Xpert MTB/RIF技术在诊断新发肺结核中的应用价值分析

李小玉，李科宇

（长沙市第一医院结核科，长沙 410005）

结核病为临床常见重大传染性疾病之一，是由结核分枝杆菌（MTB）感染所致，可侵犯人体全身多种器官，主要侵犯肺脏，可引起肺结核，主要表现为咳嗽、咯血、乏力、低热、盗汗等。活动性肺结核（APTB）为新发肺结核的主要表现类型，患者可见部分涂阴肺结核，若不及时治疗，可逐渐发展为肺癌等，影响患者预后[1-2]。对新发肺结核患者进行早期诊断为治疗的关键，目前，国内结核病防治机构多以痰培养、痰涂片检查对新发APTB患者进行诊断，但痰培养耗时较长，约需2～6周，且痰涂片的阳性检出率较低，均无法满足临床快速诊断的需求。近年来，结核分枝杆菌利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检查（Xpert MTB/RIF）技术是逐渐被应用到肺结核临床诊断的新方法，其检测基础为半巢式实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）技术，2 h内即可从临床样本中检测出MTB，具有生物安全性好、耗时短等优势，但其对新发肺结核患者的临床诊断价值尚未完全明确[3-4]。本研究对400例疑似肺结核患者进行回顾性研究，旨在进一步分析Xpert MTB/RIF技术在新发肺结核中的诊断价值，以期为临床诊治提供参考，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取2020年7月－2021年3月在我院就诊的疑似肺结核患者400例为研究对象，男211例，女189例；年龄18～79岁，平均（51.87±6.89）岁。本研究经我院医学研究伦理委员会批准同意。

1.2 诊断标准

依据《中华人民共和国卫生行业标准-肺结核诊断（WS 288-2017）》[5]为新发APTB、涂阴性肺结核的诊断依据，新发APTB诊断标准为痰涂片抗酸杆菌、痰培养MTB及组织病理学检查为阳性；从未因结核病应用过抗结核药品治疗；MTB痰培养阴性，但有结核病相关的临床症状、体征，符合影像学检查相关征象，且抗结核药物治疗有效。涂阴性肺结核诊断标准：1）3次痰涂片阴性，胸部影像学检查可见与新发APTB相符的病变且伴有结核病相关的临床症状、体征者；2）3次痰涂片阴性，胸部影像学检查可见与新发APTB相符的病变，抗结核抗体检查阳性者；3）3次痰涂片阴性，胸部影像学检查显示与新发APTB相符的病变，结核菌素试验强阳性者；4）3次痰涂片阴性，胸部影像学检查显示与新发APTB相符的病变，肺外组织病理检查证实为结核病变者；5）3次痰涂片阴性的疑似肺结核病例，经诊断性治疗或随访观察，可排除其他肺部疾病者。凡符合上述条件之一者为涂阴性肺结核。

1.3 纳入标准

1）有体质量减轻、发热、咳嗽、盗汗等肺结核症状，胸部影像学检查提示疑似新发APTB病者；2）初诊，非化疗或肺切除手术后失败/复发者；3）肺外无MTB感染，且非复治肺结核者；4）痰涂片、痰培养及Xpert MTB/RIF技术检查资料等临床资料完整者等。

1.4 排除标准

1）临床诊断存在异议者；2）既往已对结核进行过治疗者；3）伴有认知功能、沟通障碍者；4）并发其他严重传染病者；5）未同时进行痰涂片、痰培养及Xpert MTB/RIF技术检查者等。

1.5 检查方法

1.5.1 检查标本 研究对象入组后收集3份痰液，包括即时、晨起及夜间痰液，指导患者漱口3次（清水），用力咳出气管渗出痰液，放弃第1口痰液，取第2口痰液，并置入无菌痰杯（3～5 mL），注意即刻送检以防止放置时间过长引起的变质、杂菌混入等。

1.5.2 检查方法 3份痰液标本均行痰涂片、痰培养、Xpert MTB/RIF技术检测。痰涂片检测：采用直接涂片法，将痰涂片干燥后置于染色架，加热固定，滴加苯酚复红，染色10 min；冲去初染液，脱色2 min（乙醇溶液），痰膜无可视红色后加美兰染液复染，冲去染液（流水），干燥后进行镜检。痰培养检查：采用简单法，取适量痰液标本，加入等量4%氢氧化钠溶液，震荡混匀，然后吸取100 μL均匀接种于BACTECMGIT 960全自动分枝杆菌培养仪（上海悦心同舸医疗器械有限公司）中进行培养与鉴定。Xpert MTB/RIF技术检测：痰液标本处理后静置15 min，取1 mL痰液标本，加入Gene Xpert试剂（2倍体积），移至塑料反应盒，并将其置于Xpert MTB/RIF仪器（美国Cepheid公司）中进行检测，2 h内可出报告，探针循环阈值≤38为阳性。所有检查均参照《结核病实验室检验规程》[6]及说明书进行。

