I-FABP、Gln及CBG在新生儿坏死性小肠炎中表达及临床意义*

杜会蒙 李 钦 张园园 高香花

郑州大学附属儿童医院 河南省儿童医院 郑州儿童医院新生儿外科，河南省郑州市 450000

新生儿坏死性小结肠炎(Neonatal necrotizing colitis，NEC)在近20年来发病率有逐渐上升的趋势，与NICU、早产儿存活率增加有关[1]。大多数患者在确诊时肠道坏死明显，对患者预后造成不良影响[2]。肠型脂肪酸结合蛋白(Intestinal fatty acid binding protein，I-FABP)仅在胃肠道黏膜中存在，特异性较高，在以往文献研究中发现，在肠缺血性疾病中I-FABP表达明显升高[3]。谷氨酰胺(Glutamine，Gln)作为人体中含量丰富的氨基酸，Gln缺乏在多种疾病中发挥着重要的作用，其浓度变化可能与NEC发生密切相关[4]。在以往文献研究中认为，β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase，CBG)浓度变化比肠道组织学变化更早，可作为肠道缺损性损伤的重要生化指标[5]。为了解上述指标在NEC中的临床意义，本研究收集2016—2020年本院收治的NEC患者临床资料，通过对比分析进一步讨论I-FABP、Gln及CBG与NEC的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016年2月—2020年2月在本院新生儿科收治的NEC患儿111例设为观察组，其中男58例，女53例，胎龄 27+2～40+1周，平均胎龄(37.59±1.88)周，平均体重(2 867±559)g，参考《实用新生儿学》[3]分期：Ⅰ期29例，Ⅱ期58例，Ⅲ期24例。纳入标准：(1)经临床检查、影像学检查等确诊；(2)患儿监护人知晓并同意本次研究，签署相关知情同意书；(3)符合《实用新生儿学》[3]中相关诊断标准。排除标准：(1)住院时间低于24h；(2)存在先天性消化道疾病患儿；(3)存在免疫性或血液疾病者。另选取本院同期出生健康新生儿105例作为对照组，入选经体检显示身体健康，无其他影响本研究疾病存在。其中男51例，女54例，胎龄27+2～40+1周，平均胎龄(37.89±1.16)周，平均体重(2 922±560)g。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 I-FABP、Gln及CBG检测方法 患儿在确诊后24h内空腹采血，健康新生儿则在同期取头或上肢静脉血5ml，处理后进行检测。I-FABP使用酶联免疫吸附法进行检测，所使用试剂由上海酶联生物研究所提供，实验步骤均按照试剂所配套说明书进行。Gln使用反向高效液相色谱法进行检测，使用仪器由瑞士BUCHI公司所提供的Sepcore X50反相高效液相色谱仪，试剂为仪器配套，实验步骤均按照试剂所配套说明书进行。CBG使用酶联免疫吸附进行测定，试剂由上海希美生物科技有限公司提供。

1.3 观察指标 对比不同人群以及不同分期NEC者中I-FABP、Gln及CBG表达水平，并分析I-FABP、Gln及CBG对NEC诊断价值。

2 结果

2.1 两组I-FABP、Gln及CBG水平比较 观察组患者I-FABP、CBG水平明显高于对照组，Gln水平则明显低于对照组(P<0.05)，见表1。

表1两组I-FABP、Gln及CBG水平比较

2.2 NEC不同分期患者I-FABP、Gln及CBG水平比较 I期NEC患儿I-FABP、CBG水平明显低于Ⅱ期、Ⅲ期，Gln则明显高于Ⅱ期、Ⅲ期(P<0.05)，见表2。

表2NEC不同分期患者I-FABP、Gln及CBG水平比较

2.3 I-FABP、Gln及CBG对NEC诊断价值分析 ROC结果显示，I-FABP、Gln及CBG对NEC单独检测AUC分别为0.854、0.809、0.841，联合(同时检测I-FABP+Gln+CBG)诊断为0.886，明显高于单独诊断(P<0.05)。见表3及图1。

表3I-FABP、Gln及CBG对NEC诊断价值分析

图1I-FABP、Gln及CBG单项及联合诊断ROC曲线图

3 讨论

NEC随着患者病情进展，在晚期会有肠道缺血、坏死、穿孔等表现，可引发急性腹膜炎，严重威胁患儿生命健康。因此，寻找NEC诊断、预后评估、病情评估的血清学标志物是临床研究热点。

3.1 I-FABP、Gln及CBG水平在NEC的表达及意义 I-FABP在小肠单层柱状上皮中分泌，属于水溶性蛋白质，由于其只在肠道黏膜中存在，组织来源特异性高。在以往文献研究中显示，I-FABP水平与脂代谢存在相关性，在肠道中脂肪酸摄取多的部位I-FABP表达峰度也明显增高，脂肪酸摄取少的则表达较低[6]。I-FABP也有较强的组织特异性，在小肠、陷窝表皮、结肠黏膜微绒毛顶端中表达水平明显增加，在成人中只在十二指肠、胃部表达丰富。在出现肠道缺血性后，会累及肠黏膜上皮细胞，从而刺激小肠单层柱状上皮细胞分泌出I-FABP，随后由门静脉系统转运到外周血周。

Gln作为一种氨基酸，机体中所有的细胞内均含有Gln酶，起可合成Gln。在目前临床中认为，如果机体出现某种特定的感染、高代谢的话机体中所产生的Gln就无法满足机体的基本需求，这时候Gln就属于必需的氨基酸，因此Gln也是条件需要氨基酸。在相关文献中表明，在新生儿中低出生体重、早产儿机体所合成的Gln酶活力低下，并不能满足机体的需求，且婴幼儿生长发育快，对Gln需求高于成年人，因此，其血浆中的浓度也低于成年人，患病率较高。CBG可在机体组织出现早期损伤时就迅速上升，敏感性佳，在肠道中分布可达80%以上，提示CBG水平变化对肠道缺血损伤具有较高的特异性。在此基础上，有研究显示，血清中CBG的水平变化，发现在早期肠道损伤中CBG水平会明显增加，且随着缺血的时间推移，其浓度也会进一步增加[7]。

3.2 I-FABP、Gln及CBG水平对NEC的诊断价值 在本研究中NEC患儿血液中I-FABP、CBG水平明显升高，Gln则明显降低，且随着患儿病情进展，I-FABP、CBG水平呈逐渐上升趋势，Gln呈逐渐下降趋势。提示：I-FABP、CBG及Gln可为NEC早期诊断提供参考，且三者水平变化与患者病情严重程度密切相关。进一步行ROC曲线分析结果显示，三者联合诊断NEC时，AUC面积为0.886，明显高于各项单独诊断，提示三者联合可为临床诊断提供更全面参考信息，在一定程度可提高NEC早期诊断率。

综上所述，NEC患儿中I-FABP、CBG水平明显上升，而Gln水平明显降低，三者水平变化可为患者病情评估提供参考，且三者联合在NEC诊断中有较高的使用价值。但本研究样本例数较少，可能对结论产生一定影响，可进一步扩大研究，分析三者对NEC患者预后评估价值。