LncRNA MT1JP在肺腺癌中的表达及临床意义

卞春安，林超宇，田晓奇

(南京医科大学第四附属医院胸外科，江苏 南京 210031)

2021年美国癌症年报报道，肺癌已连续10余年占据全球癌症发病率及死亡率的榜首，其中以非小细胞肺癌中的肺腺癌类型发病率上升最为显著，目前其已成为发病率最高的肺癌病理类型[1-3]。伴随着分子生物学日新月异的进展，目前肺腺癌的相关驱动基因及长链非编码RNA(lncRNA)的相关实验和临床试验进展迅速，但肺腺癌的总体生存率仍然较低，尤其是中晚期肺癌患者的5年生存率不到15%[4-6]。晚期肺癌的侵袭和转移是影响患者生存时间的关键因素，但目前明确的发病和侵袭转移机制仍然不明确[7-8]。因此，为了使肺腺癌患者能够得到早期诊断和精准化、个体化治疗，改善患者的生存质量、延长患者的生存期，不断筛查新的生物标志物和作用靶点就显得十分重要。

近年来，作为表观遗传学重要方向的lncRNA越来越引起人们的重视。研究发现，lncRNA能够对多个系统肿瘤的发生发展起到促癌或抑癌作用，通过表观遗传学等机制直接或间接参与对癌细胞的生长、浸润与转移等多种恶性生物学行为的分子调控[9-11]。随着对lncRNA更深入的研究，科学家发现其在恶性肿瘤的早期诊断及临床靶向治疗方面具有巨大的潜力。因此，积极深入探索lncRNA在肺腺癌发生发展中的作用及其分子调控机制，对进一步提高我国肺腺癌的诊治水平具有重要意义。

LncRNA MT1JP是一种新发现的lncRNA，在肝癌、胃癌、结肠癌中低表达，且起着抑癌的作用[12-15]，但其在肺腺癌组织中表达情况如何，对肺腺癌生物学功能的影响如何，尚鲜见相关报道。本研究着重探讨lncRNA MT1JP在肺腺癌组织中的表达情况，研究其与患者临床病理特征的关系，以期为肺腺癌的诊治提供新的方向。

1 资料与方法

1.1一般资料 本研究回顾性分析2019年1月至2021年12月在南京医科大学第四附属医院胸外科经手术病理确诊的43例肺腺癌患者的病历资料。其中男26例，女17例；年龄34～74岁，平均55.3岁。所有患者术前均未经过放化疗、靶向治疗、免疫治疗等其他治疗，术前相关检查未见明显的心、肝、肺、肾功能障碍，远处转移或其他影响疾病预后的严重疾病。本研究所采用的肺腺癌组织标本及其配对的癌旁组织标本从体内取出后在10 min内迅速冻存到液氮中，以用于后续总RNA的提取实验。肺腺癌样本在采集前均向患者说明情况并签订了知情同意书，并获得了医院伦理委员会的批准。术后定期对患者进行随访，随访时间为患者死亡或随访截止日。

1.2方法 采用实时荧光聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测lncRNA MT1JP在肺腺癌组织及其癌旁组织中的表达水平。将保存的组织样本从液氮中取出后，立即和液氮一起放在研钵中进行研磨，利用Trizol法提取总RNA，使用NanoDrop ND-1000进行RNA浓度和纯度的测定，用RNA反转录试剂盒将选取的OD260/OD280值接近2.0的RNA反转录成cDNA。利用Primer5.0设计引物。LncRNA MT1JP的正义引物为5′-TCGAAATGGACCCCAACTA-3′，反义引物为5′-TGCACTTCTCCGACGTCC-3′；β-actin的正义引物为5′-GTGGCCGAGGACTTTGATTG-3′，反义引物为5′-CCTGTAACAACGCATCTCATATT-3′。根据PCR试剂盒说明配置反应体系，每组设置3个重复，反应条件按照引物不同退火温度给予相应程序设置。以β-actin为参照基因，采用2-△△Ct法计算lncRNA MT1JP的相对表达水平。

2 结 果

2.1肺腺癌组织与癌旁组织中lncRNA MT1JP表达水平比较 肺腺癌组织中lncRNA MT1JP相对表达水平明显低于对应的癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。见图1。

2.2LncRNA MT1JP在肺腺癌组织中的表达与临床病理特征的关系 不同肿瘤大小、术后TNM分期及淋巴结是否转移患者lncRNA MT1JP在肺腺癌组织中的表达水平比较，差异均有统计学意义(χ2=5.562、11.667、7.525，P<0.05)，见表1。

表1 LncRNA MT1JP在肺腺癌组织中的表达患者临床病理参数情况[n(%)]

续表1 LncRNA MT1JP在肺腺癌组织中的表达患者临床病理参数情况[n(%)]

3 讨 论

随着环境污染的加剧和社会生活压力的增大，世界和中国的肿瘤发病谱也随之改变，肺癌已经成为目前世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，严重危胁人民生命健康安全[16]。有研究显示，以肺腺癌为主的非小细胞肺癌的预后无明显改善[17-19]。直到近年来薄层CT的广泛使用使得更多的早期肺癌被发现并得以早期干预治疗，以及许多针对EGFR、KARS等肺腺癌驱动基因的靶向治疗药物的研发成功，大大地改善了肺腺癌患者的预后[20-21]。但对于中晚期肺腺癌患者而言，术后容易复发转移，总体预后不佳[22]。肺腺癌的发生发展涉及多步骤、多阶段的演化，包括多种基因的异常表达和表观遗传学的变化[23]。LncRNA在肺腺癌的发生发展过程中具有重要的作用[24]，对深入研究肺腺癌的发病机制、及早诊治具有重要意义。

LncRNA MT1JP是一种新发现的lncRNA，在膀胱癌、肝癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌中低表达，且起着抑癌的作用[25-26]。有研究表明，lncRNA MT1JP通过与TIAR相互作用来调节P53信号通路发挥抑癌作用[27]。祁海燕等[28]发现lncRNA MT1JP可能通过上调P53表达抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的转移和侵袭。国内马吉勇等[29]研究表明，lncRNA MT1JP可能是通过mRNA-423-3p/Bim 轴途径在肺腺癌中发挥抑癌作用的，即通过下调mRNA-423-3p的表达激活上调抑癌基因Bim的表达，间接抑制了肺腺癌的发生发展。本研究结果表明，肺腺癌组织中lncRNA MT1JP相对表达水平明显低于对应的癌旁组织，推测lncRNA MT1JP的表达缺失可能与肺腺癌的恶性生物学行为有关。另外，lncRNA MT1JP在肺腺癌中的低表达与肿瘤大小、淋巴结转移情况、TNM分期等临床病例特征具有明显的相关性。LncRNA MT1JP在肺腺癌中具体确切的调控机制有待于后期进一步的实验研究。

综上所述，lncRNA MT1JP在肺腺癌组织中相对低表达，并且与患者肿瘤的恶性生物学行为有关。LncRNA MT1JP可能参与了肺腺癌的发生发展，有望成为肺腺癌诊断和预后判断的新靶点。