马铃薯雪花全粉优化白鬼笔培养基配方的效果

刘倾城,卢颖颖,尚念杰,李彪,龚光禄,黄万兵*

（1.贵州省农作物品种资源研究所，贵州 贵阳 550006；2.贵州省食用菌育种重点实验室，贵州 贵阳 550006；3.贵州省食用菌现代农业产业技术体系资源育种功能实验室，贵州 贵阳 550006）

白鬼笔（Phallus impudicus）是鬼笔科鬼笔属的药食两用珍稀食用菌，主要分布在我国贵州、广东、山西等地［1-2］。白鬼笔可入药，在活血祛痛、调节免疫、消水肿、抗凝血甚至抗癌方面有一定功效［3-5］，具有较大的市场空间和人工栽培价值。马铃薯全粉是以新鲜马铃薯为原料，经过挑选、清洗、去皮、切片、漂洗、预煮、冷却、蒸煮、捣泥、脱水干燥等工艺，制作成的片状、细颗粒状或粉末状的马铃薯加工产物［6］。根据加工工艺的不同，马铃薯全粉又分为马铃薯雪花全粉和马铃薯颗粒全粉［7］。马铃薯全粉广泛应用于食品、制药、微生物培养基等领域。马铃薯培养基可提供微生物培养所需要的碳氮源、生长因子等，宜培养真菌。以马铃薯浸煮汁为主料的培养基配方，因马铃薯浸煮过程不统一，导致其营养成分和营养结构的不稳定，会对药食用菌的人工选育和栽培造成不利影响。为提升白鬼笔培养基营养成分与营养结构的稳定性，用营养结构和营养成分相对稳定的马铃薯雪花全粉优化白鬼笔培养基配方，以期筛选出白鬼笔人工栽培的最佳培养基配方，供生产上推广使用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 供试菌株 白鬼笔B-L1，由贵州省食用菌育种重点实验室提供。

1.1.2 供试培养基 基础培养基（对照培养基）：马铃薯360 g、葡萄糖10 g、蛋白胨2.5 g、酵母浸粉0.5 g、磷酸二氢钾0.9 g、硫酸镁1.8 g、琼脂10 g、蒸馏水1 000 mL。马铃薯雪花全粉梯度培养基：分别用马铃薯雪花全粉0～36 g全部替代马铃薯浸煮汁，具体见表1。

表1 马铃薯雪花全粉优化培养基梯度表

1.2 试验方法

1.2.1 基础培养基的制作将360 g马铃薯加入600 mL蒸馏水中，加热至马铃薯软烂，用5层细纱布过滤得到马铃薯浸煮汁，在马铃薯浸煮汁中分别加入葡萄糖10 g、蛋白胨2.5 g、酵母浸粉0.5 g、磷酸二氢钾0.9 g、硫酸镁1.8 g，并加入琼脂10 g后加热至琼脂完全融化，用蒸馏水将培养基定容至1 L备用。

1.2.2 梯度培养基的制作 按照表1的马铃薯雪花全粉含量，分别将马铃薯雪花全粉溶于800 mL蒸馏水中充分搅拌均匀，替代马铃薯浸煮汁，并分别加入葡萄糖10 g、蛋白胨2.5 g、酵母浸粉0.5 g、磷酸二氢钾0.9 g、硫酸镁1.8 g，加入琼脂10 g后加热至琼脂完全融化，用蒸馏水将培养基定容至1 L备用。

1.2.3 菌丝培养及测定 供试9个培养基经过高温灭菌后倒入90 mm一次性培养皿中，待冷却凝固后，用10 mm直径打孔器取白鬼笔B-L1接种块种于培养皿中央，放置于25℃恒温培养箱中进行避光培养，采用十字划线法标记刚萌发时的菌落直径，培养28 d后记录菌丝直径并停止划线，每个培养基重复5次。

菌丝生长速度=（最后一次所测菌落直径-接种块直径）/培养天数×2

2 结果与分析

2.1 白鬼笔菌丝的生长势

白鬼笔菌丝在不同供试培养基中均能生长，但其生长势存在明显差异。从图1和表2可以看出，1～7号培养基的白鬼笔菌丝生长势均较优，表现为气生菌丝较为丰富、健壮、浓密、洁白、菌落完整且边缘整齐；基础培养基的白鬼笔菌丝生长势次之，较浓密，能形成完整的菌落但气生菌丝生长较弱；而8号（空白）培养基白鬼笔菌丝的生长势较差，气生菌丝稀疏且几乎不可见，无法形成完整菌落。

图1 不同供试培养基白鬼笔菌丝的生长势

表2 不同培养基白鬼笔的菌丝生长

2.2 白鬼笔菌丝的生长速度

白鬼笔菌丝在不同供试培养基上的生长速度存在一定差异。由表2可知，基础培养基和1～7号培养基的白鬼笔菌丝生长速度均极显著高于8号（空白）培养基，其中，3号培养基的白鬼笔菌丝生长速度最快，达2.482 mm/d，显著高于1号、2号、4号、5号培养基和基础培养基，说明马铃薯雪花全粉添加量为26 g时，有利于白鬼笔菌丝的生长且明显优于基础培养基；1号、2号、4号、5号培养基与基础培养基的白鬼笔菌丝生长速度无显著差异；6号、7号培养基的白鬼笔菌丝生长速度极显著低于基础培养基，说明随着马铃薯雪花全粉添加量的降低，菌丝生长速度受到抑制。

3 小结

马铃薯浸煮汁与马铃薯雪花全粉均有利于促白鬼笔菌丝的生长，其中，3号配方培养基白鬼笔菌丝的生长速度最高，达2.482 mm/d，显著或极显著高于其余供试培养基，且白鬼笔菌丝生长势健壮、浓密，优于以马铃薯浸煮汁为主料的培养基。表明，3号配方培养基是白鬼笔的最佳优化培养基，即马铃薯雪花全粉26 g、葡萄糖10 g、蛋白胨2.5 g、酵母浸粉0.5 g、磷酸二氢钾0.9 g、硫酸镁1.8 g、琼脂10 g、蒸馏水1 000 mL。马铃薯雪花全粉具有极强的抗氧化性，且其营养成分与分子结构稳定［8］，用马铃薯雪花全粉优化白鬼笔培养基配方，有利于稳定白鬼笔所需培养基的营养成分和营养结构，从而促进白鬼笔菌丝的生长。