一例犬瘟热被误诊为感冒的诊断报告

宋永奇，陈阳飞，王 妍，范丽哲，屈小浩

（1.汝州职业技术学院，河南汝州 467500；2.福润德宠物医院，河南郑州 450000；3.河南华大创新生命科技有限公司，河南新乡 453000；4.河南泰庆质量检测有限公司，河南郑州 450000）

犬瘟热（Canine distemper，CD）是由犬瘟热病毒（Canine distemper virus，CDV）引起的一种高度接触性、致死性犬科动物传染病。患犬感染前期主要表现为精神沉郁、嗜睡、食欲不振或废绝、咳嗽、打喷嚏、眼鼻分泌水样或脓样分泌物等，后期可见神经症状及死亡[1]。患犬感染前期所表现出的症状与感冒有极高的相似性，临床上若不注意鉴别诊断，极容易误诊感冒。笔者近期接诊一例犬瘟热误诊为感冒的病例，现报告如下，以供临床兽医工作者们参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 病例样本

10 月龄萨摩耶，公，体重20kg，免疫过两针“犬五联” 疫苗。洗澡后第2 天开始出现症状，主要表现为食欲降低、精神沉郁、打喷嚏、咳嗽、流脓鼻涕等症状，遂被带到某动物医院就诊。首次接诊医生未做化验，按照犬感冒进行治疗后，精神与食欲略有好转，依旧可见打喷嚏，少量流鼻涕症状。3 周后患犬开始出现四肢抽搐并伴随吠叫表现，遂转至福润德宠物医院治疗。

1.1.2 主要试剂

血常规检查试剂购自美国IDEXX 公司；犬瘟热病毒/犬细小病毒/犬腺病毒I 型抗体三联定量检测试剂购自海卫特（广州）医疗科技有限公司；犬瘟热抗原检测卡（胶体金法）购自韩国Bionote 公司；病毒DNA/RNA 提取试剂盒购自南京诺唯赞生物科技股份有限公司；犬瘟热病毒荧光RT-PCR 试剂盒购自深圳市刚竹医疗科技有限公司。

1.1.3 主要仪器

ProCyte Dx 全自动动物血液分析仪购自美国IDEXX 公司；干式荧光免疫分析仪购自海卫特（广州）医疗科技有限公司；高速离心机购自湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；荧光定量PCR 仪购自杭州博日科技股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 体格检查

患犬精神略显沉郁，鼻流清亮水样液体，静卧时可见四肢抽搐，活动时抽搐表现不明显。体温、心率、呼吸频率、眼结膜颜色等未见明显异常。

1.2.2 血常规检查

对患犬进行后肢隐静脉采血，将血液置于含有EDTA-K2 的抗凝管中，充分混匀后，严格按照机器操作规程于ProCyte Dx 全自动动物血液分析仪中进行红细胞、白细胞、血小板等指标检测。

1.2.3 抗体检测

对患犬进行后肢隐静脉采血，将血液置于促凝管中静置，待血液完全凝固后，4000r/min 离心10min，取上层清亮的血清，严格按照检测试剂与干式荧光免疫分析仪的操作说明，进行犬瘟热病毒、犬细小病毒、犬腺病毒I 型抗体检测。

1.2.4 病原检测

用无菌棉签采集患犬眼结膜、口腔和鼻腔分必物，置于犬瘟热抗原检测样本稀释液中充分搅拌溶解后取样本液按照犬瘟热抗原检测卡操作说明进行犬瘟热抗原检测；分别吸取EDTA 抗凝血和犬瘟热抗原检测用样本液各150μL 于无DNA/RNA 酶的1.5mL 离心中混匀，按照病毒DNA/RNA 提取试剂盒操作说明进行病毒核酸提取后，吸取20μL 核酸加至预分装好且冻干的犬瘟热病毒荧光PCR 检测管内，同时设立阴阳性对照反应管，按照以下程序进行犬瘟热病毒核酸检测。反转录：48℃、10min，1 个循环；预变性：95℃、10s，一个循环；变性：95℃、10s，退火延伸：60℃、30s，40 个循环并采集荧光信号。

