妊娠期高血压患者血清miR-15b、Zeste 同源物增强子-2 表达水平及临床意义

王小钰， 陈丽平， 汤卫春， 陆奕玲， 王 莹

南通大学第二附属医院(南通市第一人民医院) 妇产科，江苏 南通 226001

妊娠期高血压以高血压、蛋白尿、水肿为主要症状，随着病情发展，可诱发子痫，威胁母婴生命安全[1-5]。 近年来，妊娠期高血压的发病率呈逐渐上升趋势，其已成为孕产妇、围生儿病死率升高的主要原因之一[6]。 因此，早期预测和诊断妊娠期高血压是妇产科的工作重点。 临床上判定妊娠期高血压多通过生化指标、临床症状等，遗传学及分子生物学等新技术也被逐渐应用[7-8]。 miR-15b 作为miRNA 家族的主要成员之一，其水平升高可反映机体的缺血缺氧状态[9-13]，而胎盘缺血缺氧是妊娠期高血压的发病原因之一。在多种疾病中，miRNA 可靶向调控Zeste 同源物增强子-2(enhancer of Zeste homolog-2，EZH2)[14-16]。 本研究旨在检测妊娠期高血压患者血清miR-15b、EZH2 的表达水平，并分析其临床意义。 现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取南通大学第二附属医院自2020 年1 月至2021 年6 月收治的120 例孕妇为研究对象。 纳入标准:年龄22 ~34 岁；分娩时孕周37 ~42 周；妊娠次数≤3 次；单胎足月分娩；妊娠前3 个月月经无异常；文化程度在小学以上。 排除标准:存在糖尿病、死胎或死产史；合并慢性血管性疾病；无法按时完成产检；分娩后3 个月无法完成随访。妊娠期高血压诊断标准:参考«妇产科学(8 版)»[17]，妊娠≥20 周首次出现高血压，收缩压≥140 mmHg(1 mmHg ＝0.133 kPa)和(或)舒张压≥90 mmHg，产后12 周内恢复正常，尿蛋白检测呈阴性。 轻度子痫:妊娠20 周后收缩压≥140 mmHg 和(或)舒张压≥90 mmHg，尿蛋白≥0.3 g/24 h，或尿蛋白/肌酐比值≥0.3，或随机尿蛋白≥( ＋)。 重度子痫:子痫前期孕妇出现血压和(或)尿蛋白水平持续升高，发生母体器官功能受损或胎盘-胎儿并发症。 根据妊娠期情况，将孕妇分入A 组(妊娠期高血压孕妇)、B 组(轻度子痫孕妇)、C 组(重度子痫孕妇)及D 组(健康孕妇)，每组各30 例。A 组平均年龄(28.48 ± 3.17)岁；初产17 例，经产13 例；孕前平均体质量指数(23.02 ±1.56)kg/m2。 B 组平均年龄(28.69 ±3.21)岁；初产19 例，经产11 例；孕前平均体质量指数(23.18 ±1.62)kg/m2。 C 组平均年龄(28.62 ±3.12)岁；初产20 例，经产10 例；孕前平均体质量指数(23.11 ±1.51)kg/m2。 D 组平均年龄(28.53 ±3.16)岁；初产16 例，经产14 例；孕前平均体质量指数(23.06 ±1.48)kg/m2。4 组研究对象一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。 研究对象及其家属均签署知情同意书。 本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 研究方法 4 组孕妇均正常生产。 胎盘娩出后，将胎盘组织在液氮中研磨至粉末，提取胎盘总RNA。 留取孕妇血液标本，提取血浆总RNA。 采用紫外分光光度法测定RNA 浓度，采用反转录聚合酶链式反应和实时定量聚合酶链式反应技术检测miR-15b、EZH2 在血浆和胎盘中的表达情况。

1.3 统计学方法 采用SPSS 22.0 统计学软件对数据进行处理。 计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t 检验。 采用Spearman 法进行相关性分析。 以P <0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