1.6 观察指标

1.6.1 疑似肺结核患者诊断情况 记录400例疑似肺结核患者新发APTB、涂阴性肺结核及非肺结核病变的检出情况。

1.6.2 新发APTB患者不同检查方法的MTB阳性检出率 根据检查结果记录痰涂片、痰培养及Xpert MTB/RIF技术的MTB阳性检出率。

1.6.3 涂阴性肺结核患者痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查的MTB阳性检出率 记录痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查的MTB阳性检出率。

1.6.4 痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查对新发APTB的诊断价值分析 根据检查结果分析痰培养、Xpert MTB/RIF技术对新发APTB的诊断价值，其灵敏度= [TP/（TP+FN）]×100%，特异度= [TN/（TN+FP）]×100%，阳性预测值= [TP/（TP+FP）]×100%；阴性预测值= [TN/（TN+FN）]×100%；诊断符合率=（TP+TN）例数/检查例数×100%，式中：TP为真阳性，TN为真阴性，FP为假阳性，FN为假阴性。

1.7 统计学方法

使用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料以例（%）表示，使用χ2检验进行比较，多组间比较采用χ2趋势检验。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 疑似肺结核患者诊断情况

400例疑似肺结核患者中最终确诊新发APTB患者300例，其中涂阴性肺结核患者190例。

2.2 新发APTB患者不同检查方法的MTB阳性检出情况比较

见表1。

表1 新发APTB患者不同检查方法的MTB阳性检出情况比较（n = 300）

2.3 涂阴性肺结核患者痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查的MTB阳性检出情况比较

见表2。

表2 涂阴性肺结核患者痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查的MTB阳性检出情况比较（n = 190）

2.4 痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查对新发APTB的诊断价值分析

见表3。

表3 痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查对新发APTB的诊断价值分析 %

3 讨论

新发肺结核属于严重呼吸道传染性疾病，患者因感染MTB可诱发一系列病理反应，导致局部支气管扭曲、肺部淋巴血液回流受阻，可进一步导致致癌物质长期滞留集中于肺，增加癌变风险[7-8]。但因MTB基因变异、宿主营养、免疫体质的增强等因素，大部分患者无典型结核症状、体征，且部分患者可能无明显症状，使得传统影像学诊断方法面临挑战，容易引起误诊、漏诊等，不利于患者预后。现阶段，新发肺结核检查主要为细菌学实验室检查，结合临床表现、胸部影像学、流行病学等进行综合诊断，但灵敏度低，周期长，容易误诊、漏诊导致患者错失最佳治疗时机[9-10]。

MTB的培养是一个相对复杂和缓慢的过程，且结核抗体特异性差。常用检查方法中痰涂片、痰培养检查操作烦琐，得到检查结果所需周期相对较长[11-12]。本研究结果显示，400例疑似肺结核患者中最终确诊新发APTB患者300例，其中涂阴性肺结核患者190例，且Xpert MTB/RIF技术检查的MTB阳性检出率为64.33%，高于痰培养检查的50.67%及痰涂片检查的33.33%，且痰培养检查的MTB阳性检出率高于痰涂片检查，进一步分析痰培养、Xpert MTB/RIF技术检查涂阴性肺结核患者的MTB阳性检出率发现，Xpert MTB/RIF技术检查的MTB阳性检出率为45.79%，高于痰培养检查的32.11%，提示Xpert MTB/RIF技术对新发APTB及涂阴性肺结核患者的MTB阳性检出率较高。

本研究发现，Xpert MTB/RIF技术对新发APTB的灵敏度、诊断符合率较高，临床诊断价值高。近年来，随着人们生活水平的提高，无法获取合格痰标本的患者越来越多，可能出现含菌量少的情况，使得在痰涂片检查中对玻片上的黏附力较差，染色后可能引起待检成分大量丢失，导致诊断灵敏度、诊断符合率降低。痰培养检查可能在酸、碱前处理时损伤痰液标本中的MTB活性，影响患者临床诊断[13-14]。Xpert MTB/RIF技术是一种全自动封闭检测系统，有交叉污染少、生物安全要求较低、快速、操作简单等技术优势，可提高对新发APTB患者的诊断灵敏度、诊断符合率，更好地辅助临床医生进行诊断[15-16]。

综上所述，Xpert MTB/RIF技术对新发APTB及涂阴性肺结核患者的MTB阳性检出率均较高，且对新发APTB的灵敏度、诊断符合率较高，具有较高的临床诊断价值。