分为边缘有波状和边缘无波状。图3A为菌株22PC-8，菌盖颜色浅黄、菌盖边缘无波状；图3B为菌株22PC-1，菌盖颜色黄、菌盖边缘有波状；图3C为菌株32PC-13，菌盖颜色深黄、菌盖边缘有波状。

图3 子实体表型特征

3 结论与讨论

随着我国榆黄蘑栽培的发展，人们也逐渐意识到榆黄蘑的价值，寻常的栽培模式已经不能满足人们对榆黄蘑产量日益增长的需求，探究适于设施化栽培榆黄蘑菌株的筛选，能够在一定程度上解决榆黄蘑的设施化栽培问题。本研究以筛选在设施化栽培模式下，生长速度快、产量高并且朵形好的菌株为试材，参照DUS测试指南方法进行出菇试验，通过菌株真实性鉴定、生育期调查、表型性状统计分析以及相关性分析进行优良菌株筛选。结果表明在表型性状分析中，供试菌株的变异范围在22%～47%，在相关性状分析中发现，菌柄长度与产量呈正相关，即菌柄越长产量越高，可为相关性状的品种选育提供参考依据。通过数据分析，筛选出优良菌株22PC-1（每丛子实体数目较多、菌柄长度较长、产量较高、生育期较短）和22PC-20（菌盖直径较大、菌盖颜色黄、商品性好）能够适用于榆黄蘑设施化生产。本研究筛选出的优良菌株，不仅为榆黄蘑设施化生产提供菌株，更丰富了榆黄蘑的种质资源，为后续新品种选育提供试验材料。