2 结果

2.1 血常规检查

由表可知，患犬红细胞数、红细胞比容、血红蛋白含量、淋巴细胞数降低，嗜碱性粒细胞、平均血小板体积升高，其他指标未见明显异常。

表1 血常规检查结果（异常部分）

2.2 抗体检测

由表2 可知，瘟热病毒抗体、犬细小病毒抗体、犬腺病毒I 型抗体均为阳性。

表2 3 种病毒抗体检测结果

2.3 病原检测

用棉拭子采集患犬眼结膜、口腔、鼻腔分泌液，使用Bionote 公司生产的犬瘟热抗原检测试纸条进行犬瘟热抗原检测，结果为阴性；用犬瘟热病毒荧光定量PCR 检测试剂盒进行犬瘟热病毒核酸检测，患犬样本Ct 值为25.14，具有典型的 “S” 型扩增曲线（图1），判为犬瘟热病毒核酸检测阳性。

图1 犬瘟热病毒核酸荧光定量RT-PCR 扩增结果

3 讨论

犬瘟热是宠物犬高发的传染病之一，各年龄段犬均可发病，尤以小于12 月龄的未成年犬高发[2-4]，且未免疫犬瘟热疫苗犬只较免疫或未完全免疫者更易发病[2,3]。本病例中的患犬为10 月龄，处于犬瘟热的高发期，然而这并未引起首位接诊兽医的重视。近些年来，随着犬瘟热疫苗接种的普及，该病的发病率显著降低，根据温慧明[5]对大连市犬瘟热疑似病例调查结果看，该市宠物犬犬瘟热年均发病率为5.2%，而孟璞岩[6]对南昌市的调查报告则显示，犬瘟热的发病率仅为2.83%。事实上，大城市尤其是一二线城市的宠物诊疗机构常年接诊的犬瘟热病例也是屈指可数，这种情况很容易导致临床兽医和宠物主们对犬瘟热的麻痹大意。此外，主诉对患犬已经做过两次犬瘟热疫苗免疫且发病前有洗澡受凉史，加之临床症状与感冒极为相似，宠物主和接诊兽医均放弃对犬瘟热的排查，这都是导致本次误诊发生的原因。

一个值得思考的现象是，我们在接诊后，当即采集了患犬的眼结膜、口鼻拭子，严格按照犬瘟热胶体金检测卡的操作说明对样本进行了犬瘟热病毒检测，但结果显示却为阴性。如果检测至此结束，那么该病例依旧会被判为犬瘟热阴性。基于检测费用和方便快捷因素的考量，胶体金检测卡会成为宠物主和兽医首选的检测方法。然而研究显示，与RT-PCR 比较，犬瘟热胶体金检测卡的误诊率可以高达7.32%[3]，这应当引起宠物临床兽医们的注意。遗憾的是，为了提高检出率，在处理样本时，实验室将眼结膜、口鼻拭子与血液样本混合后提取了核酸。所以，我们无法进一步确认眼结膜、口鼻拭子中含有犬瘟热病毒与否，也就无法直接判断是样本本身不含犬瘟热病毒或含毒量低导致胶体金检测卡结果阴性，还是检测卡本身敏感性太低所致的阴性。

就本报告而言，除了犬瘟热后期典型的神经症状外，我们主要依赖于目前主流的荧光PCR 技术，在专业的PCR 实验室，通过严格、精细的核酸提取和荧光定量RT-PCR 检测，最终得到了可信的阳性结果。现如今，随着分子生物学诊断技术的发展和普及应用，国内绝大多数的宠物治疗机构都具备了分子诊断能力，而配套的设备多却为快速诊断设备，这些设备具有操作简单、省时、快捷等优点，但因此种检测均不是在专业的PCR 实验室内完成，且操作人员水平参差不齐，结果准确性或许难以保证，由此导致的医疗纠纷屡见不鲜，这也应引起广大宠物诊疗从业人员的注意。

无论是犬瘟热还是感冒，患犬前期均可以表现出发热、咳嗽、打喷嚏、流鼻涕等上呼吸道感染症状，单从症状上去诊断，临床兽医很容易将犬瘟热误诊为感冒[7]。另外，犬瘟热还容易被误诊为犬细小病毒感染、犬传染性肝炎、犬传染性气管支气管炎、支气管肺炎、犬弓形虫等[8-10]，临床应当注意鉴别诊断。

4 结论

综合患犬临床症状及实验室检查，本案例确诊为犬瘟热病毒感染。临床上若仅从发病早期症状去主观判断，极易将犬瘟热误诊为感冒，应结合实验室诊断进行确诊，这应当引起广大兽医工作者的注意，以免错失最佳治疗时间。