D 组、A 组、B 组、C 组血浆miR-15b 分别为(1.42 ±0.35)、(1.68 ±0.41)、(2.59 ±0.58)、(3.82 ±0.67)，胎盘miR-15b 分别为(1.56 ± 0.37)、(1.74 ± 0.46)、(2.66 ±0.59)、(3.96 ±0.71)；D 组、A 组、B 组、C 组血浆EZH2 分别为(105.25 ± 16.87) Mr/103、 (95.33 ± 13.28) Mr/103、(82.69 ±12.74)Mr/103、(75.45 ±10.58)Mr/103，胎盘EZH2分别为(102.11 ±15.84)Mr/103、(90.65 ±13.19)Mr/103、(81.02 ±12.05)Mr/103、(73.15 ±10.08)Mr/103。 与D 组比较，A 组、B 组、C 组血浆和胎盘中的miR-15b 水平更高(P<0.05)，EZH2 水平更低(P < 0.05)；随着病情加重，A 组、B 组、C 组血浆和胎盘中的miR-15b 水平呈逐渐升高趋势(P <0.05)，EZH2 水平呈逐渐降低趋势(P <0.05)。miR-15b 水平与妊娠期高血压、轻度子痫、重度子痫呈正相关(r ＝0.385、0.428、0.518，P <0.05)，EZH2 水平与妊娠期高血压、轻度子痫、重度子痫呈负相关(r ＝ － 0.316、－0.512、－0.568，P<0.05)。

3 讨论

妊娠期高血压是妊娠期特有的疾病，会引起血管痉挛、动脉血压升高，导致脏器灌注不足，诱发相应病理生理改变，给孕妇和胎儿的生命安全构成极大威胁[18-19]。 妊娠期高血压孕妇胎盘多伴有动脉硬化或梗死，使胎盘出现缺血缺氧症状，这主要与滋养层细胞浸润、螺旋动脉生理改变密切相关，过程受基因调控[20-21]。

子痫前期的发生与胎盘滋养细胞氧化应激异常、炎症免疫亢进、侵袭异常等密切相关，miRNA 在妊娠期高血压前期可能通过作用于细胞凋亡、氧化应激及内皮细胞功能障碍分子通路相关蛋白来干预子痫的发生发展[9-10]。 miRNA 主要在细胞质、细胞核中合成，其在转录后基因的调控、表达中扮演重要角色[11]。 miR-15b 作为miRNA 家族的主要成员之一，在机体缺氧缺血时水平会明显升高，并在血浆、胎盘组织中大量表达[9-13]。 这提示，miR-15b 水平升高可反映缺血缺氧状态，而胎盘缺血缺氧是妊娠期高血压的发病原因之一，因此，miR-15b 与妊娠期高血压存在一定关系。 EZH2 是一种转录阻遏因子，参与染色质结构的形成基因表达调节及生长控制[22]，其与细胞过度增殖、肿瘤发生等密切相关。陈芳等[23]认为，EZH2 在宫颈癌患者病灶组织中的表达与临床分期、淋巴结转移、长期预后明显相关。 在肿瘤性疾病中，miR-15b 可能为抑癌基因，其通过靶向作用调控EZH2 基因表达[24]；对于孕妇，miR-15b 通过作用于EZH2 来促进妊娠期高血压的发生发展。

本研究结果显示:与D 组比较，A 组、B 组、C 组血浆和胎盘中的miR-15b 水平更高(P <0.05)，EZH2 水平更低(P<0.05)；随着病情加重，A 组、B 组、C 组血浆和胎盘中的miR-15b 水平呈逐渐升高趋势(P<0.05)，EZH2 水平呈逐渐降低趋势(P <0.05)。 这表明，与健康孕妇比较，妊娠期高血压孕妇的miR-15b、EZH2 表达异常，且随着病情加重，表达异常愈发明显。 本研究结果还显示:miR-15b 水平与妊娠期高血压病情严重程度呈正相关(P <0.05)，EZH2 水平与妊娠期高血压病情严重程度呈负相关(P<0.05)。

综上所述，妊娠期高血压孕妇血清miR-15b 处于高表达状态，EZH2 处于低表达状态，血清miR-15b、EZH2 可作为妊娠期高血压早期预测的新型标志物。 但本研究样本量较小，数据存在一定局限性，后续需加大样本量对结论予以验证。